高糖飲食對果蠅腸道干細(xì)胞增殖及分化的影響
發(fā)布時間:2022-10-08 16:10
糖類是一切生物體維持基本生命活動最主要的能量來源之一。隨著經(jīng)濟的發(fā)展和人們生活水平的提高,人們的飲食習(xí)慣也在發(fā)生著巨大的變化。很多人喜歡吃含糖量高的食物,這樣的飲食習(xí)慣也給我們帶來了很多疾病,如肥胖、心臟病、胰島素抵抗等。腸道是人體最長的消化道,它行使著重要的消化吸收功能。同時,腸道黏膜還是機體抵御外界病原體入侵的第一道防線,在參與免疫應(yīng)答方面也有著重要的作用。為了研究高糖飲食對腸道免疫的影響,我們選擇了在基因功能和代謝方式上與哺乳動物有很高的相似度的模式生物黑腹果蠅作為實驗材料。正常的果蠅培養(yǎng)基中蔗糖的濃度為0.15M,本實驗中所用高糖培養(yǎng)基中蔗糖濃度為1M。將果蠅的受精卵放入高糖培養(yǎng)基中培養(yǎng),待果蠅羽化后通過免疫染色方法對腸道上皮細(xì)胞的數(shù)量及形態(tài)、各信號通路因子、活性氧自由基水平等方面進(jìn)行檢測。結(jié)果表明,高糖飲食可以促進(jìn)果蠅腸道上皮細(xì)胞的分化并提高活性氧自由基的水平,同時伴隨著JNK通路的激活以及死亡細(xì)胞數(shù)量增多。此外,通過培養(yǎng)果蠅腸道中的共生菌群發(fā)現(xiàn),喂食高糖培養(yǎng)基的果蠅腸道共生菌群種類和含量都發(fā)生了明顯變化。本文闡述了高糖飲食對果蠅腸道免疫的影響,為今后深入研究高糖飲食對機體的...
【文章頁數(shù)】:40 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
1 緒論
1.1 高糖飲食
1.2 黑腹果蠅
1.3 果蠅腸道結(jié)構(gòu)和腸道免疫
1.3.1 果蠅腸道結(jié)構(gòu)及腸道上皮細(xì)胞
1.3.2 果蠅腸道信號通路和腸道免疫
1.4 腸道共生菌群
1.5 實驗?zāi)康募耙饬x
2 材料與方法
2.1 果蠅的品系
2.2 培養(yǎng)條件
2.3 培養(yǎng)基的制備
2.3.1 果蠅培養(yǎng)基
2.3.2 接卵平板培養(yǎng)基
2.3.3 LB液體培養(yǎng)基
2.3.4 LB平板培養(yǎng)基
2.4 儀器
2.5 試劑及抗體
2.6 腸道的免疫熒光染色
2.7 腸道的7-AAD、DHE及Bodipy染色
2.8 腸道共生菌群檢測
2.8.1 菌群種類檢測
2.8.2 菌群含量檢測
2.9 統(tǒng)計學(xué)分析
3 結(jié)果與分析
3.1 高糖飲食促進(jìn)果蠅腸道細(xì)胞的分化
3.1.1 高糖飲食促進(jìn)腸道前體細(xì)胞的分裂
3.1.2 高糖飲食不影響ISC細(xì)胞的增殖
3.1.3 高糖飲食促進(jìn)EB細(xì)胞的分裂
3.1.4 高糖飲食促進(jìn)EB細(xì)胞分化為EC、EE細(xì)胞
3.2 高糖飲食對果蠅腸道各通路因子的影響
3.2.1 高糖飲食激活果蠅腸道細(xì)胞中的JNK信號通路
3.2.2 高糖飲食對JAK/STAT信號通路有抑制作用
3.2.3 高糖飲食不影響Notch通路
3.2.4 高糖飲食對EGFR通路沒有明顯作用
3.3 高糖飲食對果蠅腸道形態(tài)學(xué)的影響
3.3.1 高糖飲食促進(jìn)腸道細(xì)胞死亡
3.3.2 高糖飲食使腸道細(xì)胞排列紊亂
3.3.3 高糖飲食可以提高腸道內(nèi)ROS的水平
3.3.4 高糖飲食使腸道內(nèi)脂肪含量上升
3.4 高糖飲食對果蠅腸道共生菌群的影響
3.4.1 高糖飲食可以改變果蠅腸道共生菌群的種類
3.4.2 高糖飲食使果蠅腸道內(nèi)共生菌群含量降低
3.5 本章小結(jié)
4 討論
4.1 高糖飲食對果蠅腸道上皮細(xì)胞的影響
4.2 高糖飲食對果蠅腸道信號通路因子表達(dá)量的作用
4.3 高糖飲食使果蠅腸道上皮細(xì)胞排列紊亂
4.4 高糖在果蠅腸道中轉(zhuǎn)化為脂肪油滴
4.5 高糖飲食對果蠅腸道共生菌群的影響
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文
致謝
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]果蠅基因組與功能基因研究進(jìn)展[J]. 劉素寧,沈杰. 應(yīng)用昆蟲學(xué)報. 2011(06)
