本文關(guān)鍵詞：氫氣對(duì)低壓低氧環(huán)境中雄性大鼠生殖功能的防護(hù)研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的本課題旨在利用氫氣的選擇性抗氧化特性,通過動(dòng)物實(shí)驗(yàn),研究探索高原低壓低氧環(huán)境導(dǎo)致雄性生殖健康損傷過程中活性氧(Reactive Oxygen Species,ROS)的作用機(jī)制,以及氫氣對(duì)雄性生殖系統(tǒng)損傷的防護(hù)效果。方法1.將48只成年雄性Wistar大鼠隨機(jī)分為空白對(duì)照組(C),低壓低氧模型組(H),低壓低氧和生理鹽水干預(yù)組(HS),低壓低氧和氫氣飽和生理鹽水干預(yù)組(HH),各組又分為15d組和30d組。其中C組在低壓氧艙外飼養(yǎng),其余各組均在低壓氧艙中飼養(yǎng),用低壓氧艙模擬海拔6000m環(huán)境。在低壓氧艙干預(yù)的同時(shí),HS組腹腔注射生理鹽水(10ml/Kg/d),HH組腹腔注射氫氣飽和生理鹽水(10ml/Kg/d)。2.干預(yù)期滿后,取大鼠睪丸組織,常規(guī)蘇木素-伊紅(HE)染色,在光鏡下觀察大鼠睪丸組織形態(tài)改變,在透射電鏡(Transmission Electron Microscope,TEM)下觀察大鼠睪丸超微組織結(jié)構(gòu)變化。3.取大鼠雙側(cè)附睪尾制成精子懸液,在相差顯微鏡下檢測(cè)精子濃度,觀察精子活力,采用低滲膨脹(Hypo-osmotic Swelling,HOS)實(shí)驗(yàn)檢測(cè)精子存活率,采用Diff-Quik快速染色法,觀察分析異常形態(tài)精子所占比例。4.取大鼠血清,采用固相免疫放射法檢測(cè)血清中睪酮(Testosterone,T)、黃體生成素(Luteinizing Hormones,LH)、促卵泡生成激素(Follicle Stimulating Hormone,FSH)等性激素水平。5.按照試劑盒說明書,檢測(cè)大鼠血清中羥自由基(Hydroxyl radical,?OH)生成能力和脂質(zhì)過氧化代謝產(chǎn)物丙二醛(Malondialdehyde,MDA)的含量,同時(shí)檢測(cè)大鼠血清總抗氧化能力(Total Antioxidant Capacity,T-AOC)的水平。結(jié)果1.HE染色結(jié)果顯示,H15d組與C15d組相比,生精小管管壁褶皺,生精上皮變薄,生精細(xì)胞排列紊亂,數(shù)量顯著減少,H30d組與H15d組相比,生精上皮又復(fù)增厚,生精細(xì)胞數(shù)量也趨增多,但上皮內(nèi)可見空泡樣變。HS組與H組相比未見顯著差異。HH15d組與H15d組和HS15d組相比,生精細(xì)胞數(shù)量增多,細(xì)胞極性規(guī)則,HH30d組生精上皮也呈增厚改變,管腔內(nèi)生精細(xì)胞形態(tài)規(guī)則,胞核飽滿。2.透射電鏡檢查結(jié)果顯示,H15d組與C15d組相比,大鼠睪丸支持細(xì)胞變性壞死,與精原細(xì)胞界限不清,精原細(xì)胞胞核不規(guī)則,線粒體呈空泡化改變,嵴排列紊亂,細(xì)胞間的緊密連接多被破壞;H30d組與H15d組相比,可見支持細(xì)胞胞核規(guī)整,核仁清晰,但初級(jí)精母細(xì)胞線粒體仍然呈空泡化改變,并伴有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)擴(kuò)張;HS組與H組相比未見顯著差異;HH15d組支持細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)完整,精原細(xì)胞線粒體密度正常,細(xì)胞間界限清晰,HH30d組大鼠睪丸支持細(xì)胞與生精細(xì)胞連接緊密,但初級(jí)精母細(xì)胞中依舊可見線粒體空泡。3.大鼠附睪尾精子懸液檢測(cè)結(jié)果顯示,H組大鼠精子濃度、總活動(dòng)率、存活率均低于C組(P0.01),異常形態(tài)精子較多(P0.01),HS組與H組相比無顯著性差異,而HH15d組與H15d組相比,精子濃度、總活動(dòng)率和存活率均顯著升高(P0.01),異常形態(tài)精子百分率顯著下降(P0.01),HH30d與HS30d組相比,精子濃度和精子總活動(dòng)率明顯較高(P0.05)。4.大鼠血清性激素檢測(cè)結(jié)果顯示,H15d組FSH水平與C15d相比顯著降低(P0.01),H30d組T和FSH水平明顯較低(P0.05)。HS組與H組相比未見顯著差異,HH組與H組和HS組相比,也未見顯著性差異。5.血清·OH、MDA、T-AOC檢測(cè)結(jié)果顯示,H組與C組相比,·OH、MDA、T-AOC均顯著升高(其中H15d組·OH與C15d組相比P0.05,H30d組T-AOC與C30d組相比P0.05,其余均為P0.01),HS組與H組相比多未見顯著差異。HH組與H組相比,多顯示·OH、MDA、T-AOC顯著降低(其中HH15d組·OH與HS15d組相比P0.05,HH30d組·OH與H30d組相比P0.05,與HS30d組相比P0.01,HH30d組MDA與H30d組相比P0.01,HH15d組T-AOC與H15d組相比P0.05,與HS15d組相比P0.01,HH30d組T-AOC與HS30d組相比P0.01)。結(jié)論1.低壓低氧環(huán)境可導(dǎo)致雄性生殖系統(tǒng)損傷及功能障礙;2.低壓低氧環(huán)境中機(jī)體內(nèi)的ROS增多是導(dǎo)致雄性生殖功能損傷的主要機(jī)制3.雄性生殖系統(tǒng)對(duì)低壓低氧環(huán)境造成損傷具有一定適應(yīng)性,但是其適應(yīng)能力不能完全修復(fù)低壓低氧環(huán)境造成的生精功能障礙,因此采取有效的防護(hù)措施是必要的;4.氫氣可以選擇性清除大鼠機(jī)體內(nèi)的?OH等ROS,減輕氧化應(yīng)激造成的損傷,對(duì)低壓低氧環(huán)境導(dǎo)致的雄性大鼠生殖功能損傷具有有效的防護(hù)效果,尤其是對(duì)于初期急性損傷防護(hù)效果更為明顯。
【關(guān)鍵詞】：氫 缺氧 大鼠 精子 氧自由基
【學(xué)位授予單位】：第四軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R82
【目錄】：

