水中腸道病毒檢測方法的分析評價
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【摘要】:采用Hep-2細(xì)胞分離培養(yǎng)水中的腸道病毒,根據(jù)腸道病毒5’-UTR核酸的保守區(qū),建立了一種細(xì)胞培養(yǎng)與實時熒光定量PCR(ICC-RT-q PCR)聯(lián)合檢測感染性腸道病毒的方法。對RT-q PCR、TCID50和ICC-RT-q PCR 3種檢測方法進(jìn)行靈敏度、相關(guān)性分析,評價RT-q PCR、ICC-RT-q PCR用于估計水中感染性病毒含量的可行性。結(jié)果表明,RT-q PCR方法高估了水中病毒的感染性。腸道病毒低濃度(4.4×10-1~4.4×103TCID50/m L)時TCID50與ICC-RT-q PCR線性關(guān)系良好,相關(guān)系數(shù)R2=0.99。水樣經(jīng)濃縮,ICC-RT-q PCR檢測病毒含量為1.0×103~3.2×104copies/L,估計含量為3~30 TCID50/L,與病毒感染性11~29 TCID50/L結(jié)果相近,檢出率為83.3%。高于TCID50的檢測結(jié)果(33.3%)。因此,ICC-RT-q PCR方法快速、靈敏,可對水中感染性腸道病毒進(jìn)行準(zhǔn)確的定量分析。
【作者單位】: 西安建筑科技大學(xué)環(huán)境與市政工程學(xué)院;濟(jì)南市環(huán)境保護(hù)規(guī)劃設(shè)計研究院;清華大學(xué)國家環(huán)境保護(hù)環(huán)境微生物利用與安全控制重點實驗室;
【關(guān)鍵詞】: 腸道病毒 感染性 TCID RT-qPCR ICC-RT-qPCR
【基金】:國家“水體污染控制與治理”科技重大專項(2013ZX07310-001)
【分類號】:R123.1
【正文快照】: 3.清華大學(xué)國家環(huán)境保護(hù)環(huán)境微生物利用與安全控制重點實驗室,北京100084)腸道病毒隸屬細(xì)小RNA病毒科,是重要的水介傳播病原體。腸道病毒可隨著糞便被排出體外后,進(jìn)入水環(huán)境、食物、土壤中,經(jīng)糞-口途徑傳播造成二次感染[1]?蓪(dǎo)致疾病范圍非常廣泛,包括腸胃炎、心肌炎、無菌
【相似文獻(xiàn)】
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,本文編號:806118
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