發(fā)布時(shí)間：2020-03-30 03:35

【摘要】：彌漫性軸索損傷(diffuse axonal injury,DAI)指在頭部遭受到直線加/減或(和)旋轉(zhuǎn)性暴力時(shí),腦組織之間由于質(zhì)量不同及運(yùn)動(dòng)速度不一而產(chǎn)生的壓縮、伸展和剪切應(yīng)力,導(dǎo)致的以神經(jīng)軸索斷裂為主要特征的廣泛性腦白質(zhì)損傷。髓鞘損傷可能是白質(zhì)損傷的重要組成部分,同時(shí)伴有神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞群的復(fù)雜反應(yīng)。本研究擬探討大鼠彌漫性軸索損傷后膠質(zhì)細(xì)胞的反應(yīng)性變化規(guī)律及其與軸索繼發(fā)損傷的相互關(guān)系。60只SD成年大鼠隨機(jī)分為對(duì)照組及DAI后1d、2d、3d、5d和7d組,每組10只。參照改良Marmarou方法制作DAI模型,并選取胼胝體及腦干上端為觀察部位。通過(guò)固藍(lán)(Luxol Fast Blue,LFB)染色和MBP蛋白免疫印跡法評(píng)價(jià)DAI后髓鞘脫失的程度;采用免疫組織化學(xué)及蛋白免疫印跡技術(shù)檢測(cè)腦組織中少突膠質(zhì)細(xì)胞標(biāo)志物Olig2、小膠質(zhì)細(xì)胞標(biāo)志物Iba1及星形膠質(zhì)細(xì)胞標(biāo)志物GFAP在損傷后不同時(shí)間點(diǎn)的表達(dá)情況;CC-1免疫熒光技術(shù)檢測(cè)成熟少突膠質(zhì)細(xì)胞的反應(yīng)性變化規(guī)律,并進(jìn)一步通過(guò)CC-1/TUNEL雙重?zé)晒馊旧u(píng)估DAI后少突膠質(zhì)細(xì)胞的凋亡程度;最后通過(guò)透射電鏡進(jìn)一步觀察大鼠腦組織胼胝體及腦干的超微結(jié)構(gòu)變化。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示(1)與對(duì)照組相比,DAI大鼠損傷后3d及7d放射冠及腦干區(qū)域LFB髓鞘染色顯著減弱,髓鞘脫失嚴(yán)重;DAI后3d大鼠胼胝體MBP表達(dá)量較對(duì)照組顯著減少;腦干區(qū)域MBP表達(dá)在DAI后1周內(nèi)均明顯降低,其中以DAI后3d最為明顯。(2)DAI大鼠胼胝體部位少突膠質(zhì)細(xì)胞Olig2表達(dá)于損傷后2d、3d及5d顯著增高,而腦干部位在DAI后1周內(nèi)Olig2表達(dá)均較對(duì)照組明顯增加。(3)CC-1標(biāo)記的成熟少突膠質(zhì)細(xì)胞陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)目在DAI大鼠胼胝體及腦干損傷后1d即開(kāi)始明顯降低,且隨損傷時(shí)間的延長(zhǎng)而逐步降低。(4)CC-1/TUNEL標(biāo)記的凋亡成熟少突膠質(zhì)細(xì)胞陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)在DAI大鼠胼胝體及腦干損傷后2d即開(kāi)始明顯增加,且隨損傷時(shí)間的延長(zhǎng)而逐步增加。(5)與對(duì)照組相比,在DAI大鼠的胼胝體和腦干中Iba1標(biāo)記的小膠質(zhì)細(xì)胞陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)目明顯增多,且激活的小膠質(zhì)細(xì)胞呈肥大樣形態(tài)學(xué)改變;蛋白免疫印跡結(jié)果進(jìn)一步證實(shí),在胼胝體及腦干區(qū)域Iba1的表達(dá)均在DAI后2d~7d顯著增高。(6)GFAP標(biāo)記的星形膠質(zhì)細(xì)胞數(shù)目在DAI大鼠胼胝體部位明顯增加;蛋白免疫印跡分析也進(jìn)一步證實(shí),在DAI后3d、5d、7d胼胝體中GFAP表達(dá)顯著增加,而腦干中DAI后不同時(shí)間點(diǎn)GFAP的表達(dá)沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。(7)透射電鏡結(jié)果顯示:在對(duì)照組大鼠胼胝體及腦干,髓鞘為明暗相間的同心圓結(jié)構(gòu),軸膜緊貼內(nèi)層髓鞘,軸漿內(nèi)微管微絲細(xì)胞骨架排列整齊。DAI后3d,胼胝體軸漿內(nèi)細(xì)胞骨架片狀崩解,線粒體高度腫脹,而髓鞘結(jié)構(gòu)僅出現(xiàn)局部分離;腦干內(nèi)大量髓鞘板層結(jié)構(gòu)分離,髓鞘結(jié)構(gòu)向軸漿內(nèi)突壓迫軸漿內(nèi)容物,或者向外突壓迫周?chē)Y(jié)構(gòu),但軸漿內(nèi)細(xì)胞骨架及線粒體結(jié)構(gòu)完整。DAI后7d,在胼胝體和腦干區(qū)域中均可觀察到軸索變性,表現(xiàn)為軸漿內(nèi)細(xì)胞骨架完全崩解,軸漿內(nèi)空白區(qū)域增大(明變性)或者軸漿內(nèi)出現(xiàn)黑色絮狀沉淀物(暗變性)。髓鞘結(jié)構(gòu)呈現(xiàn)廣泛空殼樣改變,板層結(jié)構(gòu)消失,部分髓鞘斷裂。此外,部分髓鞘向空白軸漿內(nèi)塌陷或多余不定形髓鞘形成。以上研究結(jié)果表明,成熟少突膠質(zhì)細(xì)胞對(duì)DAI具有選擇易感性,并伴隨小膠質(zhì)細(xì)胞及星形膠質(zhì)細(xì)胞的激活。成熟少突膠質(zhì)細(xì)胞遲發(fā)性死亡導(dǎo)致的髓鞘脫失可能是導(dǎo)致DAI軸索繼發(fā)損傷的重要因素。因此,明確少突膠質(zhì)細(xì)胞遲發(fā)性死亡的原因以及促進(jìn)髓鞘再生可能為治療DAI提供新思路。
【學(xué)位授予單位】：河北北方學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類(lèi)號(hào)】：D919.4

