本文關鍵詞：食品包裝材料中納米銀對腸上皮細胞（Caco-2）安全性的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：納米銀具有非常優(yōu)良的抗菌性。隨著納米銀在食品產業(yè)中應用增加，其對人體的潛在毒性開始引起人們的關注，納米銀能抑制成膠質細胞瘤細胞染色體分離，造成DNA損傷和染色體畸變，但是納米銀對人腸上皮細胞（Caco-2）的體外細胞毒性和分子機制還不清楚。為了探討納米銀是否具有細胞毒性，選擇腸上皮細胞（Caco-2）為實驗用細胞株，粒徑相近的納米氧化鋅作為強毒性的陽性對照，研究了三種不同粒徑銀粒子對Caco-2細胞的毒性和氧化應激損傷。主要研究內容和結果如下： （1）利用掃描電鏡和納米粒徑分析儀對三種銀粒子的形態(tài)和粒徑分布進行了表征，結果表明，三種銀粒子的形態(tài)近似球形。同種銀粒子的粒徑并不完全相同，不同粒徑大小的銀粒子數量呈正態(tài)分布，它們的平均粒徑分別為35.48nm，76.29nm，265.2nm，根據納米材料的定義可知，前兩種銀粒子為納米銀，第三種銀粒子為微米銀。 （2）為了探討納米銀（35.48nm）是否具有細胞毒性，，選取人腸上皮細胞Caco-2細胞株作為研究對象，采用細胞毒性較強的納米氧化鋅（26.21nm）為陽性對照，不加入納米材料的正常細胞為空白對照，通過AO/EB雙染法、WST-1法初步探究納米材料的細胞毒性。使用氧化應激的方法，通過檢測Caco-2細胞內ROS、SOD、GSH釋放量，來探討納米銀對細胞的氧化損傷作用及可能機制。實驗結果表明，35.48nm的銀粒子在低劑量（50μg/mL）時對腸上皮細胞的活性沒有影響，不會造成氧化應激損傷；在染毒劑量為75μg/mL和100μg/mL對腸上皮細胞（Caco-2）的毒性存在劑量-效應和時間-效應，并對細胞造成了程度較弱的氧化應激損傷。 （3）為了探討納米銀（76.29nm）是否具有細胞毒性，選取人腸上皮細胞Caco-2細胞株作為研究對象，采用細胞毒性較強的納米氧化鋅（90.81nm）為陽性對照，不加入納米材料的正常細胞為空白對照，通過AO/EB雙染法、CCK-8法初步探究究納米材料的細胞毒性。使用氧化應激的方法，通過檢測Caco-2細胞內ROS、SOD、GSH釋放量的影響，來探討納米銀對細胞的氧化損傷作用及可能機制。結果表明76.29nm的銀粒子（200μg/mL）對Caco-2細胞的活性沒有明顯影響，對Caco-2細胞沒有氧化應激損傷,但是使細胞的抗氧化力極顯著或顯著增強，隨著納米銀濃度的升高，細胞抗氧化力減弱。 （4）為了更全面地探究納米銀對腸上皮細胞的安全性，對微米級銀離子的細胞毒性進行了探討，作為探究納米銀細胞毒性的補充和對照。選取微米銀（265.2nm）和人腸上皮細胞Caco-2細胞株作為研究對象，不加入微米銀粒子的正常細胞為空白對照，通過AO/EB雙染法、MTT法初步探究微米銀的細胞毒性。使用氧化應激的方法，通過檢測Caco-2細胞內ROS、SOD、GSH釋放量，來探討微米銀對細胞的氧化損傷作用及可能機制。實驗結果表明，根據AO/EB雙染可知，265.2nm的銀粒子在劑量為200μg/mL時，部分細胞的細胞膜受損，出現凋亡。在測定的劑量范圍內（0-200μg/mL），沒有檢測到銀粒子對Caco-2細胞的活性有明顯影響。銀粒子染毒劑量為0-50μg/mL時，不會造成細胞的氧化應激損傷，在染毒劑量為100μg/mL和200μg/mL時，引起了腸上皮細胞（Caco-2）的氧化應激反映，造成了細胞內的氧化還原失衡。
【關鍵詞】：納米銀 腸上皮細胞 安全性 納米氧化鋅 細胞毒性 氧化應激
【學位授予單位】：中國計量學院
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2014
【分類號】：TS206.4;R114
【目錄】：

