本文關(guān)鍵詞：鉛暴露對(duì)大鼠銅相關(guān)蛋白影響的實(shí)驗(yàn)研究

  更多相關(guān)文章： 鉛暴露 銅 銅相關(guān)蛋白 神經(jīng)毒性 海馬 血清 CCS

【摘要】：目的本研究通過建立鉛染毒大鼠時(shí)間-效應(yīng)模型，探討鉛暴露對(duì)銅穩(wěn)態(tài)相關(guān)指標(biāo)包括銅的分布（血清銅、組織銅、血清中未結(jié)合銅含量）；銅蛋白酶（單胺氧化酶MAO-B含量、銅藍(lán)蛋白CP活性、Cu/ZnSOD活性）、銅伴侶蛋白（CCS、COX17和ATX1的含量）在鉛暴露致神經(jīng)損傷中的變化，為鉛神經(jīng)損傷的標(biāo)志物的探討提供依據(jù)。 方法健康雄性SD大鼠64只，體重180～220g，隨機(jī)分為對(duì)照組和鉛染毒組，對(duì)照大鼠自由含有0.05%醋酸鈉的飲水，鉛染毒組大鼠飲用含有0.05%醋酸鉛的飲水。在染毒后第2、4、6、8周分別處死對(duì)照組和鉛染毒組大鼠各8只，用于相應(yīng)的實(shí)驗(yàn)。每日觀察大鼠精神狀態(tài)、活動(dòng)量、飲食多少等情況。在染毒2、4、6、8周時(shí)進(jìn)行神經(jīng)功能測試，包括感覺功能測試如甩尾實(shí)驗(yàn)、運(yùn)動(dòng)功能測試如后肢撐力實(shí)驗(yàn)、學(xué)習(xí)記憶功能測試如水迷宮實(shí)驗(yàn)和步態(tài)評(píng)分。應(yīng)用ICP-MS檢測大鼠血清、腦脊液、骨股、皮質(zhì)、脈絡(luò)叢、海馬中鉛、銅的含量。應(yīng)用ELISA或試劑盒方法檢測大鼠血清、海馬中銅相關(guān)蛋白超氧化物歧化酶Cu/ZnSOD、銅藍(lán)蛋白CP的活性以及單胺氧化酶MAO-B的含量。應(yīng)用ELISA方法檢測大鼠血清、海馬中銅伴侶蛋白CCS、COX17和ATOX1的蛋白表達(dá)。應(yīng)用real-time PCR的方法進(jìn)行海馬中CCS、COX17和ATOX1mRNA表達(dá)的變化的檢測。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示， SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，兩組間均數(shù)比較用成組t檢驗(yàn)，多組間均數(shù)比較用單因素方差分析（One Way ANOVA）和兩兩比較的LSD檢驗(yàn)，P0.05說明有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 結(jié)果1鉛暴露不同時(shí)間后對(duì)大鼠神經(jīng)行為狀況的影響：與對(duì)照組比較，鉛暴露組第4周開始直至第8周，大鼠甩尾時(shí)間隨時(shí)間推移有明顯延長趨勢，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.05）；鉛暴露組大鼠后肢展開間距均有增大趨勢；鉛暴露組大鼠第4周、6周、8周第三天潛伏期分別是其對(duì)照組的1.41倍、1.64倍、2.34倍，且隨著染毒時(shí)間的延長，鉛染毒組的潛伏期增加。同時(shí)各染毒組穿越平臺(tái)的次數(shù)均減少，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.05）。2鉛染毒大鼠不同組織中鉛的蓄積：大鼠鉛染毒不同時(shí)間后，血清、海馬中鉛的水平均呈上升趨勢，同時(shí)，實(shí)驗(yàn)組大鼠血清、皮質(zhì)、海馬、腦脊液、脈絡(luò)叢、骨骼中鉛的含量隨染毒時(shí)間的增加而呈上升趨勢。3鉛暴露對(duì)大鼠不同組織中銅水平的影響：鉛暴露不同時(shí)間后，大鼠血清和海馬中銅的含量均增多，同時(shí)，鉛染毒組大鼠血清、海馬中銅的水平隨鉛暴露時(shí)間的增長而呈上升趨勢。4鉛暴露對(duì)大鼠海馬和血清中銅蛋白酶的影響：鉛暴露組大鼠海馬中MAO-B含量在染毒后第2周增加，但在染毒第4、6和8周后，MAO-B含量比對(duì)照組分別降低了4.69%、31.73%和40.09%(P0.05)；同樣，CP活性也分別降低了52.24%、55.13%和70.83%。 Cu/Zn-SOD活性分別降低了16.64%、21.22%和35.79%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。而大鼠染鉛2和4周后，血清中MAO-B含量高于對(duì)照組，，從6周到8周又逐漸減少；而鉛暴露組大鼠血清中CP、Cu/Zn-SOD的活力降低，并隨著染毒時(shí)間的延長而下降(P0.05)。5鉛暴露對(duì)大鼠海馬和血清中銅伴侶蛋白的影響：鉛暴露2周后，大鼠海馬中CCS含量開始下降，并一直持續(xù)到染毒結(jié)束。而鉛暴露組海馬COX17、ATOX1含量均高于對(duì)照組，在鉛染毒8周后，大鼠海馬中COX17、ATOX1含量分別增加了9.21%和44.59%(P0.05)。但是，鉛暴露2和4周后，大鼠血清中CCS、COX17含量增加，之后又下降，與對(duì)照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)；鉛暴露2、4、6、8周后，大鼠血清中ATOX1含量分別是對(duì)照組的1.2倍、1.44倍、1.56倍和1.62倍，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。6鉛暴露對(duì)海馬中銅伴侶蛋白mRNA表達(dá)的影響：與對(duì)照組比較，鉛暴露組海馬中CCS、COX17和ATOX1的mRNA的表達(dá)均上升，如鉛染毒組第6周的CCS、COX17、ATOX1的mRNA的表達(dá)分別是對(duì)照組的2.07倍、1.91倍、1.98倍，鉛染毒組第8周的CCS、COX17、ATOX1的mRNA的表達(dá)分別是對(duì)照組的1.95倍、2.33倍、1.69倍，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。 結(jié)論鉛暴露可導(dǎo)致銅相關(guān)蛋白的變化，進(jìn)而導(dǎo)致銅穩(wěn)態(tài)失調(diào)，這可能參與了鉛導(dǎo)致的神經(jīng)損傷。
【關(guān)鍵詞】：鉛暴露 銅 銅相關(guān)蛋白 神經(jīng)毒性 海馬 血清 CCS
【學(xué)位授予單位】：河北聯(lián)合大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號(hào)】：R114
【目錄】：

