發(fā)布時間：2017-09-09 02:00

  本文關(guān)鍵詞：甲醛暴露對小鼠造血系統(tǒng)轉(zhuǎn)錄因子及骨髓組織毒性效應(yīng)的研究

  更多相關(guān)文章： 甲醛 造血系統(tǒng) 轉(zhuǎn)錄因子 骨髓組織 氧化應(yīng)激 炎癥反應(yīng) 細(xì)胞凋亡

【摘要】：甲醛(Formaldehyde, FA)是一種普遍存在的環(huán)境污染物,也是我國主要的室內(nèi)空氣污染物之一。世界衛(wèi)生組織將甲醛歸為人類致癌物并認(rèn)為甲醛導(dǎo)致白血病的證據(jù)強有力但不夠充分,因此甲醛與白血病相關(guān)性的研究成為一項研究熱點,也引起了全社會的廣泛關(guān)注。白血病是一類發(fā)生在造血系統(tǒng)的惡性腫瘤,造血系統(tǒng)轉(zhuǎn)錄因子在血細(xì)胞的分化發(fā)育過程中起著重要的調(diào)控作用,除此之外,轉(zhuǎn)錄因子還參與到其下游的相關(guān)基因的表達(dá)調(diào)控過程中。骨髓組織是造血干細(xì)胞分化發(fā)育的場所,同時也是白血病發(fā)生的靶器官。因此,本實驗通過研究甲醛暴露對造血系統(tǒng)相關(guān)的轉(zhuǎn)錄因子表達(dá)情況的影響以及骨髓組織的毒性效應(yīng),以探討甲醛對骨髓和造血功能的影響,為甲醛與白血病相關(guān)性的研究提供一定的生物學(xué)證據(jù)。 本研究以6周齡雄性Balb/C小鼠為研究對象,將其隨機分為3組進(jìn)行口鼻式氣態(tài)甲醛暴露,染毒濃度根據(jù)國家標(biāo)準(zhǔn)分別為0.5mg/m3、3.0mg/m3以及空白對照組0mg/m3,染毒時間采用職業(yè)暴露模式即每天暴露8小時,5個工作日和2個休息日交替進(jìn)行,為期2周。染毒結(jié)束后,采用RT-PCR技術(shù)對轉(zhuǎn)錄因子C/EBPα GATA-2、 SCL、C-myb、GATA-1、NFE2、Ikzf5和PAX5的mRNA表達(dá)水平進(jìn)行檢測；對小鼠尾部取血進(jìn)行全血細(xì)胞計數(shù),分析各類型血細(xì)胞的數(shù)量變化；將小鼠骨髓組織制作切片進(jìn)行病理學(xué)觀察；對小鼠骨髓組織中的氧化損傷指標(biāo)：活性氧簇(Reactive Oxygen Species, ROS)、谷胱甘肽(Glutathione, GSH)和代謝酶細(xì)胞色素P4501A1(Cytochrome P450proteins1A1, CYP1A1)、谷胱甘肽硫轉(zhuǎn)移酶Tl (Glutathione S-transferase theta1, GSTT1)的表達(dá),炎癥指標(biāo)：核轉(zhuǎn)錄因子κB(Nuclear Transcription Factor-κB,NF-xB)、腫瘤壞死因子a (tumor necrosis factor alpha, TNF-a)、白介素1β (Interleukin-1β, IL-1β)含量以及凋亡因子：含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(cysteinyl aspartate specific proteinase-3, Caspase-3)的活性進(jìn)行檢測。結(jié)果顯示,甲醛暴露后,所測轉(zhuǎn)錄因子的表達(dá)出現(xiàn)了或升高或降低的顯著性變化；通過組織病理學(xué)觀察發(fā)現(xiàn)高濃度組骨髓組織出現(xiàn)明顯異常,巨核細(xì)胞增多并出現(xiàn)輕微的纖維化現(xiàn)象；主要血細(xì)胞的數(shù)量發(fā)生顯著改變；ROS累積,GSH耗損,且代謝酶CYP1A1和GSTT1的表達(dá)顯著改變,呈相反趨勢,機體的氧化平衡受到破壞；氧化敏感性轉(zhuǎn)錄因子NF-κB表達(dá)上升,促炎癥因子TNF-a及IL-1β的含量顯著升高,表明骨髓組織中出現(xiàn)了一定的炎癥反應(yīng)；凋亡因子Caspase-3的活性在高濃度組出現(xiàn)了顯著升高。 本研究發(fā)現(xiàn)甲醛暴露會影響有造血調(diào)控功能的轉(zhuǎn)錄因子的表達(dá),進(jìn)而可能對造血系統(tǒng)產(chǎn)生不利影響,為以后的深入研究提供了思路；同時,通過對骨髓組織各個方面指標(biāo)的測定,發(fā)現(xiàn)甲醛暴露會使其產(chǎn)生一系列負(fù)面影響,增加了罹患造血系統(tǒng)疾病的風(fēng)險,氧化應(yīng)激可能是參與其中的重要機制,為甲醛與白血病相關(guān)性的研究提供了生物學(xué)證據(jù)。
【關(guān)鍵詞】：甲醛 造血系統(tǒng) 轉(zhuǎn)錄因子 骨髓組織 氧化應(yīng)激 炎癥反應(yīng) 細(xì)胞凋亡
【學(xué)位授予單位】：華中師范大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號】：R114;R733.7
【目錄】：

