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不同期別矽肺病人肺泡巨噬細(xì)胞差異蛋白質(zhì)研究

發(fā)布時(shí)間:2021-12-02 03:05
  目的收集不同期別矽肺病人肺灌洗液中巨噬細(xì)胞,探討不同期別矽肺患者肺泡巨噬細(xì)胞的差異蛋白質(zhì),以期獲得與矽肺發(fā)生發(fā)展有關(guān)的蛋白質(zhì),進(jìn)一步揭示矽肺的發(fā)生發(fā)展機(jī)理。方法選取2016年10月至2017年9月中國(guó)煤礦工人北戴河療養(yǎng)院治療的矽肺患者為研究對(duì)象,選取其中接塵史單純即只接觸巖塵,無(wú)其他或盡量少的基礎(chǔ)疾病,未脫塵或脫塵時(shí)間短(2年內(nèi))的31例男性矽肺患者。肺內(nèi)粉塵沉著癥5例、矽肺壹期10例、矽肺貳期9例、矽肺叁期7例。查閱病歷,符合入選條件并簽署知情同意書(shū)后,收集矽肺病人前8瓶灌洗液,提取肺灌洗液中巨噬細(xì)胞。培養(yǎng)2h后,前7瓶巨噬細(xì)胞用于提取全蛋白并于-80℃冰箱保存,第8瓶提取的巨噬細(xì)胞用于瑞氏吉姆薩染色,觀察細(xì)胞形態(tài)。巨噬細(xì)胞培養(yǎng)2h冰上提取蛋白質(zhì),雙向凝膠電泳初步分離差異蛋白質(zhì),Image Master 2D Platinum軟件確定差異蛋白斑點(diǎn),New ultrafle Xtreme型反射式串聯(lián)基質(zhì)輔助激光解吸附飛行時(shí)間質(zhì)譜鑒定差異斑點(diǎn),應(yīng)用生物信息學(xué)對(duì)差異蛋白質(zhì)進(jìn)行GO、KEGG Pathway、PPI分析。結(jié)果研究入選的31例患者年齡、地區(qū)、吸煙史、飲酒史、接塵時(shí)間、粉塵性質(zhì)、... 

【文章來(lái)源】:華北理工大學(xué)河北省

【文章頁(yè)數(shù)】:64 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

不同期別矽肺病人肺泡巨噬細(xì)胞差異蛋白質(zhì)研究


矽肺病人巨噬細(xì)胞形態(tài)

吉姆薩染色,肺泡巨噬細(xì)胞,矽肺,肺泡灌洗液


注: A 為肺內(nèi)粉塵沉著癥病人肺泡灌洗液巨噬細(xì)胞;B 為矽肺壹期癥病人肺泡灌洗液巨噬細(xì)胞;C 為矽肺貳期病人肺泡灌洗液巨噬細(xì)胞; D 為矽肺叁期病人肺泡灌洗液巨噬細(xì)胞 比例尺為 50μm,紅色箭頭所指處為空泡,黑色箭頭所指處為細(xì)胞核,黃色箭頭所指處為粉塵圖 2 肺泡巨噬細(xì)胞瑞氏-吉姆薩染色Fig.2 The ray-giemsa staining of alveolar macrophage1.3.3 雙向凝膠電泳差異蛋白斑點(diǎn)PH 干膠條為 3-10NL,彩色 Marker 表示范圍為 10-170 KDa。經(jīng) Image Masterv6.0 軟件識(shí)別分析:肺內(nèi)粉塵沉著癥組 4 張膠共匹配 1500 個(gè)蛋白斑點(diǎn);壹期矽肺組 9 張膠共匹配 4619 個(gè)蛋白斑點(diǎn);貳期矽肺組 8 張膠共匹配 3049 個(gè)蛋白斑點(diǎn);叁期矽肺組 6 張膠共匹配 4713 個(gè)蛋白斑點(diǎn)。肺內(nèi)粉塵沉著癥組與壹期矽肺組間共存在 17 個(gè)差異蛋白斑點(diǎn);肺內(nèi)粉塵沉著癥組與貳期矽肺組間共存在 28 個(gè)差異蛋白斑點(diǎn);肺內(nèi)粉塵沉著癥組與叁期矽肺組間共存在 6 個(gè)差異蛋白斑點(diǎn)。經(jīng)反復(fù)確定及聽(tīng)取老師建議最后確定肺內(nèi)粉塵沉著癥

分布情況,雙向凝膠電泳,點(diǎn)圖,矽肺


第 1 章 實(shí)驗(yàn)研究 3516,3304, 2276, 1792, 3008, 1821, 2967, 2805, 2376, 1857, 1349;肺內(nèi)粉組與叁期矽肺組間共 6 個(gè)差異蛋白斑點(diǎn),Match ID 分別為 2828, 2863, 4, 2959, 2965;總共 23 個(gè)斑點(diǎn)擬進(jìn)行質(zhì)譜鑒定。有趣的是 Match ID 為 30蛋白斑點(diǎn)在肺內(nèi)粉塵沉著癥組與矽肺壹期組,肺內(nèi)粉塵沉著癥組與矽肺貳組間均存在差異,這很可能是矽肺發(fā)生發(fā)展的關(guān)鍵蛋白質(zhì)。表 7 差異蛋白質(zhì)分布情況Table 7 The conditions of diverse protein spots因素 S0 vs S1 S0 vs S2 S0 vs S3別差異點(diǎn)數(shù)量 17 28 6質(zhì)譜鑒定數(shù)量 6 11 6定差異點(diǎn)數(shù)量 2 5 0S0 代表肺內(nèi)粉塵沉著癥組;S1 代表壹期矽肺組;S2 代表貳期矽肺組;S3 代表叁期矽肺組


本文編號(hào):3527601

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