重金屬鎘對(duì)酪氨酸酶的作用及機(jī)制研究
發(fā)布時(shí)間:2021-10-08 02:49
目的和意義鎘是一種在自然界中分布廣泛,且容易通過(guò)食物、水和空氣污染被人體和動(dòng)物吸收的毒素,它在人體內(nèi)沒(méi)有已知的必要的功能,但明顯傾向于通過(guò)長(zhǎng)期暴露在生物體內(nèi)積累而導(dǎo)致蓄積毒性作用。目前電鍍、采礦、冶煉等廢水的排放是鎘污染的主要來(lái)源。未經(jīng)嚴(yán)格處理的鎘廢水,易通過(guò)食物、水等途徑進(jìn)入人體,長(zhǎng)期在體內(nèi)積累,引起人體慢性中毒,對(duì)人體各系統(tǒng)產(chǎn)生毒性作用,嚴(yán)重威脅人體健康。在以往的報(bào)道中,研究者們通過(guò)流行病學(xué)、體內(nèi)和體外實(shí)驗(yàn)等研究方法深入探索了重金屬鎘對(duì)人體各組織和器官的危害作用及機(jī)制。研究者們證實(shí)鎘對(duì)人體的毒性作用主要是腎毒性和骨骼毒性,還包括肝臟毒性、肺毒性、遺傳毒性、胃腸毒性、神經(jīng)毒性、致癌毒性及生殖毒性等。此外,重金屬鎘對(duì)人體各種生物酶的毒性作用及機(jī)制也一直是研究者們探究的熱點(diǎn),如對(duì)氧磷酶1、α-葡萄糖苷酶、人尿嘧啶DNA糖基化酶、堿性磷酸酶、乙酰膽堿酯酶、抗氧化酶等。然而,關(guān)于重金屬鎘對(duì)酪氨酸酶的作用和機(jī)制尚不清楚。酪氨酸酶在動(dòng)物黑色素的形成過(guò)程中具有重要作用,與皮膚色素沉著性疾病有密切關(guān)系。本研究通過(guò)探索二價(jià)鎘對(duì)酪氨酸酶的作用及機(jī)制有助于擴(kuò)展重金屬鎘對(duì)人體作用的認(rèn)識(shí),為酪氨酸酶相關(guān)疾病的...
【文章來(lái)源】:南方醫(yī)科大學(xué)廣東省
【文章頁(yè)數(shù)】:69 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
圖3-2.酶活力v與酶濃度改變曲線圖
3.4?Cd2+對(duì)酪氨酸酶作用的時(shí)間過(guò)程分析??我們還進(jìn)行了時(shí)間過(guò)程分析,以研宄在不同Cd2+濃度情況下對(duì)酪氨酸酶抑??制作用的時(shí)間動(dòng)力學(xué)(圖3-4?A)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,Cd2+對(duì)酪氨酸酶作用的催化??速率有迅速下降和隨著時(shí)間推移逐步下降兩個(gè)階段:第一個(gè)階段為從天然酶活??性狀態(tài)到檢測(cè)時(shí)間點(diǎn)lmin之前,這一階段出現(xiàn)迅速,以至于我們目前實(shí)驗(yàn)條件??下很難測(cè)量。第二個(gè)階段為檢測(cè)時(shí)間點(diǎn)lmin時(shí)酪氨酸酶活性到平衡狀態(tài)之間,??在此階段,低Cd2+濃度(5-50mM)下顯示出時(shí)間動(dòng)力學(xué)過(guò)程。我們觀察到在最??高鎘濃度(100mM)時(shí)第二階段過(guò)程中催化速率沒(méi)有發(fā)生顯著動(dòng)力學(xué)改變。隨??后將低劑量Cd2+對(duì)酪氨酸酶作用的時(shí)間過(guò)程進(jìn)行半對(duì)數(shù)圖分析,結(jié)果顯示,所??有半對(duì)數(shù)圖均為直線,說(shuō)明在第二個(gè)階段期間Cd2+誘導(dǎo)單相滅活過(guò)程(圖3-4??B-D),這個(gè)結(jié)果也表明滅活過(guò)程遵循一級(jí)反應(yīng)。評(píng)估的速率常數(shù)表3-1顯示,??滅活率具有相同的數(shù)量級(jí),隨著Cd2+劑量增加而滅活率稍微下降,在大劑量Cd2+??的半對(duì)數(shù)時(shí)間過(guò)程圖中