• 摘要6-8
• Abstract8-12
• 1. 文獻(xiàn)綜述12-23
• 1.1 室內(nèi)主要空氣污染物—甲醛12-14
• 1.1.1 甲醛的性質(zhì)12-13
• 1.1.2 甲醛的來源13
• 1.1.3 甲醛的污染13-14
• 1.2 甲醛的毒性研究14-17
• 1.2.1 甲醛的神經(jīng)毒性14-15
• 1.2.2 甲醛的生殖毒性15
• 1.2.3 甲醛的遺傳毒性15-16
• 1.2.4 甲醛的免疫毒性16-17
• 1.2.5 甲醛與氧化損傷17
• 1.3 甲醛與白血病17-20
• 1.3.1 白血病17-18
• 1.3.2 甲醛與白血病相關(guān)性的研究18-20
• 1.4 立項依據(jù)20-23
• 1.4.1 轉(zhuǎn)錄因子對造血調(diào)控具有重要作用20-21
• 1.4.2 骨髓組織是白血病發(fā)生的靶器官21-23
• 2. 材料和方法23-34
• 2.1 實驗材料23-25
• 2.1.1 實驗對象23
• 2.1.2 主要實驗儀器23
• 2.1.3 主要實驗試劑及試劑盒23-24
• 2.1.4 主要實驗試劑的配制方法24-25
• 2.2 實驗方法25-34
• 2.2.1 甲醛暴露裝置25-26
• 2.2.2 實驗設(shè)計流程26-27
• 2.2.3 小鼠骨髓RNA的提取27-28
• 2.2.4 相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子的反轉(zhuǎn)錄PCR28
• 2.2.5 血液全血細(xì)胞計數(shù)28-29
• 2.2.6 骨髓組織病理學(xué)檢測29-30
• 2.2.7 骨髓組織活性氧自由基(ROS)的檢測30
• 2.2.8 骨髓組織谷胱甘肽(GSH)含量的檢測30-31
• 2.2.9 骨髓組織CYPlA1和GSTT1 mRNA表達(dá)水平的檢測31
• 2.2.10 骨髓組織中NF-κB在mRNA及蛋白水平的表達(dá)31-32
• 2.2.11 骨髓組織中TNF-α和IL-1β含量的測定32
• 2.2.12 骨髓組織中Caspase-3活性的測定32-33
• 2.2.13 統(tǒng)計學(xué)分析33-34
• 3. 實驗結(jié)果34-45
• 3.1 甲醛暴露對小鼠造血轉(zhuǎn)錄因子MRNA表達(dá)的影響34-39
• 3.1.1 甲醛暴露對轉(zhuǎn)錄因子C/EBPα的影響34
• 3.1.2 甲醛暴露對轉(zhuǎn)錄因子GATA-2的影響34-35
• 3.1.3 甲醛暴露對轉(zhuǎn)錄因子SCL的影響35
• 3.1.4 甲醛暴露對轉(zhuǎn)錄因子C-myb的影響35-36
• 3.1.5 甲醛暴露對轉(zhuǎn)錄因子GATA-1的影響36-37
• 3.1.6 甲醛暴露對轉(zhuǎn)錄因子NFE-2的影響37
• 3.1.7 甲醛暴露對轉(zhuǎn)錄因子Ikzf5的影響37-38
• 3.1.8 甲醛暴露對轉(zhuǎn)錄因子PAX5的影響38-39
• 3.2 甲醛暴露對小鼠骨髓組織的毒性效應(yīng)39-45
• 3.2.1 甲醛暴露對全血細(xì)胞計數(shù)的影響39-40
• 3.2.2 甲醛暴露后小鼠骨髓組織病理學(xué)觀察結(jié)果40-41
• 3.2.3 甲醛暴露后小鼠骨髓組織氧化應(yīng)激水平的測定41-42
• 3.2.4 甲醛暴露后小鼠骨髓組織炎癥指標(biāo)的測定42-43
• 3.2.5 甲醛暴露對骨髓中Caspase-3活性的影響43-45
• 4. 討論45-53
• 4.1 甲醛暴露對骨髓中具有造血調(diào)控功能的轉(zhuǎn)錄因子的表達(dá)產(chǎn)生影響45-47
• 4.2 甲醛暴露對小鼠骨髓組織造成了負(fù)面影響47-53
• 5. 結(jié)論與展望53-54
• 參考文獻(xiàn)54-62
• 附錄1 英文縮略詞表62-64
• 附錄2 攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文64-65
• 附件：發(fā)表論文65-77
• 致謝77-78

