本文關(guān)鍵詞：Ⅰ組mGluR在氟砷聯(lián)合染毒致海馬神經(jīng)元突觸可塑性損傷中的調(diào)控作用，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的本研究探討氟砷聯(lián)合染毒對(duì)原代培養(yǎng)海馬神經(jīng)元生長(zhǎng)、突觸可塑性的影響,從Ⅰ組代謝型谷氨酸受體蛋白表達(dá)水平探討氟砷聯(lián)合暴露損害學(xué)習(xí)記憶的分子機(jī)制,為地方性氟砷聯(lián)合中毒的防治提供理論依據(jù)。方法1原代培養(yǎng)的新生SD大鼠海馬神經(jīng)元分別暴露于0.00、0.10、0.20、0.40、0.80μg/ml氟化鈉和0.00、0.05、0.10、0.20、0.40μg/ml亞砷酸鈉,染毒24h。采用倒置顯微鏡和掃描電鏡觀察海馬神經(jīng)元形態(tài)變化,CCK8檢測(cè)試劑盒檢測(cè)細(xì)胞活性,LDH檢測(cè)試劑盒檢測(cè)細(xì)胞培養(yǎng)上清液中的乳酸脫氫酶(lactate dehydrtogenase,LDH)活力,Annexin V-FITC凋亡檢測(cè)試劑盒檢測(cè)細(xì)胞凋亡率,Western-blot方法檢測(cè)海馬神經(jīng)元中SYN和GAP-43蛋白的表達(dá)水平。2原代培養(yǎng)的新生SD大鼠海馬神經(jīng)元在氟砷聯(lián)合染毒(0.40μg/ml氟化鈉+0.10μg/ml亞砷酸鈉)的同時(shí)分別給予三種谷氨酸受體抑制劑D-AP5(NMDAR抑制劑)、LY367385(m Glu R1抑制劑)、MPEP(m Glu R5抑制劑)進(jìn)行干預(yù),作用24h。采用CCK8檢測(cè)試劑盒檢測(cè)細(xì)胞活性,Western-blot方法檢測(cè)海馬神經(jīng)元中NR2B、m Glu R1α、m Glu R5及突觸相關(guān)蛋白SYN、GAP-43的蛋白表達(dá)水平。結(jié)果1氟染毒組和砷染毒組大鼠原代培養(yǎng)海馬神經(jīng)元的細(xì)胞存活率、神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)豐富型神經(jīng)元的構(gòu)成比隨著氟化鈉和亞砷酸鈉染毒濃度的增加而逐漸降低。2氟染毒組和砷染毒組大鼠原代培養(yǎng)海馬神經(jīng)元的細(xì)胞凋亡率、細(xì)胞培養(yǎng)上清液中的LDH活力隨著氟化鈉和亞砷酸鈉染毒濃度的增加而逐漸升高。3氟染毒組大鼠原代培養(yǎng)海馬神經(jīng)元中SYN蛋白的表達(dá)水平隨著氟化鈉染毒濃度的增加先升高后降低;而GAP-43蛋白的表達(dá)水平隨著氟化鈉染毒濃度的增加逐漸降低。4砷染毒組大鼠原代培養(yǎng)海馬神經(jīng)元中SYN和GAP-43蛋白的表達(dá)水平隨著亞砷酸鈉染毒濃度的增加而逐漸降低。5與空白對(duì)照組比較,氟砷聯(lián)合染毒組和不同濃度的三種谷氨酸受體抑制劑組(D-AP5組、LY367385組、MPEP組)大鼠原代培養(yǎng)海馬神經(jīng)元的細(xì)胞存活率和相應(yīng)谷氨酸受體蛋白(NR2B、m Glu R1α、m Glu R5)的表達(dá)水平均顯著下降(P0.05);與氟砷聯(lián)合染毒組比較,不同濃度的三種谷氨酸受體抑制劑組大鼠原代培養(yǎng)海馬神經(jīng)元的細(xì)胞存活率和相應(yīng)谷氨酸受體蛋白(NR2B、m Glu R1α、m Glu R5)的表達(dá)水平升高(P0.05)。且隨著谷氨酸受體抑制劑濃度的增加細(xì)胞存活率和相應(yīng)蛋白表達(dá)水平依次升高。6與空白對(duì)照組比較,氟砷聯(lián)合染毒組、50μM D-AP5組、25μM LY367385組、20μM MPEP組海馬神經(jīng)元中SYN和GAP-43的蛋白表達(dá)水平均顯著下降(P0.01);與氟砷聯(lián)合染毒組比較,50μM D-AP5組、25μM LY367385組、20μM MPEP組海馬神經(jīng)元中SYN和GAP-43的蛋白表達(dá)水平均顯著升高(P0.05)。結(jié)論1氟、砷染毒可降低原代培養(yǎng)海馬神經(jīng)元的生存活性、LDH活力,誘導(dǎo)原代培養(yǎng)海馬神經(jīng)元凋亡,并通過(guò)降低SYN和GAP-43蛋白表達(dá)而損傷其突觸可塑性。2三種谷氨酸受體抑制劑均可緩解氟砷聯(lián)合染毒對(duì)海馬神經(jīng)元生存活性的降低;氟砷聯(lián)合染毒所致的原代培養(yǎng)海馬神經(jīng)元突觸可塑性損傷是通過(guò)降低Ⅰ組代謝性谷氨酸受體的表達(dá)來(lái)調(diào)控的,Ⅰ組m Glu R的表達(dá)水平降低可引起其下游的突觸相關(guān)蛋白SYN和GAP-43表達(dá)水平降低,繼而造成海馬神經(jīng)元突觸可塑性性損傷。
【關(guān)鍵詞】：氟 砷 氟砷聯(lián)合染毒 突觸可塑性 代謝型谷氨酸受體 學(xué)習(xí)記憶
【學(xué)位授予單位】：華北理工大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類(lèi)號(hào)】：R114
【目錄】：