Cd2+誘導(dǎo)賂氨酸酶內(nèi)源熒光變化。(A)、(B)、(C)內(nèi)源熒光變化酪氨酸酶混勻在25T:下孵育2小時(shí),曲線標(biāo)簽1表示天然酪氨酸酶熒?Cd2+的濃度分別為?ImM,5mM,?10mM,20mM,?50mM,?100mM。變化情況。實(shí)驗(yàn)條件與(A)?—致。(E)最大波峰值變化情況。(F)?雙倒數(shù)圖。FQ表示天然酶最大熒光強(qiáng)度,F表示Cd2+存在條件下最大
本文編號(hào):3423279
【文章來(lái)源】:南方醫(yī)科大學(xué)廣東省
【文章頁(yè)數(shù)】:69 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
圖3-2.酶活力v與酶濃度改變曲線圖
3.4?Cd2+對(duì)酪氨酸酶作用的時(shí)間過(guò)程分析??我們還進(jìn)行了時(shí)間過(guò)程分析,以研宄在不同Cd2+濃度情況下對(duì)酪氨酸酶抑??制作用的時(shí)間動(dòng)力學(xué)(圖3-4?A)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,Cd2+對(duì)酪氨酸酶作用的催化??速率有迅速下降和隨著時(shí)間推移逐步下降兩個(gè)階段:第一個(gè)階段為從天然酶活??性狀態(tài)到檢測(cè)時(shí)間點(diǎn)lmin之前,這一階段出現(xiàn)迅速,以至于我們目前實(shí)驗(yàn)條件??下很難測(cè)量。第二個(gè)階段為檢測(cè)時(shí)間點(diǎn)lmin時(shí)酪氨酸酶活性到平衡狀態(tài)之間,??在此階段,低Cd2+濃度(5-50mM)下顯示出時(shí)間動(dòng)力學(xué)過(guò)程。我們觀察到在最??高鎘濃度(100mM)時(shí)第二階段過(guò)程中催化速率沒(méi)有發(fā)生顯著動(dòng)力學(xué)改變。隨??后將低劑量Cd2+對(duì)酪氨酸酶作用的時(shí)間過(guò)程進(jìn)行半對(duì)數(shù)圖分析,結(jié)果顯示,所??有半對(duì)數(shù)圖均為直線,說(shuō)明在第二個(gè)階段期間Cd2+誘導(dǎo)單相滅活過(guò)程(圖3-4??B-D),這個(gè)結(jié)果也表明滅活過(guò)程遵循一級(jí)反應(yīng)。評(píng)估的速率常數(shù)表3-1顯示,??滅活率具有相同的數(shù)量級(jí),隨著Cd2+劑量增加而滅活率稍微下降,在大劑量Cd2+??的半對(duì)數(shù)時(shí)間過(guò)程圖中
Cd2+誘導(dǎo)賂氨酸酶內(nèi)源熒光變化。(A)、(B)、(C)內(nèi)源熒光變化酪氨酸酶混勻在25T:下孵育2小時(shí),曲線標(biāo)簽1表示天然酪氨酸酶熒?Cd2+的濃度分別為?ImM,5mM,?10mM,20mM,?50mM,?100mM。變化情況。實(shí)驗(yàn)條件與(A)?—致。(E)最大波峰值變化情況。(F)?雙倒數(shù)圖。FQ表示天然酶最大熒光強(qiáng)度,F表示Cd2+存在條件下最大
本文編號(hào):3423279
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