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大氣PM 2.5 干擾內(nèi)皮細(xì)胞自噬及大蒜素的改善作用機(jī)制

發(fā)布時(shí)間:2021-10-24 09:06
  目的:1)研究大氣PM2.5干擾人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVECs)自噬的潛在分子機(jī)制,為科學(xué)評(píng)價(jià)大氣PM2.5對(duì)人體心血管系統(tǒng)的影響提供理論依據(jù);2)探究大蒜素改善由于大氣PM2.5干擾HUVECs功能的作用及分子機(jī)制,為預(yù)防和改善大氣PM2.5暴露影響人體心血管系統(tǒng)的健康提供新的思路和策略。方法:(1)用不同濃度的PM2.5(1,5,25μg/mL)處理HUVECs后,透射電子顯微鏡(TEM)觀察PM2.5在細(xì)胞中的分布,以及自噬小體的形成;吖啶橙(AO)和單丹磺酰尸胺(MDC)染色觀察酸性小泡;間接免疫熒光法(IF)檢測LC3和p62 puncta水平;Western blot檢測自噬蛋白(LC3 A、LC3 B、Beclin 1、p62、ATG3、ATG7、ATG5、ATG12、STX17)和溶酶體相關(guān)蛋白(CTSB、CTSD、LAMP1、LAMP2)的表達(dá);并選擇AKT、ERK1/2、TFEB信號(hào)通路來探討其潛在的分子機(jī)制。(2)大蒜素(5,10,2... 

【文章來源】:南華大學(xué)湖南省

【文章頁數(shù)】:94 頁

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

大氣PM 2.5 干擾內(nèi)皮細(xì)胞自噬及大蒜素的改善作用機(jī)制


PM2.5在HUVECs中的分布(×8000)

大氣PM 2.5 干擾內(nèi)皮細(xì)胞自噬及大蒜素的改善作用機(jī)制


TEM下HUVECs的自噬小體(×8000)

相關(guān)蛋白,依賴性,劑量,蛋白


27LC3AII、ATG3、ATG7、ATG5、ATG12的表達(dá)水平,與對(duì)照組相比,PM2.5組呈劑量依賴性地增加了Beclin1、LC3BII/I、LC3AII/I、ATG3、ATG7、ATG5、ATG12的表達(dá)水平(圖3.3和3.4,P<0.05,P<0.01),進(jìn)一步證實(shí)了PM2.5暴露組細(xì)胞內(nèi)自噬泡數(shù)增加。圖3.3PM2.5對(duì)HUVECs自噬相關(guān)蛋白Beclin1、LC3B、LC3A表達(dá)的影響A:IF檢測LC3puncta的表達(dá)水平(400×);B:Beclin1、LC3B、LC3A蛋白的表達(dá);C-E:分別為Beclin1、LC3BII/I、LC3AII/I相對(duì)表達(dá)水平。(與陰性對(duì)照組比較,*:P<0.05,**:P<0.01,n=3)Figure3.3TheeffectofPM2.5ontheexpressionofautophagy-relatedproteins,Beclin1,LC3BandLC3AinHUVECsA:TheexpressionlevelsofLC3byindirectimmunofluorescence(400×);B:ThelevelsofBeclin1,LC3B,LC3Aproteinexpression;C-E:Therelativeexpressionof(Beclin1,LC3BII/I,LC3AII/I,respectively).(*:P<0.05,**:P<0.01vsnegativecontrolgroup,n=3)

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]《中國心血管病報(bào)告2018》要點(diǎn)介紹[J]. 馬麗媛,吳亞哲,陳偉偉.  中華高血壓雜志. 2019(08)
[2]Role of AMPK in atherosclerosis via autophagy regulation[J]. Hanxiao Ou,Chuhao Liu,Wenjie Feng,Xinwen Xiao,Shengsong Tang,Zhongcheng Mo.  Science China(Life Sciences). 2018(10)
[3]The effects of autophagy on vascular endothelial cells induced by airborne PM2.5[J]. Zhixiang Zhou,Tong Shao,Mengnan Qin,Xiaoyan Miao,Yu Chang,Wang Sheng,Fengshang Wu,Yunjiang Yu.  Journal of Environmental Sciences. 2018(04)

碩士論文
[1]PM2.5致人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞氧化損傷及白藜蘆醇的干預(yù)效應(yīng)研究[D]. 李利忠.中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院 2016



本文編號(hào):3455002

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