【摘要】：目的:大麻素2型受體(cannabinoid type 2 receptor,CB2R)是內(nèi)源性大麻素系統(tǒng)的重要組織成員之一,是一種七次跨膜的G蛋白偶聯(lián)受體。本課題組前期研究發(fā)現(xiàn)CB2R在皮膚和骨骼肌損傷愈合過程中的表達(dá)具有時(shí)間規(guī)律性,可以作為推斷皮膚及骨骼肌損傷時(shí)間的參考指標(biāo)。同時(shí),最新的研究表明CB2R也表達(dá)于中樞神經(jīng)系統(tǒng)的部分神經(jīng)元及膠質(zhì)細(xì)胞中,CB2R在正常條件下表達(dá)水平較低,但具有很高的可誘導(dǎo)性,在腦挫傷等病理?xiàng)l件下CB2R的表達(dá)會(huì)迅速發(fā)生變化,調(diào)節(jié)炎癥反應(yīng),發(fā)揮神經(jīng)保護(hù)作用。上述研究結(jié)果提示腦挫傷后CB2R的表達(dá)變化可能與損傷時(shí)間具有相關(guān)性。本研究通過檢測小鼠腦挫傷后不同時(shí)間點(diǎn)皮質(zhì)中CB2R的表達(dá)變化情況,探討其是否可以作為腦挫傷損傷時(shí)間推斷的生物學(xué)指標(biāo)。研究方法:健康清潔級(jí)雄性C57BL/6小鼠,8周齡,72只,體重23~28g。實(shí)驗(yàn)小鼠隨機(jī)分為假手術(shù)組和傷后0.5h、1h、3h、6h、12h、1d、3d、7d、14d、21d、28d組,每組6只小鼠。實(shí)驗(yàn)組通過Precision Cortical Impactor 3000(PCI3000)裝置建立腦挫傷模型。假手術(shù)組只進(jìn)行頭皮切開及顱骨開窗,不進(jìn)行撞擊。小鼠經(jīng)腹腔注射過量麻醉劑處死后,打開胸、腹腔,充分暴露心臟,經(jīng)左心室緩慢推注磷酸鹽緩沖液(PBS)50mL后,取出全腦,沿挫傷區(qū)正中冠狀切開大腦,一半腦組織提取挫傷區(qū)周圍2mm腦皮質(zhì),用于Western blot檢測,另一半用4%多聚甲醛/PBS整體固定后用于組織形態(tài)學(xué)檢查,通過免疫組織化學(xué)及免疫熒光染色觀察CB2R表達(dá)變化情況。結(jié)果:1.HE染色結(jié)果顯示,腦挫傷早期,組織出血、水腫及細(xì)胞壞死逐漸加重,同時(shí)可見炎癥反應(yīng)逐漸增強(qiáng),腦挫傷中后期可見新生血管及膠質(zhì)細(xì)胞增生,壞死組織液化吸收,膠質(zhì)瘢痕形成。2.免疫組織化學(xué)染色結(jié)果顯示,假手術(shù)組皮質(zhì)中少量細(xì)胞呈CB2R陽性染色;傷后CB2R陽性細(xì)胞比率逐漸升高,于傷后12h達(dá)第一次高峰,而后逐漸下降,傷后7d達(dá)第二次高峰,隨后逐漸下降,至傷后28d基本恢復(fù)至正常水平。3.Western blot結(jié)果與免疫組織化學(xué)染色結(jié)果相一致。4.免疫熒光染色結(jié)果顯示腦挫傷后神經(jīng)元、單核細(xì)胞、星形膠質(zhì)細(xì)胞均有CB2R表達(dá),CB2R~+NeuN~+、CB2R~+CD68~+、CB2R~+GFAP~+細(xì)胞比率均呈單峰變化模式,分別于傷后12h、1d、7d達(dá)到高峰。結(jié)論:1.小鼠腦挫傷后CB2R在神經(jīng)元、單核細(xì)胞及星形膠質(zhì)細(xì)胞中的表達(dá)提示其可能參與調(diào)節(jié)這些細(xì)胞的生物學(xué)功能。2.腦挫傷后CB2R總體及在神經(jīng)元、單核細(xì)胞及星形膠質(zhì)細(xì)胞中的動(dòng)態(tài)表達(dá)均存在時(shí)間規(guī)律性,有望成為法醫(yī)學(xué)推斷腦挫傷損傷時(shí)間的生物學(xué)指標(biāo)。
【圖文】：

與假手術(shù)組相比，傷后 6h、12h、7d、14d 組 CB2R 的表達(dá)具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（p<0.05），其余各組比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（p>0.05）（圖 4、圖 5 及表 2）。圖4. 腦挫傷后CB2R Western blot結(jié)果

手術(shù)組升高，比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（p<0.05）；其余各組與假手術(shù)組相比均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（p>0.05），，傷后7d組CB2R陽性細(xì)胞比率高于傷后12h組，但二者比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（p>0.05）（圖2、圖3及表1）。圖 2. 腦挫傷后不同時(shí)間點(diǎn) CB2R 免疫組織化學(xué)染色，×400A：假手術(shù)組；B：腦挫傷后 0.5h；C：腦挫傷后 1h；D：腦挫傷后 3h；E：腦挫傷后 6h；F：腦挫傷后 12h；G：腦挫傷后 1d；H：腦挫傷后 3d；I：腦挫傷后 7d；J：腦挫傷后 14d；K：腦挫傷后 21d；L：腦挫傷后 28d。標(biāo)尺=50μm
【學(xué)位授予單位】：中國醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號(hào)】：D919.4

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6 記者 劉海英;英研究稱大麻素或可用于中風(fēng)治療[N];科技日?qǐng)?bào);2013年

7 陸志城;導(dǎo)致骨質(zhì)疏松癥 大麻素樣物質(zhì)是元兇？[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2005年

8 ;人體大麻素可能引發(fā)骨質(zhì)疏松[N];中國高新技術(shù)產(chǎn)業(yè)導(dǎo)報(bào);2005年

9 麥迪信;大麻素可抑制皮膚癌[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2003年

10 編譯 王金元;運(yùn)動(dòng)為什么能帶來快感？[N];北京科技報(bào);2005年

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1 谷新醫(yī);腺苷和大麻素在伏隔核引發(fā)去極化對(duì)抑制性突觸后電流的抑制作用的研究[D];吉林大學(xué);2004年

2 蘇彥欣;大麻素AEA對(duì)學(xué)習(xí)記憶功能的影響及其作用機(jī)制[D];河北醫(yī)科大學(xué);2006年

3 楊潔;大麻素Ⅱ型受體激動(dòng)劑在惡性黑素瘤中血管生成作用機(jī)制的研究[D];中國人民解放軍軍醫(yī)進(jìn)修學(xué)院;2009年

4 韓爽;三氮唑酮、香豆素和喹啉二酮類大麻素Ⅱ型受體選擇性配體的設(shè)計(jì)、合成和活性評(píng)價(jià)[D];浙江大學(xué);2014年

5 吳明春;尼古丁通過激活大麻素受體減輕Aβ1-42所致神經(jīng)損傷的實(shí)驗(yàn)研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2015年

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本文編號(hào)：2696936