目的探討鈣調(diào)蛋白激酶-Ⅱ(CaMK-Ⅱ)和蛋白磷酸酶-2A(PP2A)在AlCl₃致人源性神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞株(SH-SY5Y)細(xì)胞tau蛋白異常磷酸化中的調(diào)控作用。方法選取SH-SY5Y細(xì)胞進(jìn)行AlCl₃染毒和CaMK-Ⅱ拮抗劑KN93、PP2A激動劑鞘氨醇干預(yù),實驗分為對照組,AlCl₃低、中、高染毒組(200、400和800μmol/L Al³⁺),KN93干預(yù)組(800μmol/L Al³⁺+0.5μmol/L KN93)和鞘氨醇干預(yù)組(800μmol/L Al³⁺+5 nmol/L鞘氨醇),染毒和干預(yù)48 h后,采用CCK-8法測定細(xì)胞活力,ELISA方法測定CaMK-Ⅱ、PP2A的含量,Western-Blot檢測細(xì)胞總tau(tau5)及Thr-181、Thr-231、Ser-262、Ser-396磷酸化水平。結(jié)果細(xì)胞活力測定結(jié)果顯示:與對照組相比,AlCl₃中、高染毒組細(xì)胞活力降低(P<0.05);與AlCl

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【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料
        1.1.1 細(xì)胞株
        1.1.2 試劑和儀器
    1.2 方法
        1.2.1 SH-SY5Y細(xì)胞傳代培養(yǎng)和實驗分組
        1.2.2 CCK-8測定細(xì)胞活力
        1.2.3 CaMK-Ⅱ和PP2A的測定
        1.2.4 tau蛋白及各磷酸化位點的測定
    1.3 統(tǒng)計學(xué)分析
2 結(jié)果
    2.1 各組SH-SY5Y細(xì)胞活力的變化
    2.2 各組CaMK-Ⅱ和PP2A含量的變化
    2.3 各組tau蛋白及各磷酸化位點的變化
3 討論



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