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二氧化硅包覆的MnO納米粒子在體外的毒性初探

發(fā)布時間:2017-05-29 03:01

  本文關(guān)鍵詞:二氧化硅包覆的MnO納米粒子在體外的毒性初探,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。


【摘要】:隨著磁共振成像技術(shù)的廣泛應(yīng)用,人們對磁共振成像造影劑的需求越來越大,各種各樣的磁共振成像造影劑也應(yīng)運而生。納米尺度的造影劑可以修飾熒光分了,附載藥物,修飾靶向分子,能夠?qū)崿F(xiàn)造影劑的多功能化。MnO作為一種很好的乃造影劑被越來越多的科學(xué)家研究,其中二氧化硅包覆的MnO不僅可以起到改善屯物相容性和水溶性作用,還可以使其多功能化,然而其運用到生物的風(fēng)險性未得到有效的評估。本論文針對它在體外的潛在毒性進行評估,主要包括兩部分內(nèi)容: 1. 二氧化硅包覆的MnO納米粒子在體外細胞中的毒性研究 本部分的研究中主要基干二氧化51包覆的MnO納米粒子在體外培養(yǎng)條件下對人休宮頸癌細胞(IleLa)、小鼠成纖維細胞(L929)和人體口腔表皮樣癌細胞(KB)的毒性評估。實驗中得到了水溶性目標(biāo)材料Mn0@Si02納米粒子,經(jīng)過孵育之后發(fā)現(xiàn),材料均對三種細胞的存活率產(chǎn)生抑制作用。細胞形態(tài)發(fā)生了不同程度改變,細胞中ROS的含量增加,脂質(zhì)氧化程度增加,線粒體膜電位降低,細胞周期發(fā)生阻滯并伴隨亞G1期凋亡峰出現(xiàn)。各項測試結(jié)果顯示L929細胞對Mn0@Si02納米粒子的敏感程度大于HeLa細胞。經(jīng)過雙染色凋亡試劑盒測試后得出了兩種細胞發(fā)生凋亡的丙分比,其中L929細胞凋亡z度大于HeLa細胞。最后通過對Caspase-3的活性分析,以及對p53、bax、bcl-2的表達水平測試發(fā)現(xiàn),兩種細胞的凋亡通路是線粒體的凋亡通路。 2.具備線粒體靶向和熒光功能的二氧化硅包覆MnO納米粒子的制備及其毒性研究 在本部分研究中制備了氨基化的二氧化硅包覆的MnO納米粒子,并修飾線粒體靶向分子和熒光標(biāo)記分子F〖TC,通過實驗表征發(fā)現(xiàn)其在水溶液中的分散性較好,線粒體靶向分子和FTTC修飾成功,,制備的材料具備線粒體靶向效果和熒光標(biāo)記功能靶向性研究主要使用HeLa細胞在體外進行,lOO^g/mL的Mn0@Si02fFITC)-PPh3+納米粒子與HeLa細胞;ft.脾育4小時后,通過與商業(yè)染料Mi'toTracker Red CMXRos的共定位作用,發(fā)現(xiàn)其對線粒體的靶向效果優(yōu)良。初步的毒性測試發(fā)現(xiàn)修飾有線粒體靶向分了?的納米粒子Mn0@Si02-PPh3+對HeLa細胞存活率的抑制作用比Mn0@Si02-NH2更強,說叨納米粒子對線粒體的靶向性對HcLa細胞產(chǎn)生了更大的影響。 本論文中對于Mn0@Si02納米粒了?在體外細胞中的毒性研究為其在今后的應(yīng)用中提供了風(fēng)險性評估的依據(jù)
【關(guān)鍵詞】:Mn0@Si02納米粒了_ 毒性 體外 凋亡 線粒體靶向
【學(xué)位授予單位】:上海師范大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2014
【分類號】:R114;O614.711;TB383.1
【目錄】:
  • 摘要5-7
  • Abstract7-11
  • 第一章 緒論11-45
  • 1.1 引言11-13
  • 1.2 磁共振成像造影劑13-17
  • 1.2.1 磁共振成像造影劑原理13-14
  • 1.2.2 磁共振成像造影劑的特點及分類14
  • 1.2.3 磁共振成像造影劑的現(xiàn)狀及研究進展14-17
  • 1.3 錳的氧化物納米材料17-20
  • 1.3.1 錳的氧化物納米材料概述17
  • 1.3.2 錳的氧化物納米材料的功能化及其生物應(yīng)用17-20
  • 1.4 納米材料的毒性研究20-31
  • 1.4.1 毒性的作用機制21-22
  • 1.4.2 納米材料的體外毒性研究22-23
  • 1.4.3 納米材料的體內(nèi)毒性研究23-29
