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低劑量氯化鎘誘導(dǎo)L929細(xì)胞增殖hormesis效應(yīng)的研究

發(fā)布時間:2024-03-21 20:20
  研究目的: 觀察氯化鎘是否誘導(dǎo)小鼠成纖維(L929)細(xì)胞增殖的毒物興奮(hormesis)效應(yīng);確定氯化鎘誘導(dǎo)L929細(xì)胞增殖毒物興奮劑量范圍(hormetic zone);探討氯化鎘誘導(dǎo)細(xì)胞增殖的hormesis效應(yīng)的機(jī)制和安全性。 研究方法與研究內(nèi)容: 1噻唑藍(lán)(MTT)比色法觀察不同劑量氯化鎘對體外培養(yǎng)24h的L929細(xì)胞增殖的影響,確定細(xì)胞增殖毒物興奮效應(yīng)的hormetic zone。 2黃嘌呤氧化酶法檢測不同劑量氯化鎘染毒12h、24h誘導(dǎo)L929細(xì)胞中超氧化物歧化酶(SOD)活性變化。 3熒光定量PCR方法檢測不同劑量氯化鎘24h誘導(dǎo)L929細(xì)胞中STAT3基因、P53基因、REVL3基因、BCL-2基因表達(dá)的變化。 研究結(jié)果: 1MTT試驗中發(fā)現(xiàn)氯化鎘染毒L929細(xì)胞24h后,2μmol/L以下劑量組的細(xì)胞相對增殖率與空白組的細(xì)胞相對增殖率基相同,差異沒有顯著性(p<0.05)。 2μmol/L~15μmol/L劑量組細(xì)胞相對增殖率較空白對照組高(p<0.05),表現(xiàn)出細(xì)胞增殖的毒物興奮效應(yīng)。劑量高于20μmol/L時,L929細(xì)胞的相對增殖率較空白對照組的相...

【文章頁數(shù)】:51 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【部分圖文】:

圖1毒物興奮效應(yīng)β型曲線和U型曲線

圖1毒物興奮效應(yīng)β型曲線和U型曲線

作用劑量或未觀察到不良效應(yīng)水平(NOAEL)而言,通常低于NOAEL就作為低濃度水平。在劑量‐反應(yīng)關(guān)系曲線上表現(xiàn)為雙相劑量反應(yīng)關(guān)系特征。即β型曲線和U型曲線(圖1)。β型曲線主要表現(xiàn)了外源性化學(xué)物在低劑量時對機(jī)體正常生命指標(biāo)的促進(jìn)效應(yīng)優(yōu)于對照組(存活率);而U型....


圖2線性閾值模型(A)和非線性閾值模型(B)

圖2線性閾值模型(A)和非線性閾值模型(B)

應(yīng)其機(jī)理應(yīng)是亞細(xì)胞水平的,最有可能的方式是通過對生物合成速率進(jìn)表現(xiàn)出在生物化學(xué)水平改變上以及Hormesis現(xiàn)象的整個過程中。Cala為毒物興奮效應(yīng)顯示了一種過度補(bǔ)償效應(yīng),觀點認(rèn)為生物體受到刺激,制反應(yīng)之后會出現(xiàn)一個補(bǔ)償過程,最終超過控制行為,從而導(dǎo)致一個凈,也就是通常所提及....


圖3QPCR原理圖

圖3QPCR原理圖

圖3QPCR原理圖驟A提取同劑量氯化鎘培養(yǎng)基染毒L929細(xì)胞24h,棄去培養(yǎng)液,2mlPBS溶胞兩遍。六孔板中每孔加入1ml裂解液,用槍頭吹打L929細(xì)胞至淀,收集裂解液于離心管中。0.2ml氯仿,蓋緊離心管,用手劇烈振蕩15秒,待溶液充分乳化靜置....


圖8STAT3基因擴(kuò)增曲線

圖8STAT3基因擴(kuò)增曲線

5μmol/L劑量下基因表達(dá)量最大,三個劑量組間基因表達(dá)量差異沒有統(tǒng)計學(xué)義,表明在此劑量范圍內(nèi)的氯化鎘濃度刺激L929細(xì)胞引起了STAT3基因的表上調(diào)。10μmol/L~20μmol/L濃度下基因表達(dá)較空白組無統(tǒng)計學(xué)差異,基因表量小于0.01μmol/L~5μmol....



本文編號:3934088

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