本文關(guān)鍵詞：得克隆的類雌激素效應研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：得克隆(Dechlorane Plus,DP)是一種使用量巨大的氯代阻燃劑,廣泛地存在于各種環(huán)境和生物介質(zhì)中,具有生物富集性。目前關(guān)于DP的毒性效應及作用機制研究非常有限,未見其具有內(nèi)分泌干擾效應的研究報道。本課題組前期研究發(fā)現(xiàn),DP可誘導雄性斑馬魚卵黃蛋白酶原(vtg)基因的表達、導致人乳腺癌細胞MCF-7的增殖。本研究按照OECD內(nèi)分泌干擾物第二階段篩選標準,通過體外(in vitro)測試,確定DP的類雌激素效應,并對其可能的分子機制進行初步探討。本研究將為評價DP的生物毒性和生態(tài)風險提供科學依據(jù)。本論文的研究結(jié)果表明,DP能夠誘導MCF-7細胞的增殖,且具有時間-和劑量-效應；雌激素受體(ER)拮抗劑ICI182780能夠顯著性抑制DP引起的MCF-7細胞增殖；DP對MCF-7細胞的周期未見顯著性影響；基因和蛋白的定量分析初步表明,DP可誘導ER及MAPK/ERK通路中靶基因c-myc和c-fos的表達,推測DP可能通過直接干擾受體的合成、ER介導的基因組或非基因組途徑發(fā)揮類雌激素作用。
【關(guān)鍵詞】：得克隆 類雌激素效應 MCF-7細胞 雌激素受體 MAPK/ERK通路
【學位授予單位】：大連海事大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R114
【目錄】：

• 摘要5-6
• ABSTRACT6-9
• 引言9-10
• 第1章 緒論10-23
• 1.1 得克隆的相關(guān)研究10-13
• 1.1.1 得克隆的理化性質(zhì)10-11
• 1.1.2 得克隆的研究進展11-13
• 1.1.3 本課題組關(guān)于DP毒性效應的研究13
• 1.2 環(huán)境雌激素效應的相關(guān)研究13-22
• 1.2.1 環(huán)境雌激素簡介13-14
• 1.2.2 環(huán)境雌激素特點14-15
• 1.2.3 環(huán)境雌激素生物學效應15-17
• 1.2.4 環(huán)境雌激素作用的分子機制17-21
• 1.2.5 環(huán)境雌激素的篩選及其檢測方法21-22
• 1.3 本課題的目的及意義22-23
• 第2章 材料與方法23-41
• 2.1 實驗材料23-24
• 2.1.1 細胞系23
• 2.1.2 得克隆23
• 2.1.3 主要儀器設(shè)備23-24
• 2.2 實驗方法24-40
• 2.2.1 常用試劑24-26
• 2.2.2 MCF-7細胞復蘇、傳代、凍存26-28
• 2.2.3 不同劑量DP暴露對MCF-7細胞增殖的影響28-29
• 2.2.4 DP及拮抗劑ICI182780對MCF-7細胞增殖的時間-及劑量-效應29
• 2.2.5 DP暴露對MCF-7細胞周期的影響29-30
• 2.2.6 目的基因的實時熒光定量PCR檢測30-35
• 2.2.7 ERα和AhR的Western blot檢測35-40
• 2.3 技術(shù)路線40-41
• 第3章 結(jié)果與討論41-61
• 3.1 DP暴露對MCF-7細胞生物學效應研究41-46
• 3.1.1 不同劑量DP暴露對MCF-7細胞增殖影響41-42
• 3.1.2 DP及拮抗劑ICI182780對MCF-7細胞增殖的時間-及劑量-效應42-45
• 3.1.3 DP暴露對MCF-7細胞周期的影響45-46
• 3.2 DP類雌激素作用機制的研究46-61
• 3.2.1 RNA提取、反轉(zhuǎn)錄及質(zhì)量驗證46-50
• 3.2.2 實時熒光定量PCR檢測體系的優(yōu)化50-52
• 3.2.3 DP暴露MCF-7細胞總蛋白的濃度測定及條件優(yōu)化52
• 3.2.4 DP暴露對MCF-7細胞ER及ER介導的基因組途徑研究52-56
• 3.2.5 DP暴露對MCF-7細胞AhR及AhR介導的基因組途徑研究56-58
• 3.2.6 DP類雌激素作用非基因組途徑研究58-61
• 結(jié)論61-62
• 參考文獻62-70
• 附錄A DP暴露對MCF-7細胞周期的影響70-75
• 附錄B DP暴露及拮抗劑ICI182780對MCF-7細胞的影響75-77
• 攻讀學位期間公開發(fā)表論文77-78
• 致謝78-79
• 作者簡介79

【參考文獻】

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本文編號：324288