• 摘要4-6
• Abstract6-10
• 英文縮略表10-11
• 引言11-13
• 第1章 氟和砷對(duì)原代培養(yǎng)海馬神經(jīng)元突觸可塑性的影響13-38
• 1.1 材料與方法14-23
• 1.1.1 材料14-19
• 1.1.2 方法19-23
• 1.2 結(jié)果23-33
• 1.2.1 海馬神經(jīng)元純度的檢測(cè)結(jié)果23
• 1.2.2 海馬神經(jīng)元的形態(tài)學(xué)觀察結(jié)果23-26
• 1.2.3 海馬神經(jīng)元的細(xì)胞活性測(cè)定結(jié)果26-27
• 1.2.4 海馬神經(jīng)元培養(yǎng)上清液中LDH活力的檢測(cè)結(jié)果27-29
• 1.2.5 海馬神經(jīng)元凋亡率的比較29-31
• 1.2.6 海馬神經(jīng)元SYN和GAP-43蛋白表達(dá)水平的測(cè)定結(jié)果31-33
• 1.3 討論33-35
• 1.3.1 氟染毒對(duì)原代培養(yǎng)海馬神經(jīng)元的影響33-34
• 1.3.2 砷染毒對(duì)原代培養(yǎng)海馬神經(jīng)元的影響34-35
• 1.4 小結(jié)35
• 參考文獻(xiàn)35-38
• 第2章 Ⅰ組mGluR在氟砷聯(lián)合染毒致海馬神經(jīng)元突觸可塑性損傷中的調(diào)控作用38-58
• 2.1 材料與方法39-47
• 2.1.1 材料39-44
• 2.1.2 方法44-47
• 2.2 結(jié)果47-52
• 2.2.1 各組細(xì)胞存活率測(cè)定結(jié)果47-48
• 2.2.2 三種谷氨酸受體抑制劑組海馬神經(jīng)元中的相應(yīng)受體表達(dá)水平48-51
• 2.2.3 三種谷氨酸受體抑制劑組海馬神經(jīng)元中SYN和GAP-43的蛋白表達(dá)水平51-52
• 2.3 討論52-54
• 2.4 小結(jié)54-55
• 參考文獻(xiàn)55-58
• 第3章 綜述 突觸可塑性相關(guān)蛋白的研究進(jìn)展突觸可塑性相關(guān)蛋白的研究進(jìn)展58-68
• 3.1 突觸素59-61
• 3.1.1 突觸素概述59
• 3.1.2 突觸素與突觸可塑性59-61
• 3.2 生長(zhǎng)相關(guān)蛋白-4361-62
• 3.2.1 生長(zhǎng)相關(guān)蛋白-43概述61
• 3.2.2 生長(zhǎng)相關(guān)蛋白-43與突觸可塑性61-62
• 3.3 突觸后致密蛋白-9562-64
• 3.3.1 突觸后致密蛋白-95概述62-63
• 3.3.2 突觸后致密蛋白-95與突觸可塑性63-64
• 參考文獻(xiàn)64-68
• 結(jié)論68-69
• 致謝69-70
• 導(dǎo)師簡(jiǎn)介70-71
• 作者簡(jiǎn)介71-72
• 學(xué)位論文數(shù)據(jù)集72

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前4條

1 廖敏,劉能保,張敏海,李宏蓮,劉少純,劉向前,張偉;慢性捆綁應(yīng)激致大鼠學(xué)習(xí)記憶受損及海馬神經(jīng)元突觸素和突觸后致密物95表達(dá)的變化[J];華中科技大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2003年04期

2 張琳;劉廣義;;骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞移植在腦缺血損傷中的作用與生長(zhǎng)相關(guān)蛋白-43表達(dá)的相關(guān)性[J];中國(guó)康復(fù);2011年03期

3 何雨;楊春榮;宋世洋;;血管性癡呆大鼠PSD-95變化機(jī)制的研究[J];中國(guó)老年學(xué)雜志;2009年20期

4 樊留博;王韻;馬利中;;腦缺血后生長(zhǎng)相關(guān)蛋白43基因表達(dá)的變化與腦缺血后神經(jīng)再生的關(guān)系[J];中華中醫(yī)藥學(xué)刊;2011年10期

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本文編號(hào)：311211