針刺對(duì)運(yùn)動(dòng)性骨骼肌損傷大鼠骨骼肌線粒體自噬的影響
本文選題:針刺 切入點(diǎn):大負(fù)荷運(yùn)動(dòng) 出處:《中國(guó)病理生理雜志》2017年11期 論文類型:期刊論文
【摘要】:目的:通過(guò)觀察針刺對(duì)大負(fù)荷運(yùn)動(dòng)大鼠骨骼肌線粒體自噬相關(guān)蛋白表達(dá)的影響,探討針刺在運(yùn)動(dòng)性骨骼肌損傷修復(fù)中的作用及其機(jī)制。方法:將128只成年雄性Sprague-Dawley大鼠隨機(jī)分為4組:空白對(duì)照(control,C;n=8)組、單純運(yùn)動(dòng)(exercise,E;n=40)組、單純針刺(acupuncture,A;n=40)組和運(yùn)動(dòng)針刺(exercise and acupuncture,EA;n=40)組。其中,E和EA組進(jìn)行1次下坡跑運(yùn)動(dòng),A組和EA組(運(yùn)動(dòng)后即刻)施加針刺處理。后3組根據(jù)干預(yù)后不同時(shí)相又分為0 h、12 h、24 h、48 h和72 h亞組(n=8),分別于對(duì)應(yīng)時(shí)點(diǎn)分離比目魚(yú)肌進(jìn)行檢測(cè),使用透射電子顯微鏡觀察骨骼肌線粒體超微結(jié)構(gòu)變化;采用ELISA法檢測(cè)比目魚(yú)肌線粒體定量酶檸檬酸合成酶(CS)的含量變化;應(yīng)用Western blot法檢測(cè)骨骼肌PTEN誘導(dǎo)假定激酶1(PINK1)、parkin和微管相關(guān)蛋白1輕鏈3(LC3)的蛋白表達(dá)變化。結(jié)果:1次大負(fù)荷運(yùn)動(dòng)后大鼠比目魚(yú)肌線粒體出現(xiàn)明顯腫脹和肌膜下積聚等超微結(jié)構(gòu)異常變化,伴有大量自噬體形成;同時(shí)CS的含量明顯減少(P0.05);線粒體自噬蛋白PINK1、parkin和LC3均出現(xiàn)一過(guò)性的表達(dá)升高(P0.05)。運(yùn)動(dòng)后針刺明顯改善了線粒體超微結(jié)構(gòu)的異常變化,減少自噬溶酶體的出現(xiàn),同時(shí)抑制CS的含量減少,下調(diào)PINK1、parkin和LC3在線粒體上的表達(dá)(P0.05)。結(jié)論:1次大負(fù)荷運(yùn)動(dòng)后骨骼肌線粒體結(jié)構(gòu)和數(shù)量受損,通過(guò)激活PINK1/parkin途徑誘發(fā)線粒體自噬的過(guò)度發(fā)生。大負(fù)荷運(yùn)動(dòng)后針刺可以緩解骨骼肌線粒體的損傷,其作用機(jī)制可能是通過(guò)下調(diào)線粒體外膜蛋白PINK1表達(dá),抑制其對(duì)下游胞漿蛋白parkin的招募,進(jìn)而影響LC3與線粒體的結(jié)合以抑制線粒體自噬過(guò)度激活。
[Abstract]:Objective: to observe the effect of acupuncture on the expression of mitochondrial autophagy related protein in skeletal muscle of rats with heavy exercise. Methods: 128 adult male Sprague-Dawley rats were randomly divided into 4 groups: control group (control group) and exercise exercise group (group 40). Group A and group E were treated with acupuncture for one downhill run, group A and group EA (immediately after exercise). The last three groups were divided into 0 h 12 h, 24 h and 48 h according to the different phases after intervention, and the latter three groups were divided into two groups: group A and group EA (immediately after exercise), and the latter three groups were divided into two groups: group A and group EA (immediately after exercise), and the latter three groups were divided into two groups: group A and group EA (immediately after exercise), and the latter three groups were divided into two groups according to different phases after intervention. The soleus muscle was detected at the corresponding time points. The ultrastructure of mitochondria in skeletal muscle was observed by transmission electron microscope (TEM), and the content of mitochondrial quantitative enzyme citrate synthase (CSS) in soleus muscle was detected by ELISA method. Western blot method was used to detect the changes of protein expression in skeletal muscle induced by PTEN (PINK1) parkin and microtubule-associated protein 1 light chain 3 (LC3). Results the mitochondria of rat soleus muscle showed significant swelling and submuscular accumulation after one heavy exercise. Abnormal changes in microstructure, Meanwhile, the contents of CS decreased significantly, the expression of mitochondrial autophagy protein PINK1 parkin and LC3 increased temporarily. After exercise, acupuncture significantly improved the ultrastructure of mitochondria and reduced the appearance of autophagy lysosomes. At the same time, the contents of CS were inhibited, and the expression of PINK1 parkin and LC3 in mitochondria was down-regulated. Conclusion the structure and number of skeletal muscle mitochondria were damaged after one heavy exercise. The mitochondrial autophagy was induced by activating the PINK1/parkin pathway. Acupuncture after heavy exercise can alleviate the mitochondrial damage of skeletal muscle, and its mechanism may be by down-regulating the expression of mitochondrial outer membrane protein (PINK1). It inhibited the recruitment of downstream cytoplasmic protein parkin, and then inhibited the mitochondrial autophagy hyperactivation by affecting the binding of LC3 to mitochondria.
【作者單位】: 成都體育學(xué)院運(yùn)動(dòng)醫(yī)學(xué)與健康學(xué)院;北京體育大學(xué)運(yùn)動(dòng)人體科學(xué)學(xué)院;井岡山大學(xué)體育學(xué)院;
【基金】:國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(No.31471133) 國(guó)家體育總局運(yùn)動(dòng)醫(yī)學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室資助項(xiàng)目(No.CX17B04) 成都體育學(xué)院校級(jí)科研項(xiàng)目(No.17YJ04);成都體育學(xué)院運(yùn)動(dòng)醫(yī)學(xué)與健康研究所創(chuàng)新課題(No.CX17C02)
【分類號(hào)】:R87
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本文編號(hào):1565357
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