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 喬琰,何胡軍,牛丹丹,魯志松,嚴(yán)彥,甘耀坤,楊旭;甲醛吸入對小鼠不同組織器官谷胱苷肽水平的影響[J];公共衛(wèi)生與預(yù)防醫(yī)學(xué);2004年05期

2 婁小華;徐錢;王黎明;吳凱;李艷;柯翔鴻;楊光濤;楊旭;;甲醛吸入致小鼠腦和腎組織的氧化損傷作用研究[J];公共衛(wèi)生與預(yù)防醫(yī)學(xué);2006年01期

3 吳凱;楊光濤;婁小華;彭光銀;王黎明;李艷;柯翔鴻;楊旭;;甲醛致小鼠肺DNA蛋白質(zhì)交聯(lián)和DNA斷裂效應(yīng)的研究[J];公共衛(wèi)生與預(yù)防醫(yī)學(xué);2006年02期

4 周硯青;常亮;王昆;;用水迷宮實驗檢測甲醛對小鼠的神經(jīng)毒性[J];公共衛(wèi)生與預(yù)防醫(yī)學(xué);2007年06期

5 高娜娜;常青;陳莉;李學(xué)彬;楊旭;丁書茂;;氣態(tài)甲醛對小鼠外周血淋巴細(xì)胞和肝細(xì)胞微核率的影響[J];公共衛(wèi)生與預(yù)防醫(yī)學(xué);2008年03期

6 周建平;何建平;柯振東;紀(jì)曉紅;;我國居室內(nèi)空氣中甲醛污染現(xiàn)狀分析及對策研究[J];環(huán)境科學(xué)與技術(shù);2005年S2期

7 婁小娥;氧化損傷與胚胎發(fā)育毒性研究進(jìn)展[J];國外醫(yī)學(xué)(衛(wèi)生學(xué)分冊);2001年03期

8 緱祖新;;甲醛免疫毒性的研究綜述[J];河南教育學(xué)院學(xué)報(自然科學(xué)版);2009年02期

9 張浩,曾祥貴,程薇波,吳德生;壬基酚對成年雄性SD大鼠生殖功能的影響[J];四川大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版);2003年02期

10 周黨俠;邱曙東;張潔;王志勇;;甲醛對性成熟期雄性大鼠生殖毒性的作用研究[J];四川大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版);2006年04期

，

本文編號：817618