本文關(guān)鍵詞：CdSeS顆粒對glucagon聚集的影響以及細胞的毒理作用的研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：淀粉樣蛋白的聚集是引起神經(jīng)退行性疾病的重要原因,其聚集過程往往會受到周圍環(huán)境的影響,如溶液溫度、p H值和離子濃度等。現(xiàn)在許多研究表明,蛋白質(zhì)和多肽的異常積聚和纖維化的問題與各種神經(jīng)系統(tǒng)疾病的發(fā)生有著密切的關(guān)系,如阿爾茨海默病,帕金森病,糖尿病等。蛋白聚集后的纖維具有很大的韌性,所以它在生物納米材料方面也具有廣闊的應用前景。因此,近些年來研究蛋白的纖維化聚集已經(jīng)成為物理、化學、醫(yī)學、生物學界最熱門的話題之一。隨著納米科技的迅猛發(fā)展,使得納米顆粒材料在很多領(lǐng)域具有廣泛的應用,比如半導體晶體材料硫硒化鎘納米顆粒,已在熒光生物探針、靶向送藥方面得到了廣泛的應用,而胰高血糖素具有重要的生理功能,它參與調(diào)節(jié)血糖的水平,并且是一種重要的激素類蛋白,在很多條件下具有很強的纖維化傾向,是研究蛋白聚集的較為理想的模型分子。因此,研究硫硒化鎘納米顆粒對胰高血糖素積累的作用變得越來越重要。某些金屬離子(如Cu2+)可以調(diào)節(jié)多肽的聚集,研究還表明,對于血漿和腦脊液中銅的含量,老年癡呆癥患者要比正常人高很多,而且糖尿病患者血清中也含有大量的銅離子,IAPP是瑞典學者韋斯特馬克于1986年從胰島細胞瘤組織中分離和純化的單鏈多肽,它是一種非胰島素依賴型糖尿病的重要病理因素。所以我們又研究了Cu2+與IAPP的相互作用。本文中,我們主要做了以下幾個方面的工作:(1)利用原子力顯微鏡、傅里葉變換紅外光譜儀和熒光光度計等研究了硫硒化鎘納米顆粒對胰高血糖素聚集的影響,包括聚集形成纖維數(shù)量的多少、纖維生長的速度等。實驗結(jié)果表明硫硒化鎘納米顆粒能夠抑制胰高血糖素多肽的聚集,并且隨著顆粒濃度的增加,其抑制胰高血糖素維化的程度也明顯加劇。另外,我們還對納米顆粒抑制胰高血糖素聚集的機理進行了初步的討論。(2)利用原子力顯微鏡研究了不同濃度的Cu2+對IAPP聚集的影響,并且利用熒光光度計檢測了IAPP聚集的動力學過程,發(fā)現(xiàn)隨著Cu2+濃度的增加,IAPP聚集的越多,纖維化趨勢越明顯,而且從THT熒光數(shù)據(jù)也可以看出,隨著Cu2+濃度的增加,熒光強度越高,熒光強度與纖維聚集的多少成正比,再次證明了Cu2+可以促進IAPP的纖維化。(3)利用MTT法和熒光酶標儀檢測了六組細胞的生長狀況及活性氧(ROS)產(chǎn)生的多少。我們得出的結(jié)論是Cu2+與IAPP相互作用時產(chǎn)生了活性氧,并且MTT比色法檢測細胞的生長狀態(tài)結(jié)果又表明,少量的活性氧ROS也可以促進細胞的生長。
【關(guān)鍵詞】：AFM 胰高血糖素 硫硒化鎘納米顆粒 銅離子 活性氧
【學位授予單位】：寧波大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R114;TB383.1
【目錄】：

• 摘要4-6
• Abstract6-10
• 引言10-11
• 1.淀粉樣蛋白的纖維化聚集11-15
• 1.1 研究背景11
• 1.2 淀粉樣蛋白纖維化研究的進展11-13
• 1.2.1 表面對淀粉樣蛋白聚集影響的研究11-12
• 1.2.2 納米顆粒對蛋白聚集的研究進展12-13
• 1.3 胰高血糖素的性質(zhì)及其纖維化13-15
• 2 實驗相關(guān)儀器介紹15-22
• 2.1 原子力顯微鏡15-19
• 2.2.1 工作原理15-16
• 2.2.2 儀器結(jié)構(gòu)16-17
• 2.2.3 工作模式17-19
• 2.2 顯微傅里葉變換紅外光譜儀19-20
• 2.3 熒光光度計20-22
• 3 硫硒化鎘納米顆粒對胰高血糖素聚集的影響22-30
• 3.1 材料與方法22-24
• 3.1.1 試劑及儀器22
• 3.1.2 樣品制備與培養(yǎng)22-24
• 3.1.3 樣品表征24
• 3.2 原子力顯微鏡表征胰高血糖素纖維化形貌24-26
• 3.3 傅里葉紅外光譜儀表征胰高血糖素二級結(jié)構(gòu)26-27
• 3.4 THT熒光表征胰高血糖素聚集的動力學過程27-28
• 3.5 納米顆粒影響纖維化機理28-30
• 4 金屬Cu~(2+)對IAPP聚集的影響30-33
• 4.1 樣品的制備與培養(yǎng)30-31
• 4.2 原子力顯微鏡表征IAPP纖維化形貌31-32
• 4.3 THT熒光表征IAPP聚集的動力學過程32-33
• 5 金屬Cu~(2+)與IAPP反應產(chǎn)生的細胞毒性33-40
• 5.1 材料及大鼠胰島細胞瘤細胞的培養(yǎng)34
• 5.2 細胞生長狀態(tài)的測定34-35
• 5.2.1 MTT原理34-35
• 5.2.2 金屬Cu~(2+)半數(shù)抑制濃度的測定35
• 5.3 細胞毒性35-40
• 5.3.1 MTT法檢測細胞的生存率35-37
• 5.3.2 ROS的定量檢測37-39
• 5.3.3 結(jié)論39-40
• 6 總結(jié)與展望40-42
• 6.1 工作的總結(jié)40-41
• 6.2 進一步的工作41-42
• 參考文獻42-47
• 在學研究成果47-48
• 致謝48

【參考文獻】

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1 劉建華;劉京松;譚菊花;張瑩瑩;吳鐘良;李賓;周星飛;;高濕度環(huán)境下襯底表面對牛胰島素聚集的影響[J];科學通報;2011年12期

  本文關(guān)鍵詞：CdSeS顆粒對glucagon聚集的影響以及細胞的毒理作用的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：413782