[2]生命科學(xué)與人類疾病研究的重要模型——果蠅[J]. 萬永奇,謝維. 生命科學(xué). 2006(05)
[3]高糖高脂飲食誘導(dǎo)的2型糖尿病模型大鼠血脂的特點[J]. 孫曉風(fēng),王海燕,李琳琳,毛新民. 新疆醫(yī)科大學(xué)學(xué)報. 2005(02)
[4]腸道屏障功能[J]. 吳國豪. 腸外與腸內(nèi)營養(yǎng). 2004(01)
[5]高糖高脂飲食誘導(dǎo)的2型糖尿病大鼠模型及其腎病特點[J]. 郭嘯華,劉志紅,李恒,黎磊石. 中國糖尿病雜志. 2002(05)
本文編號:3688019
【文章頁數(shù)】:40 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
1 緒論
1.1 高糖飲食
1.2 黑腹果蠅
1.3 果蠅腸道結(jié)構(gòu)和腸道免疫
1.3.1 果蠅腸道結(jié)構(gòu)及腸道上皮細(xì)胞
1.3.2 果蠅腸道信號通路和腸道免疫
1.4 腸道共生菌群
1.5 實驗?zāi)康募耙饬x
2 材料與方法
2.1 果蠅的品系
2.2 培養(yǎng)條件
2.3 培養(yǎng)基的制備
2.3.1 果蠅培養(yǎng)基
2.3.2 接卵平板培養(yǎng)基
2.3.3 LB液體培養(yǎng)基
2.3.4 LB平板培養(yǎng)基
2.4 儀器
2.5 試劑及抗體
2.6 腸道的免疫熒光染色
2.7 腸道的7-AAD、DHE及Bodipy染色
2.8 腸道共生菌群檢測
2.8.1 菌群種類檢測
2.8.2 菌群含量檢測
2.9 統(tǒng)計學(xué)分析
3 結(jié)果與分析
3.1 高糖飲食促進(jìn)果蠅腸道細(xì)胞的分化
3.1.1 高糖飲食促進(jìn)腸道前體細(xì)胞的分裂
3.1.2 高糖飲食不影響ISC細(xì)胞的增殖
3.1.3 高糖飲食促進(jìn)EB細(xì)胞的分裂
3.1.4 高糖飲食促進(jìn)EB細(xì)胞分化為EC、EE細(xì)胞
3.2 高糖飲食對果蠅腸道各通路因子的影響
3.2.1 高糖飲食激活果蠅腸道細(xì)胞中的JNK信號通路
3.2.2 高糖飲食對JAK/STAT信號通路有抑制作用
3.2.3 高糖飲食不影響Notch通路
3.2.4 高糖飲食對EGFR通路沒有明顯作用
3.3 高糖飲食對果蠅腸道形態(tài)學(xué)的影響
3.3.1 高糖飲食促進(jìn)腸道細(xì)胞死亡
3.3.2 高糖飲食使腸道細(xì)胞排列紊亂
3.3.3 高糖飲食可以提高腸道內(nèi)ROS的水平
3.3.4 高糖飲食使腸道內(nèi)脂肪含量上升
3.4 高糖飲食對果蠅腸道共生菌群的影響
3.4.1 高糖飲食可以改變果蠅腸道共生菌群的種類
3.4.2 高糖飲食使果蠅腸道內(nèi)共生菌群含量降低
3.5 本章小結(jié)
4 討論
4.1 高糖飲食對果蠅腸道上皮細(xì)胞的影響
4.2 高糖飲食對果蠅腸道信號通路因子表達(dá)量的作用
4.3 高糖飲食使果蠅腸道上皮細(xì)胞排列紊亂
4.4 高糖在果蠅腸道中轉(zhuǎn)化為脂肪油滴
4.5 高糖飲食對果蠅腸道共生菌群的影響
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文
致謝
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]果蠅基因組與功能基因研究進(jìn)展[J]. 劉素寧,沈杰. 應(yīng)用昆蟲學(xué)報. 2011(06)
[2]生命科學(xué)與人類疾病研究的重要模型——果蠅[J]. 萬永奇,謝維. 生命科學(xué). 2006(05)
[3]高糖高脂飲食誘導(dǎo)的2型糖尿病模型大鼠血脂的特點[J]. 孫曉風(fēng),王海燕,李琳琳,毛新民. 新疆醫(yī)科大學(xué)學(xué)報. 2005(02)
[4]腸道屏障功能[J]. 吳國豪. 腸外與腸內(nèi)營養(yǎng). 2004(01)
[5]高糖高脂飲食誘導(dǎo)的2型糖尿病大鼠模型及其腎病特點[J]. 郭嘯華,劉志紅,李恒,黎磊石. 中國糖尿病雜志. 2002(05)
本文編號:3688019
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