目的:從細(xì)胞水平,探討與驗(yàn)證Foxp3基因啟動(dòng)子區(qū)甲基化在砷對(duì)人淋巴細(xì)胞免疫調(diào)節(jié)作用中的影響,并進(jìn)行針對(duì)性干預(yù),以期為砷中毒機(jī)制的完善、尋找可靠的干預(yù)措施提供科學(xué)依據(jù)。方法:（1）染毒試驗(yàn):密度梯度法分離培養(yǎng)健康成人外周血淋巴細(xì)胞,用0.00、5.00、10.00、20.00、30.00、40.00μmol/L的亞砷酸鈉（Sodium arsenite,NaAsO₂）染毒24 h,MTT比色法檢測(cè)細(xì)胞相對(duì)存活率,HE染色鑒定染毒模型;實(shí)時(shí)熒光定量（RT-qPCR）檢測(cè)叉頭轉(zhuǎn)錄因子3（forkhead/winged helix transcription factor,Foxp3）,DNA甲基轉(zhuǎn)移酶1（DNA methltransferases1,DNMT1）mRNA的轉(zhuǎn)錄水平;免疫印跡法（Western blot）檢測(cè)Foxp3、DNMT1的蛋白表達(dá)水平。亞硫酸氫鹽（BisμLfite sequencing,BSP）測(cè)序法檢測(cè)Foxp3基因啟動(dòng)子區(qū)域甲基化狀態(tài),流式細(xì)胞分析儀檢測(cè)調(diào)節(jié)性T細(xì)胞（regμLatory T cell,Treg）占CD4⁺

【文章來(lái)源】：貴州醫(yī)科大學(xué)貴州省

【文章頁(yè)數(shù)】：62 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

外周血單個(gè)核細(xì)胞的細(xì)胞層分離

圖 2-2 總 RNA 凝膠電泳圖Fig.2-2 Total RNAgel electrophoresis figureR 反應(yīng)曲線，溶解曲線-4 可知，內(nèi)參基因和 Foxp3 基因擴(kuò)增曲線，證明所有基因的擴(kuò)增為特異性，無(wú)引物圖 2-3 GADPH 基因?qū)崟r(shí)熒光定量擴(kuò)增曲線及溶曲線熔解曲線

[注]*：與對(duì)照組相比，P<0.05圖 2-5 NaAsO2染毒對(duì)人淋巴細(xì)胞 Foxp3 mRNA 轉(zhuǎn)錄表達(dá)的影響5 Transcriptional expression levels of Foxp3 gene in lymphocytes exposed to NaAsO2NaAsO2染毒對(duì)人淋巴細(xì)胞 Foxp3 蛋白表達(dá)的影響圖 2-6 所示，隨著亞砷酸鈉染毒濃度的升高，淋巴細(xì)胞 Foxp3 蛋白表達(dá)水降趨勢(shì)（rFoxp3蛋白表達(dá)水平=－0.945，P<0.05）；與對(duì)照組相比，各染毒組 的蛋白表達(dá)水平均降低，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]輔助性T細(xì)胞-17與調(diào)節(jié)性T細(xì)胞在燃煤污染型砷中毒患者外周血中的比例變化及意義[J]. 夏仕青,方曉琳,朱凱,董令,鄒忠蘭,劉永蓮,王大朋,張愛華.  中華地方病學(xué)雜志. 2019 (02)
[2]燃煤污染型砷中毒患者外周血Foxp3、TGF-β1、IL-2的表達(dá)差異及意義[J]. 方曉琳,夏仕青,朱凱,董令,鄒忠蘭,劉永蓮,王大朋,張愛華.  中華地方病學(xué)雜志. 2019 (02)
[3]貴州燃煤污染型地方性砷中毒研究進(jìn)展與展望[J]. 張愛華,姚茂琳.  貴州醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào). 2018(10)
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[5]Chailing decoction induced immune tolerance of mice in heart transplantation[J]. 張友滿.  China Medical Abstracts（Internal Medicine）. 2018(01)
[6]做好地方病消除工作,為我國(guó)實(shí)現(xiàn)全部脫貧目標(biāo)助力[J]. 孫殿軍,高彥輝,劉輝,趙麗軍,裴俊瑞,張微.  中華地方病學(xué)雜志. 2017 (03)
[7]調(diào)節(jié)性T細(xì)胞、輔助性T細(xì)胞-17相關(guān)免疫因子在砷暴露大鼠外周血中的表達(dá)差異及意義[J]. 劉永蓮,張愛華,王大朋,董令,朱凱,王慶陵,鄒忠蘭.  中華地方病學(xué)雜志. 2017 (01)
[8]從免疫學(xué)角度深化認(rèn)識(shí)砷所致全身性損害機(jī)制及其防治策略[J]. 張愛華,王大朋.  中華地方病學(xué)雜志. 2017 (01)
[9]重視地方性砷中毒機(jī)制假說間相互作用,提升機(jī)制研究及其轉(zhuǎn)化應(yīng)用價(jià)值[J]. 張愛華,王大朋.  中華地方病學(xué)雜志. 2016 (01)
[10]重視燃煤污染型地方性砷中毒的防治管理[J]. 安冬.  中華地方病學(xué)雜志. 2015 (01)

碩士論文
[1]5-Aza-CdR對(duì)B-ALL細(xì)胞系NALM-6的作用及其對(duì)miRNA影響的研究[D]. 石懿玉.山西醫(yī)科大學(xué) 2014
[2]系統(tǒng)性紅斑狼瘡CD4+CD25+T細(xì)胞標(biāo)記分子FOXP3啟動(dòng)子區(qū)甲基化水平研究[D]. 董娟.山西醫(yī)科大學(xué) 2010



本文編號(hào)：3280180