本文關(guān)鍵詞：納米二氧化硅對(duì)斑馬魚胚胎發(fā)育的毒性，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的評(píng)價(jià)納米二氧化硅(Silica Nanoparticles,Si NPs)對(duì)斑馬魚早期發(fā)育的毒性效應(yīng),發(fā)現(xiàn)敏感器官并揭示其可能的分子機(jī)制。方法1.Si NPs對(duì)斑馬魚早期發(fā)育的影響:將斑馬魚胚胎暴露于不同濃度的Si NPs(37~1500μg/ml)分散體系,以胚胎死亡率,畸形率,孵化率等指標(biāo),評(píng)價(jià)Si NPs對(duì)斑馬魚胚胎產(chǎn)生的毒性效應(yīng),并通過基準(zhǔn)劑量法(Benchmark Dose,BMD)計(jì)算各毒性效應(yīng)的閾值。2.Si NPs對(duì)斑馬魚胚胎心臟發(fā)育的影響:依據(jù)上述實(shí)驗(yàn)計(jì)算所得的BMD值,設(shè)定Si NPs的染毒劑量范圍(6~36μg/ml),通過靜脈竇和動(dòng)脈球間距與體長的比值、心包囊相對(duì)面積、心包水腫發(fā)生率以及心率等指標(biāo),評(píng)價(jià)Si NPs對(duì)斑馬魚胚胎心臟形態(tài)和功能的影響。另外,通過吖啶橙、TUNEL染色和q RT-PCR技術(shù)闡明Si NPs對(duì)斑馬魚心臟發(fā)育改變的可能機(jī)制。3.應(yīng)用SPSS 21.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)描述以SX±表示。假設(shè)檢驗(yàn)采用方差分析及Dunnet法兩兩比較。檢驗(yàn)水準(zhǔn)為α=0.05。結(jié)果1.Si NPs對(duì)斑馬魚早期發(fā)育毒性作用的影響(1)Si NPs對(duì)斑馬魚的致畸效應(yīng)存在明顯的時(shí)間和劑量依賴性(EC50=449μg/ml),染毒后的斑馬魚胚胎表現(xiàn)出多種畸形現(xiàn)象,包括頭部發(fā)育畸形,心臟畸形,卵黃囊水腫,體軸彎曲,尾部畸形。這些不良反應(yīng)中,以心臟發(fā)育畸形的發(fā)生率最為顯著。(2)Si NPs能顯著地抑制斑馬魚胚胎發(fā)育,主要表現(xiàn)為斑馬魚胚胎孵化率降低(EC50=1297μg/ml)、胚胎出膜時(shí)間延長,幼魚對(duì)卵黃囊吸收速率減慢以及幼魚體長減短。(3)Si NPs對(duì)斑馬魚胚胎存在致死效應(yīng)且具有明顯劑量和時(shí)間依賴性。(LC50=1236μg/ml)。(4)通過基準(zhǔn)劑量法計(jì)算各毒性效應(yīng)的發(fā)生閾值,致畸效應(yīng)的BMDL為2.43μg/ml,抑制孵化效應(yīng)的BMDL為14.79μg/ml,致死效應(yīng)的BMDL為18.62μg/ml。2.Si NPs對(duì)斑馬魚心臟發(fā)育的影響(1)Si NPs能夠延長靜脈竇與動(dòng)脈球間距,擴(kuò)增心包面積,刺激心包水腫發(fā)生率顯著上升,致使斑馬魚心臟畸形的BMDL值為10.19μg/ml。(2)Si NPs導(dǎo)致胚胎心臟功能改變,主要表現(xiàn)為心動(dòng)過速與心率失常。(3)心臟組織切片HE染色結(jié)果顯示,Si NPs暴露可致使心肌細(xì)胞數(shù)量減少,排列異常,心腔面積減少。(4)AO與TUNEL的實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示Si NPs可致使斑馬魚心肌細(xì)胞出現(xiàn)過度凋亡。(5)Si NPs可以刺激細(xì)胞凋亡相關(guān)基因P53,Bax和Caspase-3表達(dá)水平上調(diào)并抑制細(xì)胞增殖相關(guān)基因Bcl-2的表達(dá)水平。結(jié)論1.納米二氧化硅可以導(dǎo)致斑馬魚胚胎及幼體出現(xiàn)發(fā)育畸形,延遲發(fā)育甚至死亡等發(fā)育毒性效應(yīng)。2.納米二氧化硅可以致使斑馬魚心臟靜脈竇-動(dòng)脈球間距增大,圍心包面積擴(kuò)增,同時(shí)還可以改變胚胎心臟功能致使胚胎出現(xiàn)心動(dòng)過速和節(jié)律異常。3.納米二氧化硅可能是通過激活P53基因介導(dǎo)線粒體通路依賴性胚胎細(xì)胞過度凋亡,從而對(duì)胚胎心臟等其他器官發(fā)育形成和功能完善產(chǎn)生不良影響。
【關(guān)鍵詞】：納米二氧化硅 斑馬魚 胚胎發(fā)育 心臟發(fā)育 細(xì)胞凋亡
【學(xué)位授予單位】：鄭州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R114
【目錄】：

