金針菇（Flammulina velutipes）是一種常見的食用真菌,具有抗氧化、抗腫瘤、免疫調(diào)節(jié)等生物活性。多糖是金針菇最重要的活性物質(zhì)之一。金針菇多糖（Flammulina velutipes polysaccharide,FVP）的免疫調(diào)節(jié)活性已有相關(guān)的研究和報(bào)道,但關(guān)于巨噬細(xì)胞上金針菇多糖的受體的研究卻相對(duì)較少。因此,本研究的目的是使用金針菇多糖（FVP）處理小鼠單核巨噬細(xì)胞RAW264.7,探究RAW264.7細(xì)胞上FVP受體和FVP發(fā)揮免疫調(diào)節(jié)作用的機(jī)制,以期為金針菇多糖免疫調(diào)節(jié)功能的研究提供一定的實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)和理論依據(jù)。研究方法:使用MTT法檢測(cè)FVP對(duì)RAW264.7細(xì)胞活性的影響,中性紅法檢測(cè)FVP對(duì)RAW264.7細(xì)胞吞噬活性的影響,顯微鏡觀察FVP處理后細(xì)胞形態(tài)變化,Griess法檢測(cè)RAW264.7細(xì)胞分泌NO水平,ELISA法檢測(cè)RAW264.7細(xì)胞培養(yǎng)上清中細(xì)胞因子（TNF-α和IL-1β）水平,熒光顯微鏡和流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)RAW264.7細(xì)胞上FVP受體,qPCR法檢測(cè)免疫相關(guān)因子iNOS、TNF-α和IL-1βmRNA以及TLR4和MR mRNA表達(dá)水平,W... 

【文章來(lái)源】：吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)吉林省

【文章頁(yè)數(shù)】：60 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

RAW264.7細(xì)胞總RNA電泳圖

第三章 結(jié)果分析 RAW264.7 細(xì)胞的激活作用 RAW264.7 細(xì)胞無(wú)細(xì)胞毒性圖 3.1 所示，與對(duì)照組相比，1 μg/mL LPS 能夠刺激 RA0%），并具有極顯著差異（p＜0.01）。除 200μg/mLFVP 實(shí)驗(yàn)濃度的 FVP 對(duì) RAW264.7 細(xì)胞無(wú)細(xì)胞毒性，濃度為顯著刺激 RAW264.7 細(xì)胞增殖（111.79%），并具有統(tǒng)計(jì)激效果不如陽(yáng)性對(duì)照組。根據(jù)此實(shí)驗(yàn)結(jié)果，我們選取 12 FVP 進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)。

P 對(duì) RAW264.7 細(xì)胞吞噬活性的影響。與對(duì)照組相比：*表示 P<0.P<0.01，n=3。ffect of FVP on the phagocytosis of RAW264.7 cells. Vergroup：* P<0.05,** P<0.01，n=3.響 RAW264.7 細(xì)胞形態(tài)微鏡觀察結(jié)果見圖 3.3，對(duì)照組的 RAW264.7 細(xì)胞呈圓形狀態(tài)；LPS 和 FVP 處理組細(xì)胞狀態(tài)發(fā)生改變，由圓形變且部分細(xì)胞長(zhǎng)出了偽足。隨著 FVP 濃度逐漸增大，這種組細(xì)胞變化最大。該結(jié)果表明，F(xiàn)VP 可以使正常狀態(tài)下生改變。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]MAPK信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路與慢性牙周炎的相關(guān)研究進(jìn)展[J]. 趙娜,方慧,唐亞平,劉琪.  口腔醫(yī)學(xué)研究. 2017(09)
[2]中藥對(duì)一氧化氮合酶/一氧化氮系統(tǒng)調(diào)節(jié)作用的研究進(jìn)展[J]. 韓雨薇,張媛媛,賴秀英,劉晗,寇俊萍.  中國(guó)藥科大學(xué)學(xué)報(bào). 2017(01)
[3]免疫抑制劑對(duì)酵母聚糖誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞Dectin-1、Toll樣受體2及腫瘤壞死因子-α表達(dá)的影響[J]. 毛亞男,王雯,王東,張波.  中國(guó)現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志. 2016(21)
[4]多糖的免疫調(diào)節(jié)作用研究進(jìn)展[J]. 張典,高興春,姜鳳良,彌曼.  中國(guó)老年學(xué)雜志. 2016(21)
[5]Dectin-1受體信號(hào)通路研究進(jìn)展[J]. 陳朝豐,于波,胡小平.  皮膚性病診療學(xué)雜志. 2016(05)
[6]MAPK/ERK信號(hào)傳導(dǎo)通路與腫瘤發(fā)生的相關(guān)機(jī)制研究進(jìn)展[J]. 劉偉,黃瑋,李瑞琴.  中國(guó)現(xiàn)代醫(yī)藥雜志. 2016(08)
[7]多糖的免疫調(diào)節(jié)作用及多糖藥物的研究進(jìn)展[J]. 李婧文,周長(zhǎng)林.  中國(guó)生化藥物雜志. 2016(04)
[8]Toll樣受體4在免疫相關(guān)細(xì)胞中的作用[J]. 黃蓉,吳青,李茂軍,鄒福蘭,駱娟,梁小明,陳昌輝.  中華臨床醫(yī)師雜志(電子版). 2016(08)
[9]慈菇多糖通過mTOR信號(hào)通路提高巨噬細(xì)胞功能[J]. 陳潔,吳小南,楊雪帆,黃芳.  中國(guó)公共衛(wèi)生. 2016(12)
[10]黑木耳多糖提取工藝優(yōu)化及其對(duì)小鼠巨噬細(xì)胞功能的影響[J]. 許海林,吳小勇,聶少平,黃延盛,唐青濤.  食品科學(xué). 2016(10)

碩士論文
[1]五種食用菌不同提取物的免疫活性比較及理化特性分析[D]. 姜玥.合肥工業(yè)大學(xué) 2013



本文編號(hào)：3226090