蜚蠊是“四害”之一,可通過攜帶的病原菌威脅人類的健康。目前針對蜚蠊的主要防制手段為化學(xué)防制,但化學(xué)殺蟲劑表現(xiàn)出抗藥性、害蟲的再猖獗和殺蟲劑的殘毒三大問題。生物防制具有不易產(chǎn)生抗藥性、可自然傳播、對害蟲具有的一定的選擇性和無污染等優(yōu)點(diǎn)。蘇云金桿菌(Bacillus thuringiensis,Bt)可在營養(yǎng)生長階段分泌一類新型殺蟲毒蛋白—營養(yǎng)期殺蟲蛋白(Vips),由于少見耐藥性報(bào)道是一種有潛力的殺蟲蛋白,目前尚未見Vip3Aa蛋白在蜚蠊防制中的相關(guān)報(bào)道。在殺鱗翅目昆蟲的機(jī)制中,Vip3Aa蛋白可被昆蟲中腸蛋白酶切除N端序列形成活性蛋白�；钚缘鞍纂S后穿過圍食膜,與中腸上皮細(xì)胞頂膜受體結(jié)合,導(dǎo)致中腸上皮細(xì)胞形成孔洞,最終導(dǎo)致昆蟲死亡。N端序列對Vip3A蛋白活性的影響在不同昆蟲中存在顯著差異。目前針對Vip3Aa殺蟲研究仍然處于針對其殺蟲機(jī)理的研究,而缺乏對其相關(guān)分子機(jī)制的研究。在生物防制領(lǐng)域,由于蛋白質(zhì)不穩(wěn)定的特性,毒力蛋白一般通過構(gòu)建轉(zhuǎn)基因作物和微生物發(fā)揮使用功能。本研究中從Bt菌株中擴(kuò)增獲得vip3Aa基因,并設(shè)計(jì)新型N端截短vip3Aa基因(j-vip3Aa),通過原核表達(dá)系統(tǒng)成功制...

【文章頁數(shù)】：149 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第一章 前言
    1.1 研究背景
    1.2 研究目的和意義
    1.3 研究思路和技術(shù)路線
第二章 Vip3Aa和J-Vip3Aa蛋白的原核表達(dá)
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
    2.3 結(jié)果
    2.4 討論
    2.5 小結(jié)
第三章 Vip3Aa殺蜚蠊活性分析
    3.1 實(shí)驗(yàn)材料
    3.2 實(shí)驗(yàn)方法
    3.3 結(jié)果
    3.4 討論
    3.5 小結(jié)
第四章 美洲大蠊取食Vip3Aa蛋白中腸轉(zhuǎn)錄組學(xué)研究
    4.1 實(shí)驗(yàn)材料
    4.2 實(shí)驗(yàn)方法
    4.3 結(jié)果
    4.4 討論
    4.5 小結(jié)
第五章 轉(zhuǎn)vip3Aa基因蜚蠊生防菌的構(gòu)建和評價(jià)
    5.1 實(shí)驗(yàn)材料
    5.2 實(shí)驗(yàn)方法
    5.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    5.4 討論
    5.5 小結(jié)
參考文獻(xiàn)
全文總結(jié)
研究展望
縮寫詞簡表
致謝
成果



本文編號：4035296