目的:本實(shí)驗(yàn)運(yùn)用硫酸鈹（Be SO4）染毒人支氣管上皮細(xì)胞16HBE構(gòu)建體外細(xì)胞模型,并用內(nèi)源性硫化氫（H2S）供體硫氫化鈉（Na HS）和肺組織中內(nèi)源性H2S合成酶胱硫醚-γ-裂解酶（CSE）抑制劑DL-炔丙基甘氨酸（PPG）對(duì)16HBE細(xì)胞進(jìn)行干預(yù),觀察Be SO4對(duì)16HBE細(xì)胞的損傷作用,闡明內(nèi)源性H2S對(duì)Be SO4致16HBE細(xì)胞損傷的保護(hù)作用并探討其作用機(jī)制。方法:常規(guī)培養(yǎng)人支氣管上皮細(xì)胞（16HBE）,用不同濃度的Be SO4處理細(xì)胞。采用MTT法檢測(cè)細(xì)胞活性;采用H2S供體Na HS預(yù)處理細(xì)胞6h增加內(nèi)源性H2S的量;使用CSE抑制劑PPG預(yù)處理細(xì)胞6h抑制CSE的表達(dá),減少內(nèi)源性H2S的量,隨后用Be SO4處理細(xì)胞,采用熒光探針DCFH-DA檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的ROS水平,用硫代巴比妥酸法（TBA）檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)丙二醛（MDA）水平,檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-PX）活性,免疫組化法檢測(cè)8-羥基脫氧鳥苷（8-OHDG）和3硝基酪氨酸（3-NT）,免疫蛋白印跡法檢測(cè)檢測(cè)胱硫醚-γ-裂解酶（CSE）、磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）、總Akt（t... 

【文章來源】：南華大學(xué)湖南省

【文章頁數(shù)】：68 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

不同濃度的BeSO4處理16HBE細(xì)胞后細(xì)胞活力的檢測(cè)*#P＜0.05VS對(duì)照組

不同濃度的BeSO4處理16HBE細(xì)胞后對(duì)細(xì)胞內(nèi)的ROS水平進(jìn)行檢測(cè)*P＜0.05VS對(duì)照組

0 μM NaHS、10 mM PPG 預(yù)處理細(xì)胞 6h，150 μM BeSO4處理細(xì)胞 48h 檢測(cè)H2S 水平；*P＜0.05 VS 對(duì)照組，#P＜0.05 VS BeSO4組源性硫化氫對(duì) BeSO4致細(xì)胞氧化應(yīng)激水平的影響 300 μM NaHS、10 mM PPG 預(yù)處理細(xì)胞 6h，隨后用 150 μM Be8h，檢測(cè)細(xì)胞 ROS、MDA 水平及 SOD、GSH-PX 活力。與對(duì)照組O4處理過后的 16HBE 細(xì)胞中的 ROS 及 MDA 含量均增高，差異均(P<0.05)；與 BeSO4組比較，NaHS 干預(yù)后降低了 16HBE 細(xì)胞內(nèi)A 含量，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；然而用 PPG 干預(yù)后，16HOS 及 MDA 含量均上升，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。并且在處理的兩組中，與 NaHS 的干預(yù)相比，PPG 的干預(yù)能夠使細(xì)胞內(nèi)量均增高，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；NaHS 和 PPG 單獨(dú)干

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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碩士論文
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本文編號(hào)：3330373