• 摘要4-6
• Abstract6-11
• 英文縮略詞表11-13
• 1 引言13-15
• 2 材料與方法15-33
• 2.1 材料15-18
• 2.1.1 斑馬魚與納米二氧化硅15
• 2.1.2 主要實(shí)驗(yàn)試劑15-16
• 2.1.3 主要實(shí)驗(yàn)儀器16-17
• 2.1.4 主要實(shí)驗(yàn)試劑配制17-18
• 2.2 斑馬魚的飼養(yǎng)和胚胎的收集18-19
• 2.2.1 斑馬魚日常喂養(yǎng)18-19
• 2.2.2 魚卵采集19
• 2.3 實(shí)驗(yàn)方法19-33
• 2.3.1 納米二氧化硅的特征測(cè)試19-20
• 2.3.2 納米二氧化硅對(duì)斑馬魚早期發(fā)育影響的毒性作用20-22
• 2.3.3 納米二氧化硅對(duì)斑馬魚心臟發(fā)育的影響22-31
• 2.3.4 數(shù)據(jù)分析處理31-33
• 3 結(jié)果33-59
• 3.1 納米二氧化硅懸液的粒度和穩(wěn)定性測(cè)試結(jié)果33-35
• 3.1.1 在不同幼魚培養(yǎng)液中納米二氧化硅顆粒的粒度和特征測(cè)試結(jié)果33
• 3.1.2 納米二氧化硅分散在E3 中的穩(wěn)定性測(cè)試結(jié)果33-35
• 3.2 納米二氧化硅對(duì)斑馬魚早期胚胎發(fā)育的影響35-47
• 3.2.1 納米二氧化硅對(duì)斑馬魚胚胎的致死作用35-38
• 3.2.2 納米二氧化硅對(duì)斑馬魚胚胎的致畸作用38-42
• 3.2.3 納米二氧化硅對(duì)斑馬魚胚胎延遲發(fā)育的作用42-47
• 3.3 納米二氧化硅對(duì)斑馬魚心臟發(fā)育的影響47-59
• 3.3.1 納米二氧化硅對(duì)斑馬魚心臟發(fā)育的形態(tài)影響47-49
• 3.3.2 納米二氧化硅對(duì)斑馬魚心臟功能的影響49-53
• 3.3.3 斑馬魚心臟組織病理學(xué)特征改變53
• 3.3.4 斑馬魚心肌細(xì)胞凋亡檢測(cè)結(jié)果53-55
• 3.3.5 qRT-PCR檢測(cè)相關(guān)凋亡基因的表達(dá)55-59
• 4 討論59-65
• 5 結(jié)論65-67
• 6 參考文獻(xiàn)67-71
• 綜述71-83
• 參考文獻(xiàn)78-83
• 個(gè)人簡歷 在學(xué)期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文與科研成果83-84
• 致謝84

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 ;Effects of silica nanoparticles on growth and photosynthetic pigment contents of Scenedesmus obliquus[J];Journal of Environmental Sciences;2010年01期

  本文關(guān)鍵詞：納米二氧化硅對(duì)斑馬魚胚胎發(fā)育的毒性，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

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本文編號(hào)：347812