[背景]砷暴露可致人皮膚病變,砷所致的DNA甲基化改變是其主要的致病機制之一,但砷如何引起DNA甲基化改變目前尚未明確。[目的]本研究以永生化的人皮膚角質(zhì)形成細(xì)胞（HaCaT）為研究對象,檢測亞砷酸鈉（NaAsO₂）暴露對HaCaT細(xì)胞DNA甲基轉(zhuǎn)移酶（DNMTs）m RNA和蛋白表達(dá)水平的影響,并探討砷所致氧化應(yīng)激與其所致DNMTs mRNA和蛋白表達(dá)水平改變之間的關(guān)聯(lián)。[方法]給予HaCaT細(xì)胞不同濃度的NaAsO₂(0、0.625、1.25、2.50μmol·L^-1)處理,干預(yù)組給予10.0μmol·L^-1抗氧化劑N-乙酰半胱氨酸（NAC）預(yù)處理4 h后加入2.50μmol·L^-1 NaAsO₂,染毒時間為72 h。應(yīng)用免疫熒光法檢測細(xì)胞活性氧（ROS）含量,生化法檢測細(xì)胞內(nèi)丙二醛（MDA）含量,實時熒光定量PCR法檢測細(xì)胞DNMT1、DNMT3a和DNMT3b mRNA水平,Western blotting法檢測DNMTs蛋白水平。[結(jié)果]不同濃度... 

【文章來源】：環(huán)境與職業(yè)醫(yī)學(xué). 2020,37(03)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：6 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 主要試劑和儀器
    1.2 細(xì)胞培養(yǎng)與染毒
        1.2.1 細(xì)胞培養(yǎng)
        1.2.2 染毒濃度選擇
    1.3 NAC抗氧化處理
    1.4 ROS檢測
    1.5 MDA檢測
    1.6 RT-PCR法檢測DNMTs mRNA表達(dá)
    1.7 Western blotting檢測DNMTs蛋白表達(dá)
    1.8 統(tǒng)計學(xué)分析
2 結(jié)果
    2.1 NaAsO2的毒性效應(yīng)
        2.1.1 ROS
        2.1.2 MDA
        2.1.3 DNMTs基因m RNA
        2.1.4 DNMTs蛋白
    2.2 NAC的干預(yù)效應(yīng)
        2.2.1 ROS
        2.2.2 MDA
        2.2.3 DNMTs基因mRNA及蛋白
3 討論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]DNA甲基化基因DNMT1的研究進(jìn)展[J]. 黃滔,周興路,毛曦軻,蘇天宇,陳晨晨,吳志浩.  現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學(xué). 2019(14)
[2]砷致氧化損傷與p53和p16基因啟動子區(qū)甲基化的關(guān)聯(lián)研究[J]. 韓雪,馬璐,李軍,黃曉欣,張愛華.  環(huán)境與健康雜志. 2017(07)
[3]抗氧化劑對砷誘導(dǎo)人膀胱上皮細(xì)胞氧化應(yīng)激相關(guān)通路的影響[J]. 王惠惠,朱佳玉,陳鋒,孫貴范,席淑華.  環(huán)境與健康雜志. 2016(03)
[4]砷對DNA甲基化影響的研究進(jìn)展[J]. 張潔,木曉麗,王曉雪,黃清育,田美平,劉良坡,申河清.  環(huán)境與健康雜志. 2014(03)



本文編號：3162208