環(huán)境中的鎘污染被認(rèn)為與慢性肝病和腎病、高血壓等多種疾病的發(fā)生相關(guān)。很多實(shí)驗(yàn)結(jié)果已證實(shí)了鎘在致動(dòng)脈粥樣硬化中的作用,包括抑制細(xì)胞增殖、促進(jìn)凋亡而增加內(nèi)皮細(xì)胞滲透性,以及改變機(jī)體脂代謝。然而,針對(duì)鎘引起脂代謝紊亂的研究,主要是發(fā)現(xiàn)了鎘暴露導(dǎo)致血清中膽固醇、甘油三酯水平上升的現(xiàn)象,但其分子機(jī)制仍舊不清楚。本課題則從脂代謝問題入手,研究鎘對(duì)脂代謝轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的表達(dá)影響,并通過(guò)分子生物學(xué)方法解釋鎘誘導(dǎo)脂轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白ABCA1（ATP-binding cassette transporter A1）表達(dá)增加的機(jī)理和鎘對(duì)抑制蛋白降解的生物毒性機(jī)制。在本研究中,我們用含有不同鎘劑量的飼料喂養(yǎng)ICR小鼠28天,建立小鼠模型模擬環(huán)境鎘污染現(xiàn)象;結(jié)合熒光定量PCR和Western Blotting對(duì)脂代謝相關(guān)基因進(jìn)行檢測(cè),分析鎘對(duì)脂代謝轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白表達(dá)的影響。蛋白穩(wěn)定性分析發(fā)現(xiàn)鎘增加HepG2細(xì)胞中ABCA1蛋白是主要通過(guò)抑制溶酶體降解途徑形成的,這也是鎘抑制自噬流產(chǎn)生細(xì)胞毒性的原因。鎘處理后小鼠肝臟中負(fù)責(zé)脂代謝轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的表達(dá)發(fā)生變化:1.負(fù)責(zé)甘油三酯轉(zhuǎn)運(yùn)的MTTP（Microsomal triglyceride tr... 

【文章來(lái)源】：江蘇大學(xué)江蘇省

【文章頁(yè)數(shù)】：73 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

RT-qPCR檢測(cè)鎘處理小鼠組織NPC1L1mRNA的表達(dá)

圖 2.1 RT-qPCR 檢測(cè)鎘處理小鼠組織 NPC1L1 mRNA 的表達(dá)Fig2.1 RT-qPCR detection of NPC1L1 mRNA expression in mice tissue with Cd treatment*表示在統(tǒng)計(jì)學(xué)上有顯著的差異（p<0.05），**表示在統(tǒng)計(jì)學(xué)上有非常顯著的差異（p<0.01）。微粒體甘油三脂轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白（MTTP）的功能是負(fù)責(zé)甘油三酯轉(zhuǎn)運(yùn)和參與合成極低密度脂蛋白（VLDL）。肝臟和小腸中 mRNA 水平檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，該基因表達(dá)明顯上調(diào)。小腸組織 100 ppm 和 1000 ppm 組中該基因表達(dá)顯著增加，分別增加 2倍和 4 倍（圖 2.2A）。肝臟組織中，100 ppm 和 1000 ppm 處理組 MTTP 的表達(dá)上調(diào)，分別增加約 2.3 倍和 2.1 倍（圖 2.2 B）。

圖 2.3 RT-qPCR 檢測(cè)鎘處理小鼠肝臟組織 HMGCR 和 Srebp2 mRNA 的表達(dá)Fig2.3 RT-qPCR detection of HMGCR and Srebp2 mRNA expression in mice liver with Cdtreatment*表示在統(tǒng)計(jì)學(xué)上有顯著的差異（p<0.05），**表示在統(tǒng)計(jì)學(xué)上有非常顯著的差異（p<0.01）。B 類Ⅰ型清道夫受體（SR-B1）是高密度脂蛋白（HDL）的配體，和低密度脂蛋白受體LDLR一樣參與介導(dǎo)膽固醇轉(zhuǎn)運(yùn)。我們對(duì)肝臟組織中SR-B1 進(jìn)行檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)與前期實(shí)驗(yàn)對(duì)低密度脂蛋白受體 LDLRmRNA 表達(dá)的檢測(cè)結(jié)果相比，SR-B1的表達(dá)無(wú)明顯變化（圖 2.4A）。（圖 2.4 B 來(lái)自季星岐鎘誘導(dǎo)小鼠血清膽固醇增加及其分子機(jī)制的研究）

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]溶酶體膜上的離子通道[J]. 曲莉麗,辛競(jìng),倉(cāng)春蕾.  中國(guó)科學(xué):生命科學(xué). 2017(01)
[2]Regulation of lysosomal ion homeostasis by channels and transporters[J]. Jian Xiong,Michael X.Zhu.  Science China（Life Sciences）. 2016(08)
[3]土壤鎘污染現(xiàn)狀及其治理措施研究進(jìn)展[J]. 盧紅玲,肖光輝,劉青山,彭新德.  南方農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào). 2014(11)
[4]LDL受體介導(dǎo)的血漿低密度脂蛋白膽固醇的內(nèi)吞[J]. 范麗娟,李仲.  生命的化學(xué). 2014(03)
[5]鎘的應(yīng)用和鎘污染[J]. 鄧玉良.  化學(xué)世界. 2012(11)
[6]鎘毒性研究進(jìn)展[J]. 劉莉莉,林嵐,殷霄,陳潤(rùn)濤,羅巧,謝植偉,陳曉燕,蔡婷峰,陸豐榮.  中國(guó)職業(yè)醫(yī)學(xué). 2012(05)
[7]氧化應(yīng)激在鎘致大鼠肝細(xì)胞凋亡中的作用[J]. 汪紀(jì)倉(cāng),劉學(xué)忠,袁燕,裔傳卉,卞建春,劉宗平.  中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué). 2011(18)
[8]自噬與泛素化蛋白降解途徑的分子機(jī)制及其功能[J]. 陳科,程漢華,周榮家.  遺傳. 2012(01)
[9]土壤鎘污染現(xiàn)狀及危害研究進(jìn)展[J]. 冉烈,李會(huì)合.  重慶文理學(xué)院學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2011(04)
[10]微粒體甘油三酯轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白脂代謝作用及表達(dá)與調(diào)節(jié)[J]. 陳仕均,唐海蓉,王哲,孫玉成,鄧俊良.  畜牧與獸醫(yī). 2008(03)



本文編號(hào)：3589977