• 摘要4-6
• Abstract6-10
• 英文縮略表10-11
• 引言11-13
• 第1章 鉛暴露對(duì)大鼠銅相關(guān)蛋白影響的實(shí)驗(yàn)研究13-39
• 1.1 材料與方法13-23
• 1.1.1 主要儀器和試劑13-14
• 1.1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組與染毒方法14
• 1.1.3 實(shí)驗(yàn)方法14-23
• 1.2 結(jié)果23-30
• 1.2.1 大鼠慢性鉛中毒癥狀、體征觀察23-24
• 1.2.2 鉛暴露對(duì)大鼠神經(jīng)功能影響24-26
• 1.2.3 大鼠鉛暴露后血清、海馬、皮質(zhì)、腦脊液、脈絡(luò)叢、骨骼樣品中鉛和銅水平的變化情況26-27
• 1.2.4 鉛暴露對(duì)大鼠血清和海馬中銅結(jié)合蛋白的影響27-28
• 1.2.5 鉛暴露對(duì)大鼠血清和海馬中銅伴侶蛋白的影響28-29
• 1.2.6 鉛暴露對(duì)大鼠海馬中銅伴侶蛋白 mRNA 表達(dá)的影響29-30
• 1.3 討論30-35
• 1.3.1 鉛暴露對(duì)大鼠神經(jīng)行為的改變30-31
• 1.3.2 鉛暴露后不同組織和器官中鉛的變化31-32
• 1.3.3 鉛暴露對(duì)不同組織中銅水平的影響32-33
• 1.3.4 鉛暴露對(duì)大鼠銅結(jié)合蛋白的影響33
• 1.3.5 鉛暴露對(duì)大鼠銅伴侶蛋白的影響33-34
• 1.3.6 鉛暴露對(duì)大鼠海馬中銅伴侶蛋白 mRNA 表達(dá)的影響34-35
• 1.4 結(jié)論35
• 參考文獻(xiàn)35-39
• 第2章 綜述39-47
• 2.1 鉛暴露致中樞神經(jīng)損傷表現(xiàn)39-40
• 2.2 鉛的中樞神經(jīng)毒性機(jī)制研究40-43
• 2.2.1 鉛對(duì)大腦屏障的損傷40
• 2.2.2 鉛對(duì)中樞神經(jīng)細(xì)胞凋亡的影響40-41
• 2.2.3 鉛報(bào)道對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)氧化損傷的影響41
• 2.2.4 鉛與其他金屬41-42
• 2.2.5 鉛引起神經(jīng)遞質(zhì)系統(tǒng)的改變42-43
• 參考文獻(xiàn)43-47
• 致謝47-48
• 導(dǎo)師簡介48-49
• 作者簡介及在學(xué)成果49-50
• 學(xué)位論文數(shù)據(jù)集50

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

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本文編號(hào)：876255