[目的]1.分析砷暴露職業(yè)工人尿中砷化合物含量,評價砷暴露職業(yè)工人機體砷負荷;2.檢測PANDAR基因表達;砷暴露工人對DNA甲基化的影響,分析PANDAR基因表達與三種尿砷化合物含量之間的關系;3.檢測不同濃度砷暴露對細胞NEAT1基因表達及其甲基化的影響;砷代謝產(chǎn)物對NEAT1基因表達的變化;加入甲基供體后NEAT1基因表達的改變。[方法]1.采用整群抽樣的方法,抽取某砒霜廠砷暴露職業(yè)工人作為暴露組,同時設置對照組,采集其尿液樣本和外周血液樣本;2.用HG-coldtrap-AAS法測定iAs、MMA、DMA三種砷化合物含量,計算TiAs、iAs%、MMA%、DMA%、PMI、SMI等砷甲基化指標,砷暴露對職業(yè)工人PANDAR基因表達的影響;3.用離心柱法提取外周血液基因組DNA,使用甲基化敏感性高分辨溶解曲線方法檢測職業(yè)工人砷暴露對PANDAR基因甲基化的影響;4.實時熒光定量檢測不同濃度砷暴露對細胞NEAT1基因表達及其甲基化的影響,及職業(yè)工人外周血中淋巴細胞的PANDAR基因表達;5.采用t檢驗及非參數(shù)檢驗方法,分析職業(yè)工人砷暴露對PANDAR表達、DNA損傷及甲基化的影響,... 

【文章來源】：昆明醫(yī)科大學云南省

【文章頁數(shù)】：64 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

PANDAR基因DNA前1.Skb區(qū)域分析結果，存在1個CG區(qū)域，藍色填涂區(qū)域

３．９?ＤＮＡ損傷??ＤＮＡ損傷會導致ＤＮＡ聚合酶功能受損和增加編碼錯誤［３８，３９１。ＤＮＡ損傷檢??測使用實時熒光定量的方法，其引物的設計在ＰＡＮＤＡＲ基因的外顯子上和ｐ－ａｃｔｉｎ??（表１１），用ＡＣＴ值表示其ＤＮＡ損傷的水平，ＡＣｔ＝Ｃｔｉ－Ｃｔｏ，其中Ｃｔｉ為ＰＡＮＤＡＲ??基因的外顯子ＣＴ值，Ｃｔｏ為ｐ－ａｃｔｉｎ的ＣＴ值。???表１１?ＤＮＡ損傷引物基本信息???１丨物名稱?引物序列?擴増產(chǎn)物（ｂｐ）??ＰＡＮＤＡＲ?上游：ＡＴＴＣＴＴＴＣＡＧＧＡＡＴＧＣＣＧＣＡＧＡＴ?７１??弓丨物＊?下游：ＴＣＴＴＴＡＣＣＡＡＴＴＣＡＴＣＣＴＧＧＣＴＣＴＧ??ｐ－ａｃｔｉｎ?引物上游：ＣＧＧＧＡＡＡＴＣＧＴＧＣＧＴＧＡＣＡＴ?１８３???下游：ＧＡＡＧＧＡＡＧＧＣＴＧＧＡＡＧＡＧＴＧ．???３．１０細胞培養(yǎng)??

ＭＭＡ％?１９．０７（１０．８６－?２６．４６）＊＊?８．７７（６．０４－?１２．５４）??ＤＭＡ％?６４．３６（３０．２２－８１．５７）＊＊?８２．４７（６４．５２－８９．８１）??ＰＭＩ?８６．２８（５６．２８－９４．９４）＊＊?９０．２７（７３．４０－９８．３０）??ＳＭＩ?７６．４６（６２．１０－８８．２２）＊?＊?９０．４９（８５．５７－９３．５１）??＊與對照組相比較，ｐ＜０．０５；?＊＊與對照組相比較，ｐ＜０．０１??３？外周血中ＰＡＮＤＡＲ基因表達以及ＤＮＡ甲基化??采用ｔ檢驗進行兩組間的比較，暴露組中其外周血液中ＰＡＮＤＡＲ基因表達于對照組，其差異具有統(tǒng)計學意義（ｐ＜０．０５）；暴露組中外周血ＤＮＡ損傷水高于對照組，差異具有統(tǒng)計學意義（ｐ＜０．０５）；兩組之間，其ＤＮＡ的甲基化無差異。（圖２）??＊?＊??

【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：3040950