本文關(guān)鍵詞：環(huán)境雌激素混合物效應(yīng)模型分析

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【摘要】：環(huán)境雌激素是最重要的一類環(huán)境內(nèi)分泌干擾物,其種類多樣,易于接觸,長(zhǎng)期低濃度暴露可影響內(nèi)分泌和生殖發(fā)育系統(tǒng)的正常功能,對(duì)人類和動(dòng)物健康造成嚴(yán)重影響。典型的環(huán)境雌激素暴露方式往往都是多種化學(xué)物質(zhì)共存的混合物聯(lián)合暴露,以單個(gè)化合物的毒效應(yīng)為標(biāo)準(zhǔn)評(píng)估混合物效應(yīng)存在局限性,本文將在環(huán)境雌激素單一效應(yīng)研究的基礎(chǔ)上,探究混合物效應(yīng)的評(píng)定方法。選擇MCF-7乳腺癌細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn),采用MTT法檢測(cè)雌二醇(E2)、酚類化合物(BPA和NP)、鄰苯二甲酸酯類化合物(DBP和DEHP)以及他莫昔芬(TAM)對(duì)MCF-7細(xì)胞增殖影響的單一及其聯(lián)合效應(yīng),并利用PCR實(shí)驗(yàn)從雌激素相關(guān)基因表達(dá)水平上分析受試化合物的作用方式。在獲得單一化合物的濃度-反應(yīng)數(shù)據(jù)后,運(yùn)用相加作用模型分析二元及多元混合物的聯(lián)合毒性,并將模型預(yù)測(cè)結(jié)果與混合物毒性實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行比較分析。結(jié)果表明,E2、DBP、DEHP及TAM對(duì)MCF-7細(xì)胞的單一毒性數(shù)據(jù)可通過(guò)Weibull方程擬合,BPA和NP則以Hill函數(shù)擬合度最優(yōu),R2分別為0.8929、0.9598、0.9667、0.9666、0.9697和0.9878,由擬合方程得到的半數(shù)效應(yīng)濃度(EC50)及95%置信區(qū)間分別為4.184×10-5(6.181×10-6-3.535× 104)、4.787(1.669～10.81)、0.677(0.271～1.525)、10.09(8.547～1.173)、1.139×10-3(3.611×10-4-3.609×10-3)和0.288(0.180-0.398)μmol/L, E2的雌激素活性最強(qiáng),BPA. NP、DBP和DEHP較弱,TAM抑制MCF-7細(xì)胞生長(zhǎng),但低濃度的TAM具有微弱的雌激素活性。11組混合物的聯(lián)合毒性數(shù)據(jù)亦可通過(guò)Weibul、Hill、Logistic和ExpGro 1方程進(jìn)行有效擬合,R2分別為0.969、0.889、0.967、0.996、0.986、0.966、0.951、0.955、0.932、0.809和0.992,四元混合物Mix 9(BPA+NP+DBP+DEHP)和Mix 11(E2+TAM)抑制細(xì)胞增殖,但是抑制能力較弱,其余各組混合物均表現(xiàn)為較弱的雌激素活性,混合物效應(yīng)與化合物單獨(dú)作用產(chǎn)生的效應(yīng)具有顯著性差異。環(huán)境雌激素單獨(dú)作用與聯(lián)合作用對(duì)雌激素受體ERa和雌激素調(diào)節(jié)基因pS2表達(dá)水平的影響和對(duì)照相比具有顯著性差異,說(shuō)明環(huán)境雌激素通過(guò)ER受體調(diào)節(jié)機(jī)制促進(jìn)或抑制細(xì)胞增殖。在一定的濃度范圍內(nèi),濃度相加或反應(yīng)相加模型計(jì)算的混合物效應(yīng)與實(shí)驗(yàn)結(jié)果較為接近,簡(jiǎn)單相加模型在中高濃度時(shí)的預(yù)測(cè)結(jié)果與實(shí)驗(yàn)結(jié)果存在顯著偏差,而指數(shù)評(píng)價(jià)法存在許多的不確定性,不能準(zhǔn)確表述混合物的聯(lián)合作用類型。受試化合物均表現(xiàn)一定的雌激素抗雌激素活性,基于單個(gè)化合物的濃度-反應(yīng)數(shù)據(jù)可以預(yù)測(cè)各種混合物效應(yīng)�；旌衔镏�,外源化合物在較低濃度下可產(chǎn)生顯著地混合物效應(yīng),與內(nèi)源雌激素聯(lián)合作用效果顯著。相加作用模型相比于指數(shù)法,可以不依賴于濃度-反應(yīng)曲線的形狀(直線型、“S”或倒“U”型),對(duì)混合物效應(yīng)以及聯(lián)合作用方式進(jìn)行定量和定性地分析預(yù)測(cè)。雖然從整體上分析,本文的模型預(yù)測(cè)結(jié)果與實(shí)驗(yàn)結(jié)果存在差異,但是結(jié)合現(xiàn)實(shí)的低濃度暴露分析,在設(shè)定的各混合物低濃度段,模型曲線與實(shí)驗(yàn)結(jié)果曲線較為接近,CA和IA模型可以較為準(zhǔn)確的預(yù)測(cè)混合物效應(yīng)。
【關(guān)鍵詞】：環(huán)境雌激素 MCF-7人乳腺癌細(xì)胞 體外實(shí)驗(yàn) 雌激素活性 聯(lián)合作用 預(yù)測(cè)模型
【學(xué)位授予單位】：東南大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R114
【目錄】：