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 鄭亞北;李春暉;耿連婷;;對(duì)彌漫性軸索損傷臨床診治方案的研究進(jìn)展[J];當(dāng)代醫(yī)藥論叢;2019年14期

2 謝樂(lè)輝;李漢城;邱平華;謝昭太;;重癥彌漫性軸索損傷的早期診治[J];齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2016年07期

3 邱煒;郭志旺;姚雪峰;彭衛(wèi)華;常會(huì)民;;鎂離子結(jié)合機(jī)械通氣早期治療重型彌漫性軸索損傷的臨床療效[J];中華神經(jīng)創(chuàng)傷外科電子雜志;2016年05期

4 楊安強(qiáng);楊曉濱;倪霞;;持續(xù)顱內(nèi)壓監(jiān)護(hù)在兒童彌漫性軸索損傷治療中的作用[J];四川醫(yī)學(xué);2014年01期

5 姚慶和;孫艷;;輕型彌漫性軸索損傷的早期診治[J];中國(guó)臨床神經(jīng)外科雜志;2013年12期

6 劉繼東;陳杰;肖祥東;;彌漫性軸索損傷臨床診治體會(huì)[J];吉林醫(yī)學(xué);2012年16期

7 郭利民;;彌漫性軸索損傷重癥監(jiān)護(hù)的策略及患者預(yù)后相關(guān)性分析[J];現(xiàn)代預(yù)防醫(yī)學(xué);2012年14期

8 高晶玫;張曉林;路陽(yáng);;彌漫性軸索損傷20例的護(hù)理[J];中國(guó)誤診學(xué)雜志;2011年05期

9 劉培東;宋厚俠;賈繼強(qiáng);李貴俠;褚衍勝;王緒超;;彌漫性軸索損傷28例診治體會(huì)[J];中國(guó)實(shí)用神經(jīng)疾病雜志;2011年07期

10 許建新;張斌;;重型彌漫性軸索損傷的救治分析[J];中國(guó)社區(qū)醫(yī)師(醫(yī)學(xué)專(zhuān)業(yè));2011年15期

相關(guān)會(huì)議論文 前10條

1 翟俊忠;王新民;王潤(rùn)起;李軍偉;桂世濤;韓立志;王亮;范軍;;彌漫性軸索損傷31例臨床分析[A];中國(guó)醫(yī)師協(xié)會(huì)神經(jīng)外科醫(yī)師分會(huì)第四屆全國(guó)代表大會(huì)論文匯編[C];2009年

2 張弩;;彌漫性軸索損傷的診斷和治療(附82例報(bào)告)[A];浙江省醫(yī)學(xué)會(huì)創(chuàng)傷學(xué)分會(huì)成立大會(huì)暨2009年浙江省創(chuàng)傷學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2009年

3 張弩;;彌漫性軸索損傷的診斷和治療(附82例報(bào)告)[A];2009年浙江省神經(jīng)外科學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2009年

4 方向明;;彌漫性軸索損傷的診斷與治療[A];2009年浙江省神經(jīng)外科學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2009年

