【摘要】：研究目的：建立運動性疲勞動物模型,觀察肝形態(tài)結(jié)構(gòu)、血清ALT、AST含量評價肝損傷保護效果,從肝自由基、乳酸和糖原代謝,從肝細胞凋亡機制著手,探討穴位(足三里和內(nèi)關(guān))注射人參總皂甙對運動性疲勞大鼠肝保護的機制。研究方法：將24只大鼠隨機分為空白組(0.2 mL生理鹽水穴位注射)、模型組(0.2 mL生理鹽水穴位注射)和人參總皂甙穴位注射組(0.2 mL人參總皂甙穴位注射)等3組�？瞻捉M大鼠常規(guī)飲食和作息,模型組和穴位注射組均以“高60cm、直徑55cm,水深50cm,水溫33±2℃”的塑料圓桶為游泳槽,進行2天適應(yīng)癥性訓(xùn)練,從實驗第3天開始正式實驗。每天穴位注射給藥一次,穴位為足三里和內(nèi)關(guān)(單側(cè)),隔天交替,注1h后,除空白組大鼠外,模型組和穴位注射組大鼠每天早上游泳訓(xùn)練2次,每次自由游泳15min,中間擦干休息10min,連續(xù)訓(xùn)練21天。為保證游泳訓(xùn)練的運動負荷,以木棍及時驅(qū)趕扒在桶池壁邊緣或其他大鼠身上休息的大鼠。為確保大鼠安全,當(dāng)其出現(xiàn)力竭狀態(tài)時,則停止其游泳訓(xùn)練。于末次運動后,在運動訓(xùn)練大鼠完成運動訓(xùn)練后的2h內(nèi),處死各組大鼠：①取血,分離血清,-80℃保存,備用,便于谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)含量的檢測；②剖腹：取肝臟左葉組織適量(每只大鼠均為同一部位取材),-80℃下凍存,備用,便于肝總抗氧化能力(T-AOC),肝丙二醛(MDA)、乳酸(LA)、一氧化氮(NO)和葡萄糖(Glu)含量,肝乳酸脫氫酶(LDH)、誘導(dǎo)型一氧化氮合酶(iNOS)、Caspase-3和Caspase-8活性的檢測。③取肝臟右葉組織適量(每只大鼠均為同一部位),浸泡于10%福爾馬林中固定24 h,進行HE染色,光鏡下觀察肝組織病理改變。研究結(jié)果：1.空白組大鼠肝小葉形態(tài)結(jié)構(gòu)正常,匯管區(qū)形態(tài)完整,未見變性和壞死,單個肝細胞核膜完整,核清晰、呈圓形或橢圓形,胞內(nèi)可見小脂滴,細胞線粒體形態(tài)正常,內(nèi)嵴結(jié)構(gòu)完整,粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)排列均勻整齊；而模型組大鼠肝組織內(nèi)出現(xiàn)點狀、碎片狀細胞,單個肝細胞出現(xiàn)胞漿疏松不均、氣球樣性變,提示存在壞死及炎性細胞浸潤的病理狀態(tài)；穴位注射人參總皂甙組大鼠肝組織病變程度相對較輕,介于空白組和模型組之間。2.與空白組比較,模型組和穴位注射人參總皂甙組大鼠血清ALT、AST含量均有顯著性增加(均有p0.01)；與模型組比較,穴位注射人參總皂甙組大鼠血清ALT、AST含量均有顯著性減少(均有p0.01)3.與空白組比較,模型組和穴位注射人參總皂甙組大鼠肝MDA含量和T-AOC活性均有顯著性增加(均有p0.01)；與模型比較,穴位注射人參總皂甙組大鼠肝MDA含量和T-AOC活性均有顯著性降低(均有p0.01)。4.與空白組比較,模型組大鼠肝乳酸含量和乳酸脫氫酶活性均顯著性增加、肝糖原含量顯著性減少(均有p0.01),穴位注射人參總皂甙組大鼠肝乳酸含量顯著增加(p0.01),但肝乳酸脫氫酶活性和肝糖原含量均無著性差異(均有p0.05)；與模型組比較,穴位注射人參總皂甙組大鼠肝乳酸含量和乳酸脫氫酶活性均有顯著降低(均有p0.01),肝糖原含量顯著性增加(p0.01)5.與空白組比較,模型組和穴位注射人參總皂甙組大鼠肝NO含量,iNOS、 caspase-3和caspase-8活性均有顯著性增加(均有p0.01)；與模型比較,穴位注射人參總皂甙組大鼠肝NO含量,iNOS、caspase-3和caspase-8活性均有顯著性降低(均有p0.01)。結(jié)論：1.以“高60cm、直徑55cm,水深50cm,水溫33±2℃的塑料圓桶作為大鼠游泳槽,使SD成年雄性大鼠每天進行游泳訓(xùn)練2次,每次自由游泳15min,中間擦干休息10min,連續(xù)訓(xùn)練21天,在大鼠游泳訓(xùn)練中,用木棍及時驅(qū)趕扒在桶池壁邊緣或其他大鼠身上休息的大鼠,當(dāng)其出現(xiàn)力竭狀態(tài)時,則停止其游泳訓(xùn)練”為造模方法,可以復(fù)制成功運動性疲勞動物(大鼠)模型。2.足三里和內(nèi)關(guān)隔天交替,單側(cè),穴位注射人參總皂甙,能達到抗疲勞療效,能使運動性疲勞大鼠血清ALT、AST含量均有顯著性減少,經(jīng)HE染色后,大鼠肝小葉可見,匯管區(qū)形態(tài)更完整,變性和壞死較少,單個肝細胞膜、細胞核和細胞質(zhì)等結(jié)構(gòu)相對完好,大鼠肝組織病變得到有效改善。3.穴位注射人參總皂甙對運動性疲勞大鼠肝保護的機制可能是,糾正肝糖原和乳酸代謝異常情況,減輕肝自由基損傷,下調(diào)iNOS,調(diào)節(jié)NO成量,終止caspase-3和caspase-8的激活,調(diào)控肝細胞凋亡
【圖文】：

