目的本研究以4-壬基酚（4-NP）和雙酚A（BPA）為受試物,研究4-NP和BPA聯(lián)合染毒對(duì)子代雄性大鼠生殖功能的影響及其作用機(jī)制。方法1、采用2×2析因設(shè)計(jì)的方法,將21 d SD大鼠48只（雄鼠12只,雌鼠36只）,將雌雄鼠采用隨機(jī)數(shù)字法隨機(jī)分為4組[對(duì)照組、4-NP組（5 mg/kg）、BPA組（0.5 mg/kg）、4-NP+BPA組（5 mg/kg+0.5 mg/kg）],適應(yīng)性飼養(yǎng)后,將配好的染毒液對(duì)雌雄大鼠進(jìn)行隔天灌胃給藥（5 ml/kg）,至大鼠55 d,雌鼠發(fā)情后,同組雌雄鼠3:1合籠,采用陰道涂片鏡檢觀察是否受孕,將發(fā)現(xiàn)陰栓或者陰道涂片鏡檢看到大量精子且處于動(dòng)情期的雌鼠判斷為懷孕,將其分離出來(lái)單獨(dú)飼養(yǎng),繼續(xù)灌胃直至哺乳期結(jié)束的時(shí)間段內(nèi)分別對(duì)孕鼠進(jìn)行灌胃染毒,得到的F1代雄鼠每組隨機(jī)取6只.飼養(yǎng)至60 d,取相應(yīng)組織。2、采用血細(xì)胞計(jì)數(shù)法對(duì)精子數(shù)量進(jìn)行計(jì)數(shù),HE染色法觀察睪丸組織的結(jié)構(gòu),透射電鏡觀察自噬的發(fā)生情況,比色法測(cè)量氧化應(yīng)激的相應(yīng)指標(biāo),采用RT-PCR檢測(cè)Akt、mTOR、4EBP1、p70S6K基因的表達(dá),采用蛋白印跡法測(cè)量Akt、p-Akt、p-4EBP1... 

【文章來(lái)源】：武漢科技大學(xué)湖北省

【文章頁(yè)數(shù)】：64 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

-NP、BPA對(duì)子代大鼠體重的影響（n=6，*表示P<0.05）

武漢科技大學(xué)碩士學(xué)位論文18表3.14-NP、BPA對(duì)子代大鼠各臟器質(zhì)量（g）的影響（n=6）睪丸心肝脾肺腎對(duì)照2.74±0.150.99±0.047.62±0.360.72±0.051.23±0.071.89±0.1144-NP1.93±0.05a0.70±0.02a6.73±0.33a0.60±0.01a1.34±0.121.55±0.08aBPA2.46±0.06a0.84±0.07a7.48±0.200.54±0.05a1.35±0.071.75±0.09a4-NP+BPA2.20±0.05a,b,c0.93±0.01b,c7.49±0.26b0.60±0.03a1.26±0.051.85±0.08b注：a與對(duì)照組比較P<0.05，b與4-NP組比較P<0.05，c與BPA組比較P<0.05表3.24-NP、BPA對(duì)子代大鼠各臟器系數(shù)（%）的影響（n=6）睪丸系數(shù)心臟系數(shù)肝臟系數(shù)脾臟系數(shù)肺臟系數(shù)腎臟系數(shù)對(duì)照1.14±0.100.38±0.013.32±0.100.28±0.010.47±0.030.76±0.024-NP1.03±0.03a0.33±0.01a3.04±0.07a0.27±0.010.61±0.05a0.70±0.01aBPA0.99±0.01a0.33±0.02a2.98±0.09a0.22±0.01a0.57±0.04a0.70±0.03a4-NP+BPA0.92±0.01a,b0.39±0.01b,c3.12±0.140.26±0.02c0.52±0.03b0.76±0.02b,c注：a與對(duì)照組比較P<0.05，b與4-NP組比較P<0.05，c與BPA組比較P<0.05表3.34-NP、BPA對(duì)子代大鼠肝臟系數(shù)、睪丸系數(shù)和睪丸重量的析因分析結(jié)果大鼠體重睪丸重量睪丸系數(shù)FPFPFP4-NP8.4600.011112.2080.0006.6910.029BPA1.5230.2370.0160.90116.1800.0034-NP+BPA5.0640.04130.6600.0010.3730.557圖3.24-NP、BPA對(duì)子代大鼠體重、睪丸系數(shù)的均數(shù)邊際輪廓圖

武漢科技大學(xué)碩士學(xué)位論文193.24-NP、BPA對(duì)子代大鼠精子數(shù)量的影響本實(shí)驗(yàn)中對(duì)大鼠精子計(jì)數(shù)的變化見(jiàn)圖3.3，單獨(dú)染毒組與聯(lián)合染毒組組與對(duì)照組比較，精子計(jì)數(shù)都下降了，其中與對(duì)照組相比較，BPA組和聯(lián)合組精子數(shù)量下降具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P<0.05）；其余各組間無(wú)差異（P>0.05）。析因方差分析結(jié)果見(jiàn)表3.4，顯示沒(méi)有具體的聯(lián)合作用效應(yīng)（P>0.05）。圖3.34-NP、BPA對(duì)子代大鼠精子計(jì)數(shù)的影響（n=6，*表示P<0.05）表3.44-NP、BPA對(duì)子代大鼠精子計(jì)數(shù)的析因分析結(jié)果精子計(jì)數(shù)FP4-NP0.390.542BPA7.6840.0144-NP+BPA4.1940.0593.34-NP、BPA對(duì)子代大鼠睪丸組織形態(tài)結(jié)構(gòu)的影響如圖3.4所示，對(duì)照組的睪丸組織的HE染色顯示：睪丸組織結(jié)構(gòu)正常，處于層次不同的細(xì)胞、組織排列緊密，條理清楚，在管腔的中央可以看見(jiàn)大量的成熟精子；在4-NP、BPA以及聯(lián)合組中，各層次的組織細(xì)胞就不如對(duì)照組的緊湊，組織間的間隙增大，少部分組織可見(jiàn)組織的混亂，管腔內(nèi)精子數(shù)量較少。在單獨(dú)染毒組和聯(lián)合染毒組的病理切片中，聯(lián)合組的變化不如單獨(dú)染毒組的變化大，呈現(xiàn)出一些組織間隙增大，精子數(shù)量減少的現(xiàn)象。

【參考文獻(xiàn)】：
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本文編號(hào)：3505543