發(fā)布時間：2021-08-08 17:28

　　目的:本實驗運用硫酸鈹（Be SO4）染毒人支氣管上皮細胞16HBE構(gòu)建體外細胞模型,并用內(nèi)源性硫化氫（H2S）供體硫氫化鈉（Na HS）和肺組織中內(nèi)源性H2S合成酶胱硫醚-γ-裂解酶（CSE）抑制劑DL-炔丙基甘氨酸（PPG）對16HBE細胞進行干預,觀察Be SO4對16HBE細胞的損傷作用,闡明內(nèi)源性H2S對Be SO4致16HBE細胞損傷的保護作用并探討其作用機制。方法:常規(guī)培養(yǎng)人支氣管上皮細胞（16HBE）,用不同濃度的Be SO4處理細胞。采用MTT法檢測細胞活性;采用H2S供體Na HS預處理細胞6h增加內(nèi)源性H2S的量;使用CSE抑制劑PPG預處理細胞6h抑制CSE的表達,減少內(nèi)源性H2S的量,隨后用Be SO4處理細胞,采用熒光探針DCFH-DA檢測細胞內(nèi)的ROS水平,用硫代巴比妥酸法（TBA）檢測細胞內(nèi)丙二醛（MDA）水平,檢測細胞內(nèi)超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-PX）活性,免疫組化法檢測8-羥基脫氧鳥苷（8-OHDG）和3硝基酪氨酸（3-NT）,免疫蛋白印跡法檢測檢測胱硫醚-γ-裂解酶（CSE）、磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）、總Akt（t... 

【文章來源】：南華大學湖南省

【文章頁數(shù)】：68 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

不同濃度的BeSO4處理16HBE細胞后細胞活力的檢測*#P＜0.05VS對照組

不同濃度的BeSO4處理16HBE細胞后對細胞內(nèi)的ROS水平進行檢測*P＜0.05VS對照組

0 μM NaHS、10 mM PPG 預處理細胞 6h，150 μM BeSO4處理細胞 48h 檢測H2S 水平；*P＜0.05 VS 對照組，#P＜0.05 VS BeSO4組源性硫化氫對 BeSO4致細胞氧化應激水平的影響 300 μM NaHS、10 mM PPG 預處理細胞 6h，隨后用 150 μM Be8h，檢測細胞 ROS、MDA 水平及 SOD、GSH-PX 活力。與對照組O4處理過后的 16HBE 細胞中的 ROS 及 MDA 含量均增高，差異均(P<0.05)；與 BeSO4組比較，NaHS 干預后降低了 16HBE 細胞內(nèi)A 含量，差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；然而用 PPG 干預后，16HOS 及 MDA 含量均上升，差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。并且在處理的兩組中，與 NaHS 的干預相比，PPG 的干預能夠使細胞內(nèi)量均增高，差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；NaHS 和 PPG 單獨干

【參考文獻】：
期刊論文
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碩士論文
[1]硫化氫對敵敵畏中毒急性肺損傷大鼠肺組織中SP-A、B、C的影響[D]. 韓婧.南華大學 2014
[2]內(nèi)源性硫化氫對硫酸鈹致大鼠肺損傷的保護作用及其PI3K/Akt依賴機制[D]. 廖永紅.南華大學 2014



本文編號：3330373