Ｃ１穴位組Ｘ４００邐Ｃ２穴位組Ｘ２００邐Ｃ３穴位組Ｘ１００逡逑圖１各組大鼠肝形態(tài)結(jié)構(gòu)逡逑．２各姐大鼠血清ＡＬＴ和ＡＳＴ含量的動態(tài)變化逡逑由表１可知，與空白組比較，模型組和穴位注射組大鼠血清ＡＬＴ、ＡＳＴ含著性增加（均有ｐＯ．Ｏｌ）；與模型組比較，穴位注射組大鼠血清ＡＬＴ、ＡＳＴ顯著性減少（均有ｐ＜０．０１）。逡逑表１各組大鼠血清ＡＬＴ和ＡＳＴ含量的動態(tài)變化（ｎ＝８，，Ｓ）逡逑分}D邐ＡＬＴ／邋Ｕ邋？邋Ｌ—１邐ＡＳＴ／邋Ｕ邋．邋Ｌ—ｉ逡逑空白組邐１０７．９２５邋＋邋８．２６７邐１９９．８２５邋＋邋１０．６４０逡逑模型}D邋２４４．６１２＋１５．６７１＊＊邐２Ｓ＞２．９５０±邋１３．６４６＊＊逡逑穴位組邋１７５．４３８邋＋邋１１．７４２＊＊＃＃邐２４３．２３８邋＋邋１１．３７７＊＊＃＃逡逑注：與空白組相比，＊ｐ＜０．０５，＊＊ｐ＜０．０１；與模型組相比，＃ｐ＜０．０５，邋＃＃ｐ＜０．０１。逡逑．３各組大鼠巧Ｔ－ＡＯＣ活性和ＭＤＡ含量比較逡逑由表２可知，與空白組比較，模型組和穴位注射組大鼠肝Ｔ－ＡＯＣ活性、ＭＤ
【學(xué)位授予單位】：廣州中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R87

【參考文獻】

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4 馮毅

本文編號：2563178