目的建立小鼠肺組織中5-羥甲基糠醛（5-HMF）的柱前衍生-超高效液相色譜/高分辨質(zhì)譜（UPLC-HRMS/MS）法。方法小鼠肺組織勻漿樣本經(jīng)甲醇沉淀蛋白和萃取后,經(jīng)2,4-二硝基苯肼（DNPH）衍生化,利用UPLC-HRMS/MS法檢測,內(nèi)標(biāo)法定量。結(jié)果在5μg/L～100μg/L范圍內(nèi),標(biāo)準(zhǔn)曲線線性相關(guān)系數(shù)（r）大于0.99。儀器檢出限（S/N=3）及定量限（S/N=10）分別為0.5μg/L和2.0μg/L。方法檢出限（S/N=3）和定量限（S/N=10）分別為為1.5μg/L和5.0μg/L。不同濃度的基質(zhì)加標(biāo)回收率在99.0%～103.0%之間,相對標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD（n=6）<5%。結(jié)論相比傳統(tǒng)的非衍生化測定方法,5-HMF檢出靈敏度大大提高。本法適用于小鼠肺組織中痕量5-HMF的測定。 

【文章來源】：現(xiàn)代預(yù)防醫(yī)學(xué). 2020,47(21)北大核心

【文章頁數(shù)】：4 頁

【部分圖文】：

5-HMF與2,4-DNPH反應(yīng)過程

圖1 5-HMF與2,4-DNPH反應(yīng)過程衍生化后形成的5-HMF-DNPH仍采用正離子模式檢測,其理論精確質(zhì)量數(shù)為([M+H]+)為m/z 307.0673,實際精確質(zhì)量數(shù)為m/z 307.0672(圖3A),質(zhì)量數(shù)偏差0.3 ppm。為進(jìn)一步確證衍生化后的產(chǎn)物,對5-HMF-DNPH進(jìn)行二級質(zhì)譜檢測,由圖3B可以看出,5-HMF-DNPH的主要碎片離子為脫水形成的m/z 289.0592。其同位素內(nèi)標(biāo)13C 5-HMF-DNPH的一級精確質(zhì)量數(shù)為([M+H]+)為m/z 313.0875,二級主要碎片離子為m/z 295.0795。

衍生化后形成的5-HMF-DNPH仍采用正離子模式檢測,其理論精確質(zhì)量數(shù)為([M+H]+)為m/z 307.0673,實際精確質(zhì)量數(shù)為m/z 307.0672(圖3A),質(zhì)量數(shù)偏差0.3 ppm。為進(jìn)一步確證衍生化后的產(chǎn)物,對5-HMF-DNPH進(jìn)行二級質(zhì)譜檢測,由圖3B可以看出,5-HMF-DNPH的主要碎片離子為脫水形成的m/z 289.0592。其同位素內(nèi)標(biāo)13C 5-HMF-DNPH的一級精確質(zhì)量數(shù)為([M+H]+)為m/z 313.0875,二級主要碎片離子為m/z 295.0795。2.2 線性范圍與檢出限

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]快速篩查中藥注射液中有害物質(zhì)5-羥甲基糠醛的LC-MS/MS方法及其質(zhì)量評價研究[J]. 臧清策,何菁菁,白進(jìn)發(fā),鄭亞杰,張瑞萍,李鐵鋼,王中華,賀玖明,再帕爾·阿不力孜.  藥學(xué)學(xué)報. 2013(11)
[2]5-羥甲基糠醛與不同血清白蛋白的結(jié)合反應(yīng)機(jī)制研究[J]. 郭明,何玲,魯小旺.  藥學(xué)學(xué)報. 2012(03)



本文編號：3245692