目的:1)研究大氣PM_2.5干擾人臍靜脈內(nèi)皮細胞（HUVECs）自噬的潛在分子機制,為科學評價大氣PM_2.5對人體心血管系統(tǒng)的影響提供理論依據(jù);2)探究大蒜素改善由于大氣PM_2.5干擾HUVECs功能的作用及分子機制,為預防和改善大氣PM_2.5暴露影響人體心血管系統(tǒng)的健康提供新的思路和策略。方法:（1）用不同濃度的PM_2.5（1,5,25μg/mL）處理HUVECs后,透射電子顯微鏡（TEM）觀察PM_2.5在細胞中的分布,以及自噬小體的形成;吖啶橙（AO）和單丹磺酰尸胺（MDC）染色觀察酸性小泡;間接免疫熒光法（IF）檢測LC3和p62 puncta水平;Western blot檢測自噬蛋白（LC3 A、LC3 B、Beclin 1、p62、ATG3、ATG7、ATG5、ATG12、STX17）和溶酶體相關蛋白（CTSB、CTSD、LAMP1、LAMP2）的表達;并選擇AKT、ERK1/2、TFEB信號通路來探討其潛在的分子機制。（2）大蒜素（5,10,2... 

【文章來源】：南華大學湖南省

【文章頁數(shù)】：94 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

PM2.5在HUVECs中的分布（×8000）

TEM下HUVECs的自噬小體（×8000）

27LC3AII、ATG3、ATG7、ATG5、ATG12的表達水平，與對照組相比，PM2.5組呈劑量依賴性地增加了Beclin1、LC3BII/I、LC3AII/I、ATG3、ATG7、ATG5、ATG12的表達水平（圖3.3和3.4，P<0.05,P<0.01），進一步證實了PM2.5暴露組細胞內(nèi)自噬泡數(shù)增加。圖3.3PM2.5對HUVECs自噬相關蛋白Beclin1、LC3B、LC3A表達的影響A：IF檢測LC3puncta的表達水平（400×）；B：Beclin1、LC3B、LC3A蛋白的表達；C-E：分別為Beclin1、LC3BII/I、LC3AII/I相對表達水平。（與陰性對照組比較，*:P<0.05，**:P<0.01，n=3）Figure3.3TheeffectofPM2.5ontheexpressionofautophagy-relatedproteins,Beclin1,LC3BandLC3AinHUVECsA:TheexpressionlevelsofLC3byindirectimmunofluorescence（400×）;B:ThelevelsofBeclin1,LC3B,LC3Aproteinexpression;C-E:Therelativeexpressionof(Beclin1,LC3BII/I,LC3AII/I,respectively).（*:P<0.05,**:P<0.01vsnegativecontrolgroup,n=3）

【參考文獻】：
期刊論文
[1]《中國心血管病報告2018》要點介紹[J]. 馬麗媛,吳亞哲,陳偉偉.  中華高血壓雜志. 2019(08)
[2]Role of AMPK in atherosclerosis via autophagy regulation[J]. Hanxiao Ou,Chuhao Liu,Wenjie Feng,Xinwen Xiao,Shengsong Tang,Zhongcheng Mo.  Science China（Life Sciences）. 2018(10)
[3]The effects of autophagy on vascular endothelial cells induced by airborne PM2.5[J]. Zhixiang Zhou,Tong Shao,Mengnan Qin,Xiaoyan Miao,Yu Chang,Wang Sheng,Fengshang Wu,Yunjiang Yu.  Journal of Environmental Sciences. 2018(04)

碩士論文
[1]PM2.5致人臍靜脈內(nèi)皮細胞氧化損傷及白藜蘆醇的干預效應研究[D]. 李利忠.中國人民解放軍軍事醫(yī)學科學院 2016



本文編號：3455002