模擬失重對大鼠腎上腺髓質(zhì)激素分泌及miRNA-375表達的影響
發(fā)布時間:2017-04-29 07:17
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【摘要】:研究背景和目的:失重是指物體在環(huán)境中有質(zhì)量而不表現(xiàn)重量的狀態(tài)。航天員在太空工作過程中受到的失重環(huán)境對人體肌肉骨骼、血液及心血管等系統(tǒng)都會產(chǎn)生影響。近年來,隨著航天事業(yè)的飛速發(fā)展,失重環(huán)境對心血管及內(nèi)分泌系統(tǒng)影響的機理探討和深入研究再度成為熱點問題。Morey-Holton尾部懸吊模型是目前常用的以動物為實驗對象的模擬失重模型。本實驗利用該模型來研究模擬失重環(huán)境下大鼠腎上腺中髓質(zhì)激素的分泌及mi RNA-375的表達情況。研究方法:選取SPF級成年雄性健康Wistar大鼠56只進行尾懸吊模擬失重實驗,根據(jù)尾懸吊時間不同分為6 h、12 h、1 d、3 d、5 d、7 d及0 d(對照)共七組(n=8),實驗結(jié)束后觀察各組大鼠體重變化和腎上腺重量變化,HE染色觀察腎上腺髓質(zhì)細胞形態(tài)學變化,電子顯微鏡技術觀察腎上腺髓質(zhì)細胞超微結(jié)構(gòu)變化,放射性免疫法測定血漿中去甲腎上腺素(NE)、腎上腺素(E)和多巴胺(DA)含量,免疫組織化學法觀察髓質(zhì)細胞內(nèi)酪氨酸羥化酶(TH)蛋白表達,Western-blot技術檢測腎上腺TH和多巴胺β-脫氫酶(DBH)表達,熒光實時定量PCR法測定腎上腺TH m RNA、DBH m RNA和mi RNA-375表達。結(jié)果:懸吊組大鼠懸吊12 h后體重顯著低于未懸吊組大鼠(P0.05),懸吊5 d和7 d后體重也明顯低于未懸吊組(P0.05);光鏡下可見懸吊3 d組大鼠髓質(zhì)內(nèi)血竇擴張,淤血癥狀明顯,但細胞形態(tài)未見明顯改變;電鏡下可見懸吊12 h和1 d組髓質(zhì)細胞內(nèi)線粒體、粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基復合體等細胞器數(shù)目開始增多,懸吊3 d組髓質(zhì)細胞內(nèi)的線粒體腫脹明顯,懸吊7 d組線粒體嵴開始出現(xiàn)溶解現(xiàn)象;尾懸吊模擬失重條件下大鼠血漿腎上腺髓質(zhì)激素波動明顯,6 h~12 h出現(xiàn)一過性下降,隨后急劇升高,3 d時形成峰值。RT-PCR結(jié)果顯示,各組大鼠腎上腺組織TH m RNA表達波動明顯,6 h時呈現(xiàn)一過性下降,隨即上升,1 d時達峰值,之后呈下降趨勢,5 d時形成谷值。大鼠腎上腺髓質(zhì)TH蛋白表達以尾懸吊3 d時染色最強。腎上腺髓質(zhì)中mi RNA-375表達表現(xiàn)為尾懸吊早期(6 h)呈一過性顯著升高,隨后快速下降,12 h、1 d和3 d時的表達受到明顯抑制,表達量顯著下降,5 d時表達量增加,7 d時顯著升高(P0.05)。結(jié)論:本實驗運用多種實驗技術對模擬失重環(huán)境中腎上腺髓質(zhì)形態(tài)和功能及mi RNA-375表達變化進行了研究。結(jié)果顯示,模擬失重環(huán)境可造成實驗動物體重下降,并引起機體應激反應和腎上腺髓質(zhì)激素分泌合成變化。研究發(fā)現(xiàn),mi RNA-375在模擬失重引起的應激反應過程中發(fā)揮重要作用,其可能通過相關分子信號通路作用于靶基因來調(diào)節(jié)TH蛋白的表達,進而調(diào)控腎上腺髓質(zhì)激素的合成與分泌。研究結(jié)果提示,模擬失重環(huán)境可引起腎上腺髓質(zhì)發(fā)生一系列病理生理改變,影響大鼠腎上腺髓質(zhì)激素分泌,其機制可能與mi RNA-375通過復雜的信號通道調(diào)控TH表達有關。本研究為解決宇航員中長期航天飛行及返回地面后的心血管系統(tǒng)脫適應癥狀問題提供了參考依據(jù)。
【關鍵詞】:失重 microRNA-375 酪氨酸羥化酶 兒茶酚胺
【學位授予單位】:安徽醫(yī)科大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2015
【分類號】:R85
【目錄】:
- 中英文縮略詞表5-8
- 中文摘要8-10
- 英文摘要10-13
- 前言13-16
- 第一部分 模擬失重環(huán)境對大鼠腎上腺髓質(zhì)激素分泌的影響16-42
- 引言16
- 材料與方法16-28
- 結(jié)果28-38
- 討論38-42
- 第二部分 模擬失重環(huán)境影響腎上腺髓質(zhì)中mi RNA-375 表達42-49
- 引言42
- 材料與方法42-47
- 結(jié)果47-48
- 討論48-49
- 全文討論49-50
- 全文結(jié)論50-51
- 參考文獻51-55
- 附錄一55-57
- 附錄二57-58
- 附錄三58-59
- 致謝59-60
- 綜述60-73
- 參考文獻67-73
【參考文獻】
中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前3條
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中國博士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前2條
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本文關鍵詞:模擬失重對大鼠腎上腺髓質(zhì)激素分泌及miRNA-375表達的影響,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
本文編號:334435
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