目的:芹菜素屬于黃酮類(lèi)化合物,廣泛存在于多種蔬菜、中藥材中。研究發(fā)現(xiàn)其具有多種藥理學(xué)活性,其中發(fā)現(xiàn)具有抗心肌缺血再灌注損傷的保護(hù)作用但其機(jī)制還尚未清楚。本實(shí)驗(yàn)采用了H9c2心肌細(xì)胞,成功建立H9c2心肌缺氧/復(fù)氧(A/R)損傷模型,并利用已經(jīng)構(gòu)建成功的efp-si RNA腺病毒,深入探討芹菜素抗H9c2心肌樣細(xì)胞缺氧復(fù)氧(A/R)損傷的保護(hù)作用與雌激素效應(yīng)環(huán)指蛋白(efp)蛋白之間的關(guān)系。方法:采用狀態(tài)良好的H9c2心肌細(xì)胞,經(jīng)常規(guī)培養(yǎng)后隨機(jī)分成五組,每組重復(fù)六次:(1)正常對(duì)照組(Control)、(2)缺氧/復(fù)氧組(A/R)、(3)芹菜素+A/R組(apigenin+A/R)、(4)芹菜素+陰性對(duì)照+A/R組(apigenin+NC+A/R)、(5)芹菜素+efp-si RNA+A/R組(apigenin+efp-si RNA+A/R)。采用MTT比色法測(cè)定各實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞存活率;采用Western blotting(免疫印跡)法測(cè)定efp蛋白表達(dá)水平;采用流式細(xì)胞儀測(cè)定各實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞的細(xì)胞凋亡水平以及細(xì)胞內(nèi)線(xiàn)粒體膜電位(Δψm)穩(wěn)定性、活性氧(ROS)含量;采用酶聯(lián)免疫法測(cè)定各實(shí)驗(yàn)組細(xì)...

【文章頁(yè)數(shù)】：46 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
英文縮寫(xiě)及全稱(chēng)和中文對(duì)照表
第1章 引言
第2章 材料與方法
    2.1 主要材料及試劑
    2.2 實(shí)驗(yàn)主要儀器和設(shè)備
    2.3 實(shí)驗(yàn)方法
        2.3.1 H9c2心肌細(xì)胞的培養(yǎng)
        2.3.2 腺病毒感染目的H9c2心肌細(xì)胞
        2.3.3 構(gòu)建H9c2心肌細(xì)胞缺氧復(fù)氧A/R模型
        2.3.4 采用MTT比色法測(cè)定H9c2心肌細(xì)胞存活率
        2.3.5 Western Blotting法檢測(cè)H9c2心肌細(xì)胞中efp蛋白表達(dá)
        2.3.6 生化指標(biāo)檢測(cè)
    2.4 處理數(shù)據(jù)
第3章 結(jié)果
    3.1 不同濃度芹菜素對(duì)H9c2心肌細(xì)胞A/R損傷后細(xì)胞存活率的影響
    3.2 不同濃度芹菜素對(duì)H9c2心肌細(xì)胞A/R損傷后efp蛋白表達(dá)影響
    3.3 芹菜素、efp-si RNA對(duì)H9c2心肌細(xì)胞A/R損傷后efp蛋白表達(dá)的影響
    3.4 芹菜素、efp-si RNA對(duì)H9c2心肌細(xì)胞A/R損傷后細(xì)胞存活率的影響
    3.5 芹菜素、efp-si RNA對(duì)H9c2心肌細(xì)胞A/R損傷后乳酸脫氫酶(LDH)活性的影響
    3.6 芹菜素、efp-si RNA對(duì)H9c2心肌細(xì)胞A/R損傷后細(xì)胞凋亡的影響
    3.7 芹菜素、efp-si RNA對(duì)H9c2心肌細(xì)胞A/R損傷后細(xì)胞線(xiàn)粒體膜電位（?Ψ）的影響
    3.8 芹菜素、efp-si RNA對(duì)H9c2心肌細(xì)胞A/R損傷后細(xì)胞生成ROS的影響
    3.9 芹菜素、efp-si RNA對(duì)H9c2心肌細(xì)胞A/R損傷后超氧化物歧化酶SOD、過(guò)氧化物酶GSH-Px和MDA的影響
第4章 討論
第5章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)



本文編號(hào)：3815371