• 縮略語表5-7
• 中文摘要7-10
• 英文摘要10-14
• 前言14-16
• 文獻(xiàn)回顧16-22
• 第一部分 氫氣對(duì)低壓低氧環(huán)境中Wistar大鼠睪丸組織結(jié)構(gòu)的影響22-32
• 1 材料22-23
• 2 方法23-25
• 3 結(jié)果25-30
• 4 討論30-32
• 第二部分 氫氣對(duì)低壓低氧環(huán)境中Wistar大鼠精子質(zhì)量的影響32-39
• 1 材料32
• 2 方法32-35
• 3 結(jié)果35-37
• 4 討論37-39
• 第三部分 氫氣對(duì)低壓低氧環(huán)境中Wistar大鼠血清性激素水平的影響39-44
• 1 材料39
• 2 方法39-40
• 3 結(jié)果40-41
• 4 討論41-44
• 第四部分 氫氣對(duì)低壓低氧環(huán)境中Wistar大鼠血清中·OH、MDA和T-AOC的影響44-50
• 1 材料44
• 2 方法44-45
• 3 結(jié)果45-46
• 4 討論46-50
• 小結(jié)50-52
• 參考文獻(xiàn)52-59
• 附錄59-63
• 個(gè)人簡(jiǎn)歷和研究成果63-64
• 致謝64

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 陳敏,李強(qiáng),陳彬;過氧亞硝基陰離子的研究進(jìn)展[J];生命的化學(xué);2003年06期

  本文關(guān)鍵詞：氫氣對(duì)低壓低氧環(huán)境中雄性大鼠生殖功能的防護(hù)研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：355779