發(fā)布時間：2023-05-28 10:44

　　為探討AlCl₃抑制大鼠骨形成及BMP/Smads信號轉(zhuǎn)導通路的作用機制本實驗以Wistar大鼠為研究對象,將200只4周齡大鼠隨機分成實驗組和對照組:實驗組大鼠通過飲水染鋁(AlCl₃·6H₂O),飲用水中Al3+終濃度為64mg/kg?體重;對照組大鼠飲用蒸餾水。各組大鼠采用大鼠標準飼料常規(guī)飼養(yǎng),自由采食飲水,所有用具均不使用含鋁制品。實驗設染鋁后30d、60d、90d、120d四個檢測點,每次以乙醚麻醉、眼球放血的方式處死實驗組和對照組大鼠各25只,取血清及股骨組織。采用火焰原子吸收分光光度法測定血清和骨組織中鋁含量;采用雙能X線骨密度儀檢測骨密度(BMD);q RT-PCR技術(shù)檢測BMP-2、BMPRI/II、Smad4、Runx2、Osterix、ALP、Col I、BGP mRNA的表達;western blot方法檢測BMP-2、p-BMPRIA、p-Smad1/5/8、Runx2、Osterix蛋白的表達;免疫共沉淀方法檢測p-Smad1/5/8/4復合物的入核情況,結(jié)果表明:(1)染鋁組大鼠血清和骨中鋁...

【文章頁數(shù)】：43 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
英文摘要
1 前言
    1.1 鋁對骨的毒性作用
    1.2 鋁與骨形成
        1.2.1 鋁與B-ALP
        1.2.2 鋁與Col I
        1.2.3 鋁與BGP
    1.3 鋁對骨中BMP/Smad信號轉(zhuǎn)導通路的作用
        1.3.1 BMP-2 與骨形成
        1.3.2 BMP-2 與Smad家族
        1.3.3 BMP/Smad信號轉(zhuǎn)導通路與骨形成
    1.4 細胞核轉(zhuǎn)錄因子與骨形成
        1.4.1 Runx-2 與骨形成
        1.4.2 Osterix與骨形成
    1.5 研究目的和意義
2 材料與方法
    2.1 實驗儀器與試劑
        2.1.1 實驗儀器
        2.1.2 試劑
    2.2 實驗動物及樣品采集
        2.2.1 實驗動物
        2.2.2 樣品采集及處理
    2.3 檢測項目與方法
        2.3.1 血清和股骨中鋁含量的檢測
        2.3.2 骨密度(BMD)的檢測
        2.3.3 骨中ALP、Col I、BGP、BMP-2、BMPR-IA、BMPR-II、Smad4、Runx2、OSX mRNA表達的檢測
        2.3.4 骨中BMP-2、p-BMPRIA、p-Smad1/5/8 蛋白表達的檢測
        2.3.5 骨中p-Smad1/5/8/4 復合物入核情況的檢測
        2.3.6 骨中核轉(zhuǎn)錄因子Runx2和OSX蛋白表達量的檢測
    2.4 實驗數(shù)據(jù)的分析及統(tǒng)計
3 結(jié)果與分析
    3.1 血清和骨中鋁的含量
    3.2 AlCl₃對骨密度的影響
    3.3 AlCl₃對骨組織B-ALP、BGP、Col I mRNA表達的影響
    3.4 AlCl₃對骨組織中BMP-2、BMPR-IA、BMPR-II、Smad4mRNA表達的影響
    3.5 AlCl₃對骨組織BMP-2、p-BMPRIA、p-Smad1/5/8 蛋白表達的影響
    3.6 AlCl₃對骨中p-Smad1/5/8/4 復合物入核情況的影響
    3.7 AlCl₃對骨中Runx2、Osterix mRNA和蛋白表達的影響
        3.7.1 AlCl₃對骨中Runx2、Osterix mRNA表達的影響
        3.7.2 AlCl₃對骨中Runx2、Osterix蛋白表達影響
4 討論
    4.1 AlCl₃對骨形成的影響
    4.2 AlCl₃對BMP/Smad信號轉(zhuǎn)導通路的影響
    4.3 AlCl₃對細胞核轉(zhuǎn)錄因子的影響
5 結(jié)論
致謝
參考文獻
攻讀碩士學位期間發(fā)表的學術(shù)論文



本文編號：3824439