5 李永領(lǐng);張榮;朱烈烈;陳大慶;;小兒彌漫性軸索損傷的診斷與救治[A];2009年浙江省急診醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2009年

6 李永領(lǐng);張榮;朱烈烈;陳大慶;;小兒彌漫性軸索損傷的診斷與救治[A];第七屆全國(guó)創(chuàng)傷學(xué)術(shù)會(huì)議暨2009海峽兩岸創(chuàng)傷醫(yī)學(xué)論壇論文匯編[C];2009年

7 王魁先;席忠義;;彌漫性軸索損傷的診斷與治療[A];第七屆全國(guó)創(chuàng)傷學(xué)術(shù)會(huì)議暨2009海峽兩岸創(chuàng)傷醫(yī)學(xué)論壇論文匯編[C];2009年

8 黃萬(wàn)振;劉超;;彌漫性軸索損傷70例臨床診治分析[A];第七屆全國(guó)創(chuàng)傷學(xué)術(shù)會(huì)議暨2009海峽兩岸創(chuàng)傷醫(yī)學(xué)論壇論文匯編[C];2009年

9 張雙領(lǐng);張飛;朱永輝;王彥彬;;彌漫性軸索損傷的診治體會(huì)(附126例報(bào)告)[A];第七屆全國(guó)創(chuàng)傷學(xué)術(shù)會(huì)議暨2009海峽兩岸創(chuàng)傷醫(yī)學(xué)論壇論文匯編[C];2009年

10 馮東福;李甲;顧磊;李雪元;朱志安;;彌漫性軸索損傷大鼠易損區(qū)微結(jié)構(gòu)損傷的定量研究[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)神經(jīng)外科學(xué)分會(huì)第九次學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2010年

相關(guān)重要報(bào)紙文章 前3條

1 本報(bào)記者 唐聞佳;探索顱腦損傷“不治”困局[N];文匯報(bào);2011年

2 鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院放射科 程敬亮　白潔;急診選CT 重癥選MRI[N];健康報(bào);2010年

3 盧志堅(jiān);顧曉生：善于創(chuàng)新的老法醫(yī)[N];檢察日?qǐng)?bào);2008年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前4條

1 尹衛(wèi)東;環(huán)孢霉素A治療大鼠彌漫性軸索損傷的實(shí)驗(yàn)研究[D];中國(guó)人民解放軍軍醫(yī)進(jìn)修學(xué)院;2002年

2 張競(jìng)文;彌散張量成像及磁敏感加權(quán)成像對(duì)創(chuàng)傷性腦損傷的實(shí)驗(yàn)與臨床動(dòng)態(tài)研究[D];天津醫(yī)科大學(xué);2011年

3 李上勛;彌漫性軸索損傷彌散張量成像及免疫組織化學(xué)研究[D];華中科技大學(xué);2012年

4 孫林;孕酮調(diào)控內(nèi)皮祖細(xì)胞水平促進(jìn)彌漫性軸索損傷大鼠神經(jīng)功能修復(fù)的實(shí)驗(yàn)研究[D];天津醫(yī)科大學(xué);2013年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 李美玉;彌漫性軸索損傷后膠質(zhì)細(xì)胞的反應(yīng)變化[D];河北北方學(xué)院;2019年

2 牛德?tīng)I(yíng);創(chuàng)傷性腦室內(nèi)出血與彌漫性軸索損傷的相關(guān)性研究[D];濱州醫(yī)學(xué)院;2017年

3 劉海萍;彌漫性軸索損傷患者不同頻段局部一致性靜息態(tài)功能磁共振研究[D];南昌大學(xué);2018年

4 蔡宇;大鼠彌漫性軸索損傷后引起血腦屏障通透性變化機(jī)制的研究[D];皖南醫(yī)學(xué)院;2018年

5 倪柯;尼莫地平用于彌漫性軸索損傷患者的有效性和安全性的系統(tǒng)評(píng)價(jià)[D];華中科技大學(xué);2016年

6 候國(guó)濤;不同壓力高壓氧治療彌漫性軸索損傷患者的臨床療效分析[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2017年

7 姚順;RS-fMRI聯(lián)合DTI在彌漫性軸索損傷意識(shí)障礙患者中的早期應(yīng)用研究[D];南方醫(yī)科大學(xué);2015年

8 盧海濤;彌漫性軸索損傷后遲發(fā)性神經(jīng)元死亡的實(shí)驗(yàn)觀察[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2003年

9 宋玉成;鈣離子信號(hào)在彌漫性軸索損傷發(fā)生發(fā)展中的初步研究[D];華中科技大學(xué);2013年

10 李元朋;彌漫性軸索損傷（DAI）程度和預(yù)后與髓鞘堿性蛋白（MBP）含量的相關(guān)性研究[D];佳木斯大學(xué);2009年

，

本文編號(hào)：2606968