本文關(guān)鍵詞：2，5-己二酮誘導(dǎo)PC12細(xì)胞凋亡及其機(jī)制探討，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：研究背景：正己烷作為一種有機(jī)溶劑，廣泛應(yīng)用于工業(yè)粘膠、印刷、電子微電子等行業(yè)。職業(yè)暴露過程中如果防護(hù)不當(dāng)，正己烷將經(jīng)呼吸道、皮膚等途徑進(jìn)入機(jī)體導(dǎo)致中毒。長(zhǎng)期接觸正己烷可導(dǎo)致以多發(fā)性周圍神經(jīng)病為主要臨床特征的慢性中毒，臨床上主要表現(xiàn)為四肢麻木、行走無(wú)力，肌肉萎縮等。2,5-己二酮（2,5-HD）是正己烷在體內(nèi)的最終代謝產(chǎn)物，也是正己烷誘發(fā)神經(jīng)毒性的終毒物。 2,5-HD神經(jīng)毒性作用的發(fā)生機(jī)制尚不明確。許多研究顯示，2,5-HD可導(dǎo)致神經(jīng)元胞體和軸突損傷、神經(jīng)元數(shù)量減少。研究發(fā)現(xiàn)，Bax、Bcl-2和Caspase-3參與多種因素誘導(dǎo)的神經(jīng)細(xì)胞凋亡，Bax和Bcl-2是最重要的凋亡調(diào)控基因，，Caspase-3是最關(guān)鍵的凋亡執(zhí)行蛋白酶。那么，2,5-HD誘導(dǎo)的神經(jīng)毒性是否與凋亡有關(guān)， Bax、Bcl-2和Caspase-3是否參與了2,5-HD的神經(jīng)毒性機(jī)制？這些問題引起了我們的關(guān)注。 目的：探討2,5-HD誘導(dǎo)PC12細(xì)胞凋亡及相關(guān)機(jī)制，為闡明2,5-HD的神經(jīng)毒作用機(jī)制提供依據(jù)。 方法：以PC12細(xì)胞作為神經(jīng)元的細(xì)胞模型，0、10mM、20mM和40mM2,5-HD分別染毒12h、24h、36h。用MTT比色法檢測(cè)細(xì)胞存活率；用蘇木素-伊紅(HE)染色法觀察細(xì)胞形態(tài)學(xué)的變化；Hoechst33342熒光染色觀察細(xì)胞核的變化；透射電子顯微鏡觀察細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的變化；用Annexin V-FITC/PI雙染流式細(xì)胞儀檢測(cè)PC12的細(xì)胞凋亡率；用Real-time PCR檢測(cè)Bax、Bcl-2和Caspase-3基因的表達(dá)情況；用Western blot檢測(cè)Bax與Bcl-2的蛋白表達(dá)情況。 結(jié)果：MTT檢測(cè)結(jié)果顯示，隨2,5-HD濃度增加和染毒時(shí)間延長(zhǎng)，細(xì)胞存活率下降（P 0.05）。蘇木素-伊紅(HE)染色法觀察到2,5-HD染毒后PC12細(xì)胞形態(tài)發(fā)生明顯變化。Hoechst33342熒光染色觀察到特征性凋亡細(xì)胞核。透射電子顯微鏡觀察可見，40mM的2,5-HD作用36h后，核仁消失，染色質(zhì)聚集移動(dòng)，有特征性凋亡小體形成。Annexin V-FITC/PI雙染流式細(xì)胞儀檢測(cè)到細(xì)胞凋亡率隨2,5-HD劑量增高而上升，呈劑量反應(yīng)關(guān)系。Real Time PCR結(jié)果顯示隨2,5-HD劑量的增加和染毒時(shí)間延長(zhǎng)，Bax和Caspase-3mRNA表達(dá)水平上調(diào)，Bcl-2mRNA表達(dá)水平下調(diào)。Western blot顯示，隨2,5-HD濃度增加和染毒時(shí)間延長(zhǎng)，Bax蛋白表達(dá)水平上調(diào)，Bcl-2蛋白表達(dá)水平下調(diào)。 結(jié)論：2,5-HD暴露可誘導(dǎo)PC12細(xì)胞凋亡，上調(diào)Bax和Caspase-3的表達(dá)及下調(diào)Bcl-2表達(dá)。且2,5-HD的凋亡誘導(dǎo)作用可能與凋亡調(diào)節(jié)蛋白的表達(dá)紊亂有關(guān)。
【關(guān)鍵詞】：2 5-己二酮 細(xì)胞凋亡 周圍神經(jīng)病 正己烷 PC12
【學(xué)位授予單位】：大連醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號(hào)】：R114
【目錄】：

• 摘要6-8
• Abstract8-10
• 前言10-11
• 材料和方法11-19
• 結(jié)果19-27
• 討論27-29
• 結(jié)論29
• 參考文獻(xiàn)29-33
• 綜述33-41
• 參考文獻(xiàn)37-41
• 致謝41-42

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

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本文編號(hào)：382660