【摘要】：目的:本研究探討急性心肌缺血后HFABP、Tn-T、caspase3及RIP3在心肌中表達(dá)情況的改變,以證實聯(lián)合檢測上述因子是否對急性心肌梗死后的診斷有價值。方法:本研究分為兩部分,第一部分,結(jié)扎大鼠冠脈左前降支制作急性心肌缺血模型,分為(1)對照組,(2)假手術(shù)組,(3)15min組,(4)30min組,(5)1h組,(6)3h組,(7)6h組,(8)9h組,使用心電圖確定模型成功,心肌取材后,對大鼠心肌行TTC,HE染色,應(yīng)用免疫組織化學(xué)及免疫熒光技術(shù)觀察HFABP、Tn-T、caspase3及RIP3因子在心肌中的表達(dá)情況,并應(yīng)用western-blotting技術(shù)對其進(jìn)行定量分析,使用ELISA技術(shù)對大鼠心肌梗死后血液中HFABP、Tn-T含量進(jìn)行分析,并利用電鏡技術(shù)觀察大鼠心梗后心肌細(xì)胞形態(tài)學(xué)的微觀改變;第二部分,選取寧夏醫(yī)科大學(xué)病理系2007年至2016年30例心肌組織標(biāo)本,分為(1)對照組,(2)冠脈狹窄組,(3)心肌梗死組,對選取的標(biāo)本進(jìn)行HE染色,觀察冠脈狹窄程度及其相應(yīng)心肌的改變,并應(yīng)用免疫組織化學(xué)染色觀察HFABP、Tn-T、caspase3及RIP3因子在心肌中表達(dá)改變情況。結(jié)果:第一部分實驗,(1)心電圖所示,手術(shù)成功后心電圖S-T段呈弓背狀抬高,(2)TTC染色所示,梗死區(qū)心肌蒼白,非梗死區(qū)心肌呈磚紅色,(3)HE染色所示,缺血后心肌細(xì)胞排列紊亂,胞質(zhì)水腫,淡染,心肌橫紋消失,核固縮凝集、深染,并有炎細(xì)胞局灶浸潤,并可發(fā)現(xiàn)心肌波浪狀改變,部分心肌有斷裂,(4)免疫組織化學(xué)及免疫熒光染色所示,結(jié)扎大鼠冠脈左前降支15min后缺血心肌HFABP、Tn-T即可出現(xiàn)斑片狀缺失,隨著缺血時間延長,HFABP、Tn-T明顯缺失,而caspase3、RIP3表達(dá)有升高,(相對于對照組,p0.05)(5)western-blotting檢測大鼠心肌HFABP、Tn-T、caspase3及RIP3所示,隨著缺血時間延長,HFABP、Tn-T含量減少,caspase3、RIP3含量增多(相對于對照組,p0.05),(6)使用ELISA技術(shù)檢測大鼠心肌梗死后血液中HFABP、Tn-T含量表明,血液中HFABP、Tn-T隨缺血時間延長,含量升高(相對于對照組,p0.05),(7)電鏡觀察心梗后心肌形態(tài)微觀改變可見,線粒體疏松,變性,腫脹,呈空泡狀,內(nèi)可見線粒體嵴溶解、斷裂;第二部分實驗,(1)HE染色所示,冠脈狹窄組與心肌梗死組可見冠脈管腔明顯狹窄,心肌梗死組心肌中可見大量中性粒細(xì)胞浸潤,(2)免疫組化學(xué)染色所示,HFABP、Tn-T在對照組表達(dá)強(qiáng)烈,在冠脈狹窄組與心肌梗死組表達(dá)減弱或缺失,caspase3、RIP3在對照組表達(dá)弱,在冠脈狹窄組與心肌梗死組表達(dá)增強(qiáng)(p0.05)。結(jié)論:HFABP、Tn-T、caspase3及RIP3在早期急性心肌梗死中表達(dá)有改變,聯(lián)合檢測這些因子對急性心肌梗死的早期診斷有一定的價值。
【學(xué)位授予單位】：寧夏醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：D919.4
【圖文】：

寧夏醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文 第一部分結(jié)果1．心電圖改變未結(jié)扎冠狀動脈左前降支的大鼠，其心電圖表現(xiàn)為心律齊，S-T 段與基線齊平，未見異常波形改變，見圖 1A；結(jié)扎大鼠冠狀動脈左前降支后，可見其心電圖，明顯改變，表現(xiàn)為 S-T 段明顯抬高，抬高幅度可大于 0.1mv，呈“墓碑樣”或“紅旗樣”改變，見圖 1B。

15圖 2 大鼠手術(shù)大體圖及 TTC 染色結(jié)果3．HE 染色結(jié)果對大鼠心肌進(jìn)行 HE 染色可見，正常組大鼠與假手術(shù)組大鼠心肌細(xì)胞排列緊密，胞質(zhì)染色淡紅，均染，未見水腫，胞核未見固縮，凝集，碎裂，組織間隙未見水腫，見圖3A、B；冠脈結(jié)扎后，可見心肌細(xì)胞排列紊亂，胞質(zhì)水腫，淡染，心肌橫紋消失，核固縮凝集、深染，并有炎細(xì)胞局灶浸潤，并可發(fā)現(xiàn)心肌波浪狀改變，部分心肌有斷裂，這些改變在冠脈結(jié)扎后各組心肌中（15min-6h）都有不同的表現(xiàn)，或變現(xiàn)為其中一種，或變現(xiàn)為其中多種，見圖 3C、D、E、F、G；在冠脈結(jié)扎后 9h，心肌細(xì)胞明顯可見核碎裂、核固縮、核溶解，并且伴有心肌間質(zhì)出血，中性粒細(xì)胞浸潤，見圖 3H（bar=50μm）

圖 3 HE 染色結(jié)果 400×（bar=50μm）4．電鏡結(jié)果電鏡可直接觀察到心肌細(xì)胞內(nèi)超微結(jié)構(gòu)的損傷，圖 4A 為正常組大鼠心肌，肌梗死組大鼠心肌，可以發(fā)現(xiàn)，圖 4B1 與 4A1 相比，心肌細(xì)胞核出現(xiàn)核固縮質(zhì)邊集，核邊緣呈鋸齒狀，形態(tài)不規(guī)則；圖 4B2 與 4A2 相比，線粒體疏松，，呈空泡狀，內(nèi)可見線粒體嵴溶解、斷裂，并可見線粒體數(shù)目發(fā)生改變；圖A3 相比，可見心肌間質(zhì)明顯水腫。并且在心肌梗死組大鼠心肌中還可以發(fā)現(xiàn)增寬，肌絲斷裂，肌節(jié)消失，并有溶酶體及脂質(zhì)體產(chǎn)生。（bar=2000nm）

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本文編號：2803228