抗凝血滅鼠劑是世界上廣泛使用的一類化學滅鼠劑,但鼠類很容易對其產(chǎn)生抗性�？顾幇谢騐korc1（維生素K環(huán)氧化物還原酶復合體,亞單位1基因）上的突變是鼠類抗性產(chǎn)生的主要機制,也是鼠類抗性檢測的主要分子標記。已有數(shù)據(jù)顯示,我國在用藥30多年后褐家鼠中已經(jīng)出現(xiàn)抗性,2010年湛江種群的抗性率達21.6%。然而,目前關于我國褐家鼠的Vkorc1多態(tài)性的研究都還是空白。另外,雖然Vkorc1突變是鼠類產(chǎn)生殺鼠靈抗性的主要機制,但有研究發(fā)現(xiàn)個別抗性鼠并不攜帶Vkorc1抗性突變,表明還存在其他未知的抗性產(chǎn)生機制�；谝陨蠁栴}和研究現(xiàn)狀,本論文對我國褐家鼠的Vkorc1多態(tài)性進行了大范圍多種群的調(diào)查,并利用實驗室不攜帶Vkorc1抗性突變的敏感鼠探索其他的抗性機制,具體從以下四個方面展開研究:1.重點分析了湛江和哈爾濱2008²015年連續(xù)8年的641只褐家鼠Vkorc1多態(tài)性及其與抗性的相關性。結(jié)果顯示,共存在3種新突變,包括1種氨基酸突變Ala140Thr（頻率為0⁴.0%）和2種同義突變His68His、Leu105Leu;哈爾濱和湛江種群生理抗性... 

【文章來源】：中國農(nóng)業(yè)科學院北京市

【文章頁數(shù)】：91 頁

【學位級別】：博士

【部分圖文】：

抗凝血類滅鼠劑的作用機理

中國農(nóng)業(yè)科學院博士學位論文第一章緒論5將褐家鼠和小家鼠中發(fā)現(xiàn)的12個Vkorc1氨基酸突變嵌入人的VKOR蛋白模型中，結(jié)果顯示除R12W突變外，其余11種都處在結(jié)合口袋周圍（圖1-2B），Ser56位于1/2-螺旋的末端，Trp59、Arg61和Phe63緊隨1/2-螺旋，Glu67位于TM2的開頭，Leu120位于TM3的末端，Leu128位于TM3和TM4之間的腔環(huán)中，Tyr139位于TM4中Thr138-Tyr139-Ala140殺鼠靈結(jié)合基序（motif）的一部分（ROSTetal.,2005）。作者認為第56~67位的氨基酸突變會影響結(jié)合口袋的蓋子，這些氨基酸可能僅用于引導底物（維生素K/殺鼠靈）進入結(jié)合口袋，而第120~139位的氨基酸則位于殺鼠靈與酶的結(jié)合部分，若發(fā)生突變可能會直接降低酶對殺鼠靈的結(jié)合能力（LIetal.,2010），因此由蛋白質(zhì)的C末端部分的120、128和139位氨基酸突變可引起較強的殺鼠靈抗性（圖1-2B）。圖1-2維生素K環(huán)氧化物還原酶（VKOR）的結(jié)構(gòu)。A.基于細菌VKORC1蛋白晶體結(jié)構(gòu)預測的人類VKORC1三維結(jié)構(gòu)。黃色區(qū)域表示人類與細菌同源的4個跨膜區(qū)（TMs），灰色表示僅在細菌里出現(xiàn)的TM，紅色區(qū)域表示預測可能不精確的區(qū)域，藍色表示嚙齒動物中的12個殺鼠靈抗性突變的位置，白色表示結(jié)合底物（KO）。B.基于細菌VKORC1蛋白晶體結(jié)構(gòu)構(gòu)建的人類VKORC1拓撲結(jié)構(gòu)。紅點表示12個殺鼠靈抗性突變的位置。（來自（MüLLERetal.,2014））Figure1-2TheproteinstructureofthevitaminKepoxidereductase(VKOR).A)Insilico3DmodelofhumanVKORbasedonthehomologousbacterialproteinstructure(PDB-3KP9（LIetal.,2010）).Fourtransmembranehelicesofthecoreproteinweredisplayedinyellow.Thepartthatisonlypresentinthebacterialhomologwasshowningrey.Theambiguousregionsbetweenthehumanandbacterialproteinstructurewerehighlig

中國農(nóng)業(yè)科學院博士學位論文第一章緒論9圖1-3抗性相關的Vkorc1基因突變在歐洲褐家鼠種群中的分布情況。（來自（BUCKLEandSMITH,2014））Figure1-3GeographicdistribuitonofwarfarinresistanceVkorc1mutationsinNorwayratpopulationsinEurope(from（BUCKLEandSMITH,2014）)我國學者自1986年開始利用致死期食毒法（LFP）對我國部分地區(qū)的褐家鼠種群進行了抗性程度評估，發(fā)現(xiàn)褐家鼠種群中已出現(xiàn)抗性個體，其中2010年廣東湛江的一個褐家鼠種群的歷史抗性率最高（21.6%）（表1-3）（CONGetal.,2008;董天義,2001）。然而，目前關于我國褐家鼠的Vkorc1多態(tài)性情況還是空白，分析我國褐家鼠抗藥靶基因Vkorc1的多態(tài)性，了解我國褐家鼠抗性的遺傳基礎，是開發(fā)褐家鼠抗性監(jiān)測分子標記的重要內(nèi)容。

【參考文獻】：
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本文編號：3457695