• 摘要7-9
• Abstract9-11
• 縮略詞表11-13
• 前言13-19
• 1 環(huán)境雌激素的危害和來(lái)源13
• 2 環(huán)境雌激素類化合物檢測(cè)分析方法13-14
• 3 聯(lián)合作用的分析方法14-15
• 4 本課題的研究?jī)?nèi)容和意義15-16
• 5 創(chuàng)新點(diǎn)16-17
• 6 技術(shù)路線17-19
• 第1章 環(huán)境雌激素類化合物單一效應(yīng)分析19-35
• 1.1 引言19
• 1.2 材料與方法19-24
• 1.2.1 測(cè)試化合物19-20
• 1.2.2 試劑與儀器20
• 1.2.3 MCF-7細(xì)胞正常培養(yǎng)20-21
• 1.2.4 無(wú)激素胎牛血清的制備21-22
• 1.2.5 測(cè)試化合物濃度設(shè)計(jì)22
• 1.2.6 MCF-7細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)22-23
• 1.2.7 ERα受體和pS2基因表達(dá)實(shí)驗(yàn)23-24
• 1.2.8 數(shù)據(jù)分析24
• 1.3 結(jié)果24-31
• 1.3.1 化合物對(duì)MCF-7細(xì)胞增殖影響的濃度-反應(yīng)關(guān)系分析24-30
• 1.3.2 化合物對(duì)雌激素受體ERα和雌激素調(diào)節(jié)基因pS2 mRNA表達(dá)的影響30-31
• 1.4 討論31-33
• 1.5 本章小結(jié)33-35
• 第2章 環(huán)境雌激素混合物效應(yīng)分析35-55
• 2.1 引言35
• 2.2 材料與方法35-37
• 2.2.1 測(cè)試化合物35-36
• 2.2.2 混合物濃度設(shè)計(jì)36
• 2.2.3 MCF-7細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)36-37
• 2.2.4 雌激素受體ERα和雌激素調(diào)節(jié)基因pS2表達(dá)37
• 2.2.5 數(shù)據(jù)處理37
• 2.3 結(jié)果37-52
• 2.3.1 混合物對(duì)MCF-7細(xì)胞增殖影響的濃度-反應(yīng)關(guān)系分析37-50
• 2.3.2 混合物對(duì)雌激素受體ERα和雌激素調(diào)節(jié)基因pS2表達(dá)的影響50-52
• 2.4 討論52-53
• 2.5 本章小結(jié)53-55
• 第3章 環(huán)境雌激素混合物效應(yīng)相加作用模型分析與預(yù)測(cè)55-72
• 3.1 引言55
• 3.2 材料與方法55-58
• 3.2.1 聯(lián)合作用指數(shù)評(píng)價(jià)法55-56
• 3.2.2 混合物效應(yīng)預(yù)測(cè)模型56-58
• 3.3 結(jié)果58-69
• 3.3.1 雌二醇和鄰苯二甲酸酯類化合物混合物效應(yīng)58-63
• 3.3.2 雌二醇和酚類化合物混合物效應(yīng)63-67
• 3.3.3 多元混合物效應(yīng)67-69
• 3.4 討論69-70
• 3.5 本章小結(jié)70-72
• 第4章 總結(jié)與展望72-74
• 4.1 全文總結(jié)72
• 4.2 展望72-74
• 參考文獻(xiàn)74-81
• 文獻(xiàn)綜述81-87
• 參考文獻(xiàn)84-87
• 作者簡(jiǎn)介87-88
• 致謝88

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中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 李劍;徐飛;李少旦;李木蘭;;環(huán)境雌激素研究進(jìn)展[J];現(xiàn)代預(yù)防醫(yī)學(xué);2006年08期

2 王一梅;王洋;唐非;;環(huán)境雌激素的研究現(xiàn)狀——環(huán)境雌激素對(duì)生物體的影響[J];公共衛(wèi)生與預(yù)防醫(yī)學(xué);2009年01期

3 王一梅;王洋;唐非;;環(huán)境雌激素的研究現(xiàn)狀(二)——環(huán)境雌激素的測(cè)定[J];公共衛(wèi)生與預(yù)防醫(yī)學(xué);2009年02期

4 羅芬蘭;蔡文琴;;環(huán)境雌激素的神經(jīng)毒性[J];神經(jīng)解剖學(xué)雜志;2009年04期

5 李基文,王，

本文編號(hào)：802036