• 致謝5-6
• 摘要6-8
• Abstract8-10
• 目次10-13
• 圖清單13
• 附表清單13-14
• 1 緒論14-20
• 1.1 前言14
• 1.2 納米銀的研究現狀和應用14-16
• 1.2.1 納米銀研究現狀14-15
• 1.2.2 納米銀在食品相關領域的應用15-16
• 1.3 毒理學領域納米銀的研究現狀16-18
• 1.3.1 納米銀的體內毒性16
• 1.3.2 納米銀的細胞毒性16-18
• 1.4 展望18-19
• 1.5 本課題的研究內容及目的19-20
• 1.5.1 研究目的和意義19
• 1.5.2 研究內容19-20
• 2 納米銀的表征20-24
• 2.1 前言20
• 2.2 材料與儀器20
• 2.3 實驗方法20-21
• 2.4 結果與討論21-24
• 2.4.1 電鏡掃描21
• 2.4.2 銀粒子粒徑分析21-24
• 2.5 本章小結24
• 3 納米銀（35.48 nm）對 Caco-2 細胞安全性探究24-36
• 3.1 前言24
• 3.2 材料與儀器24-25
• 3.2.1 實驗材料24-25
• 3.2.2 主要儀器25
• 3.3 實驗方法25-28
• 3.3.1 細胞培養(yǎng)及納米材料預處理25-26
• 3.3.2 納米材料表征26
• 3.3.3 AO/EB 雙染26
• 3.3.4 WST-1 法細胞毒性分析26-27
• 3.3.5 氧化應激27-28
• 3.3.5.1 細胞內 ROS 水平檢測27
• 3.3.5.2 SOD 和 GSH 水平檢測27-28
• 3.4 實驗結果與討論28-35
• 3.4.1 納米材料的形態(tài)和粒徑分布28-29
• 3.4.2 AO/EB 雙染對細胞的影響29-31
• 3.4.3 WST-1 法檢測的細胞活性31-33
• 3.4.4 細胞的氧化應激33-35
• 3.5 本章小結35-36
• 4 納米銀（76.29 nm）對 Caco-2 細胞安全性探究36-44
• 4.1 前言36
• 4.2 材料與儀器36-37
• 4.2.1 實驗材料36-37
• 4.2.2 主要儀器37
• 4.3 實驗方法37-38
• 4.3.1 細胞培養(yǎng)及納米材料預處理37
• 4.3.2 納米材料表征37
• 4.3.3 AO/EB 雙染37
• 4.3.4 CCK-8 法細胞毒性分析37-38
• 4.3.5 氧化應激38
• 4.3.5.1 細胞內 ROS 水平檢測38
• 4.3.5.2 SOD 和 GSH 水平檢測38
• 4.4 實驗結果與討論38-44
• 4.4.1 納米材料的形態(tài)和粒徑分布38-39
• 4.4.2 AO/EB 雙染對細胞的影響39-41
• 4.4.3 CCK-8 法檢測的細胞活性41-42
• 4.4.4 細胞的氧化應激42-44
• 4.5 本章小結44
• 5 微米銀（2 65.2 nm）對 Caco-2 細胞安全性探究44-51
• 5.1 前言44-45
• 5.2 材料與儀器45
• 5.2.1 實驗材料45
• 5.2.2 主要儀器45
• 5.3 實驗方法45-46
• 5.3.1 細胞培養(yǎng)及微米銀預處理45
• 5.3.2 AO/EB 雙染45-46
• 5.3.3 MTT 法細胞毒性分析46
• 5.3.4 氧化應激46
• 5.3.4.1 細胞內 ROS 水平檢測46
• 5.3.4.2 SOD 和 GSH 水平檢測46
• 5.4 實驗結果與討論46-50
• 5.4.1 AO/EB 雙染對細胞的影響46-48
• 5.4.2 MTT 法檢測的細胞活性48-49
• 5.4.3 細胞的氧化應激49-50
• 5.5 本章小結50-51
• 6 論文總結、創(chuàng)新點與展望51-54
• 6.1 論文總結51-53
• 6.2 論文創(chuàng)新點53
• 6.3 問題與展望53-54
• 參考文獻54-59
• 作者簡歷59-60

【參考文獻】

中國期刊全文數據庫 前5條

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  本文關鍵詞：食品包裝材料中納米銀對腸上皮細胞（Caco-2）安全性的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：381499