  • 1.4.4 納米材料理化性質(zhì)對毒性的影響29-31
  • 1.5 本論文的研究目的、意義及主要內(nèi)容31-32
  • 1.6 參考文獻32-45
  • 第二章 二氧化硅包覆的 MnO 納米粒子在體外細胞中的毒性研究45-75
  • 2.1 引言45
  • 2.2 藥品與儀器45-46
  • 2.2.1 藥品試劑45-46
  • 2.2.2 儀器46
  • 2.3 實驗方法46-52
  • 2.3.1 材料的制備46-47
  • 2.3.2 細胞的培養(yǎng)47-48
  • 2.3.3 MTT 測試48
  • 2.3.4 倒置顯微鏡下的細胞形態(tài)48
  • 2.3.5 細胞的透射電鏡觀察48-49
  • 2.3.6 細胞中活性氧的測定49
  • 2.3.7 細胞內(nèi)脂質(zhì)氧化測試49-50
  • 2.3.8 細胞中線粒體膜電位測試50
  • 2.3.9 細胞周期的測試50-51
  • 2.3.10 細胞凋亡和壞死實驗51
  • 2.3.11 Caspase-3 活性檢測51
  • 2.3.12 蛋白質(zhì)印跡分析(Western blot analysis)51-52
  • 2.4 實驗結(jié)果與討論52-71
  • 2.4.1 MnO 和 MnO@SiO_2納米粒子的合成與表征52-56
  • 2.4.2 MnO@SiO_2納米粒子對細胞的毒性研究56-59
  • 2.4.3 細胞的氧化應(yīng)激檢測59-60
  • 2.4.4 細胞中線粒體膜電位(MMP)的測試60-62
  • 2.4.5 MnO@SiO_2納米粒子對細胞周期的影響62-66
  • 2.4.6 細胞的凋亡與壞死檢測66-68
  • 2.4.7 凋亡信號通路的研究68-71
  • 2.5 本章小結(jié)71
  • 2.6 參考文獻71-75
  • 第三章 具備線粒體靶向和熒光功能的二氧化硅包覆的 MnO 納米粒子的制備及其毒性研究75-90
  • 3.1 引言75-76
  • 3.2 藥品與儀器76-77
  • 3.2.1 藥品76
  • 3.2.2 儀器76-77
  • 3.3 實驗方法77-79
  • 3.3.1 材料的制備77
  • 3.3.2 氨基密度的測定77-78
  • 3.3.3 細胞的培養(yǎng)78
  • 3.3.4 材料的細胞內(nèi)吞實驗78
  • 3.3.5 材料的線粒體靶向效果實驗78-79
  • 3.3.6 靶向材料的毒性研究79
  • 3.4 實驗結(jié)果與討論79-86
  • 3.4.1 材料的表征79-83
  • 3.4.2 熒光標(biāo)記線粒體靶向材料的細胞攝取83-84
  • 3.4.3 MnO@SiO_2(FITC)-PPh3+納米粒子的線粒體靶向?qū)嶒?/span>84-85
  • 3.4.4 靶向材料在細胞中毒性測試85-86
  • 3.5 本章小結(jié)86
  • 3.6 參考文獻86-90
  • 第四章 總結(jié)與展望90-92
  • 攻讀碩士學(xué)位期間取得的研究成果92-93
  • 致謝93

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前6條

1 張艷芳;金嬋;馬春旺;楊勇驥;;幾種納米材料細胞毒性效應(yīng)的研究現(xiàn)狀[J];第二軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報;2010年11期

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4 江海洪,謝燕,劉澤軍;線粒體呼吸鏈功能調(diào)控機制的研究進展[J];生理科學(xué)進展;2001年04期

5 李國新;趙超;;納米材料在環(huán)境中的應(yīng)用及生物毒性研究進展[J];四川環(huán)境;2013年02期

6 劉明禮;梁榮玲;;磁共振成像中的造影劑[J];醫(yī)學(xué)物理;1992年01期


  本文關(guān)鍵詞:二氧化硅包覆的MnO納米粒子在體外的毒性初探,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。



本文編號:403967

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