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外周血淋巴細(xì)胞中谷胱甘肽含量變化與輻射劑量的相關(guān)性研究

發(fā)布時(shí)間:2017-05-19 13:07

  本文關(guān)鍵詞:外周血淋巴細(xì)胞中谷胱甘肽含量變化與輻射劑量的相關(guān)性研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。


【摘要】:目的:當(dāng)人體受到輻射時(shí),可產(chǎn)生大量的活性氧(reactive oxygen species,ROS)和自由基(free radical,F(xiàn)R),細(xì)胞內(nèi)的還原型谷胱甘肽(reduced glutathione,GSH)抗氧化系統(tǒng)能夠有效清除輻射所引起的ROS和FR,降低射線對(duì)細(xì)胞的損傷作用。本研究觀察外周血淋巴細(xì)胞中GSH含量變化與輻射劑量之間的相關(guān)性,并建立GSH含量與輻射劑量之間的劑量-效應(yīng)曲線,從而在職業(yè)受照射人員體檢及輻射應(yīng)急事故中,更快地進(jìn)行生物劑量估算,并能夠?qū)Σ煌椛鋼p傷程度的人群進(jìn)行分類。 方法:選取淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)在正常范圍內(nèi)的健康成人血標(biāo)本120份,中位年齡42歲,男女比例為31:29,離體時(shí)間不超過4h,分成5個(gè)劑量組,每組24份血標(biāo)本,給予直線加速器6MV-X線,源皮距(source skin distance, SSD)100cm,劑量建成1.5cm,分別照射0Gy、1Gy、2Gy、3Gy、5Gy,照射后2小時(shí),利用淋巴細(xì)胞分離液提取出淋巴細(xì)胞,再利用谷胱甘肽試劑盒檢測(cè)淋巴細(xì)胞中的總谷胱甘肽(total glutathione, T-GSH)、氧化性谷胱甘肽(oxidized glutathione, GSSG)以及GSH的含量,比較不同劑量照射后,淋巴細(xì)胞中GSH含量的差異,并建立劑量-效應(yīng)曲線,觀察GSH的含量與輻射劑量之間的相關(guān)性。此外,同一血標(biāo)本在X線照射后,加入帶有植物血凝素(phytohemagglutinin,PHA)的RPMI-1640培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng),37℃培養(yǎng)44h,加入秋水仙素阻滯細(xì)胞的有絲分裂,繼續(xù)培養(yǎng)至52h,收獲中期分裂相細(xì)胞。經(jīng)低滲、預(yù)固定、固定、離心、制片后讀片,每張片子觀察100個(gè)細(xì)胞,數(shù)出其中的雙著絲粒數(shù),計(jì)算出雙著絲粒染色體畸變率。微核實(shí)驗(yàn)為同一血標(biāo)本經(jīng)X線照射后,加入帶有PHA的RPMI培養(yǎng)基,37℃培養(yǎng)40h后,加入松胞素-B(Cytochalasin B),繼續(xù)培養(yǎng)至72h收獲,經(jīng)低滲、固定、制片、Giemsa染色后讀片,每張片子觀察500個(gè)雙核細(xì)胞,數(shù)出其中的微核數(shù),計(jì)算出每個(gè)劑量組的微核形成率。 結(jié)果: GSH含量與輻射劑量之間呈直線負(fù)相關(guān),劑量-效應(yīng)曲線擬合公式為y=-0.59x+5.97,R2=0.95。GSH/GSSG比值與輻射劑量之間呈三次函數(shù)變化趨勢(shì),劑量-效應(yīng)曲線擬合公式為y=-0.08x3+0.82x2-2.78x+4.69,R2=0.98。五個(gè)劑量組的染色體畸變率分別為0,10.08%,41.17%,73.08%,207.42%,與輻射劑量之間關(guān)系呈二次函數(shù)變化趨勢(shì),劑量-效應(yīng)曲線擬合公式為y=7.78x2+2.28x+0.64,R2=0.9984。五個(gè)劑量組的微核形成率分別為1.7‰,43.5‰,84.4‰,197.2‰,,478.8‰,與輻射劑量之間關(guān)系亦呈二次函數(shù)變化趨勢(shì),劑量-效應(yīng)曲線公式為y=15.9x2+16.3x+0.55,R2=0.9981。且GSH含量與雙著絲粒染色體畸變率之間存在相關(guān)性,r=0.966;GSH含量與微核率之間存在相關(guān)性,r=0.968。 結(jié)論:GSH含量與輻射劑量之間呈直線負(fù)相關(guān),且GSH含量與染色體畸變率和微核率之間存在較好的相關(guān)性,故利用GSH含量變化進(jìn)行輻射生物劑量估算具有較高的可行性,與傳統(tǒng)的CA分析法與CB微核法相比,通過GSH含量進(jìn)行照射劑量估算更為省時(shí)、簡(jiǎn)便。
【關(guān)鍵詞】:還原型谷胱甘肽 輻射劑量 染色體畸變 CB微核
【學(xué)位授予單位】:安徽醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2014
【分類號(hào)】:R144
【目錄】:
  • 縮略詞表及中英文對(duì)照6-7
  • 中文摘要7-9
  • Abstract9-12
  • 1 前言12-17
  • 1.1 還原型谷胱甘肽與輻射12-15
  • 1.2 染色體畸變分析15-16
  • 1.3 CB 微核法16-17
  • 2 材料與方法17-28
  • 2.1 實(shí)驗(yàn)材料17-19
  • 2.1.1 血標(biāo)本17
  • 2.1.2 藥物及試劑17
  • 2.1.3 儀器與設(shè)備17-18
  • 2.1.4 常用試劑配制18-19
  • 2.2 實(shí)驗(yàn)方法19-28
  • 2.2.1 血樣條件19
  • 2.2.2 照射條件19
  • 2.2.3 淋巴細(xì)胞的提取19-20
  • 2.2.4 還原型谷胱甘肽的測(cè)定20-25
  • 2.2.5 染色體畸變分析25-26
  • 2.2.6 CB 微核法26-27
  • 2.2.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法27-28
  • 3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果28-36
  • 3.1 受照淋巴細(xì)胞內(nèi) GSH 含量及 GSH/GSSG 比值變化28-32
  • 3.2 染色體畸變分析結(jié)果32-34
  • 3.3 CB 微核法結(jié)果34-35
  • 3.4 淋巴細(xì)胞內(nèi)氧化還原狀態(tài)與染色體畸變、微核形成的相關(guān)性35-36
  • 4 討論36-39
  • 4.1 受照淋巴細(xì)胞內(nèi) GSH 含量及 GSH/GSSG 比值變化36-37
  • 4.2 染色體畸變率與輻射劑量呈正相關(guān)37-38
  • 4.3 微核率與輻射劑量呈正相關(guān)38-39
  • 4.4 GSH 含量與染色體畸變率及微核率之間的相關(guān)性39
  • 5 結(jié)論39-41
  • 6 參考文獻(xiàn)41-48
  • 個(gè)人簡(jiǎn)歷48-49
  • 致謝49-50
  • 綜述:生物劑量的估算方法50-58
  • 參考文獻(xiàn)54-58

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 陳英;周平坤;吳可;;放射損傷生物劑量估算技術(shù)研究[J];輻射防護(hù);2008年06期


  本文關(guān)鍵詞:外周血淋巴細(xì)胞中谷胱甘肽含量變化與輻射劑量的相關(guān)性研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。



本文編號(hào):378765

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