發(fā)布時間：2021-01-19 19:26

　　隨著納米科技的迅速發(fā)展,納米材料被廣泛應(yīng)用于很多領(lǐng)域。納米鎳是一種具有高水平表面能量、高磁性、低熔點、低燃點和高表面積的新特性產(chǎn)品,因此其在催化劑、傳感器和電子應(yīng)用等現(xiàn)代工業(yè)中得到廣泛應(yīng)用。然而,納米鎳對接觸者的潛在危害也得到廣泛關(guān)注。納米顆粒的尺寸效應(yīng)使它們能夠容易地運送到生物系統(tǒng)中,從而引發(fā)了它們對易感系統(tǒng)的影響。因此,納米鎳對環(huán)境和人體健康影響的科學(xué)研究勢在必行。男性生殖健康已經(jīng)成為目前環(huán)境污染引發(fā)的重要問題之一,越來越引起人們的重視,也是目前毒理學(xué)研究熱點之一。長鏈非編碼RNA（long non-coding RNA,lncRNA）是一類長度一般超過200個核苷酸并且不翻譯成蛋白質(zhì)的RNA轉(zhuǎn)錄物,一度被認(rèn)為是轉(zhuǎn)錄“噪音”。但越來越多的研究表明lncRNA在許多生物過程中發(fā)揮重要作用,包括細(xì)胞分化,細(xì)胞命運,增殖和凋亡。我們前期研究發(fā)現(xiàn),納米鎳對大鼠和模式生物秀麗隱桿線蟲均具有生殖毒性,尤其對雄性大鼠生殖細(xì)胞具有明顯損害。進(jìn)一步研究顯示納米鎳可通過誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡產(chǎn)生生殖細(xì)胞損害。但迄今為止,納米粒子引發(fā)生殖細(xì)胞損傷機(jī)制并不明確,在此過程中涉及的關(guān)鍵分子事件尚未得到探索。因此,本課題... 

【文章來源】：東南大學(xué)江蘇省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：90 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

納米鎳的表征（A:SEM圖；B:TEM圖；C：5μg/ml納米鎳粒徑分布圖；D：12.5μg/ml納米鎳粒徑分布

支持細(xì)胞的胞質(zhì)變多，折光性較之前下降，并與生精細(xì)胞建立連接；48 h 后（圖2.1D）細(xì)胞間隙變小，支持細(xì)胞的胞質(zhì)逐漸鋪展開來，生精細(xì)胞貼附于支持細(xì)胞上生長；培養(yǎng) 72h 后（圖 2.1E），支持細(xì)胞完全鋪展開，細(xì)胞之間相互連接，成單層膜狀，圓形的生精細(xì)胞大小不同，細(xì)胞折光性持續(xù)下降。圖 2.1 大鼠生精-支持共培養(yǎng)細(xì)胞形態(tài)（200×）（A：0 h；B：12 h；C:24 h；D：48 h；E：72 h）2.2 Feulgen 染色法鑒定大鼠生精-支持共培養(yǎng)細(xì)胞結(jié)果結(jié)果如圖 2.2 所示，支持細(xì)胞的胞體較大且形狀不規(guī)則，胞核呈橢圓形，胞質(zhì)呈網(wǎng)狀，支持細(xì)胞核仁區(qū)著色較淡，細(xì)胞核內(nèi)可以看到深紫色雙極小體；圓形或卵圓形的生精細(xì)胞胞核大但胞質(zhì)少，生精細(xì)胞的細(xì)胞核占據(jù)細(xì)胞體積的約 90%。（圖中箭頭）。

圖 2.2 Feulgen 染色法鑒定生精-支持細(xì)胞（200×）3 討論本實驗建立的大鼠睪丸生精-支持細(xì)胞共培養(yǎng)體系是在參考季佳佳[27]的方法基礎(chǔ)上進(jìn)行改進(jìn)的，共培養(yǎng)期間，生精細(xì)胞不需添加生長因子就能夠貼附于支持細(xì)胞層上生長，并長期共生。大鼠睪丸生精-支持共培養(yǎng)細(xì)胞模型的建立為體外研究生殖毒性提供了良好的細(xì)胞模型。據(jù)文獻(xiàn)[26]介紹的生精細(xì)胞和支持細(xì)胞的鑒定方法，支持細(xì)胞特殊性在可以觀察到細(xì)胞核內(nèi)的雙極小體。運用 Feulgen 染色法，對生精細(xì)胞和支持細(xì)胞進(jìn)行鑒定。結(jié)果顯示：支持細(xì)胞的胞體較大且形狀不規(guī)則，胞核呈橢圓形，胞質(zhì)呈網(wǎng)狀，支持細(xì)胞核仁區(qū)著色較淡，細(xì)胞核內(nèi)可以看到深紫色雙極��；圓形或卵圓形的生精細(xì)胞胞核大但胞質(zhì)少，生精細(xì)胞的細(xì)胞核占據(jù)細(xì)胞體積的約 90%，在共培養(yǎng)體系中，生精細(xì)胞主要包括精母和精子細(xì)胞，二者體積差異較大，其中大于 15 μm 為精母細(xì)胞，而初級精母大多大于 20 μm。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]細(xì)胞凋亡通路研究進(jìn)展[J]. 趙彥超,顧耘.  現(xiàn)代醫(yī)學(xué). 2013(04)

碩士論文
[1]納米銀誘導(dǎo)氧化應(yīng)激及其毒性機(jī)制研究[D]. 張幫勇.東南大學(xué) 2016
[2]ROS在硫酸鎳誘導(dǎo)大鼠睪丸間質(zhì)細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激和線粒體凋亡通路中的作用[D]. 孫銥釩.蘭州大學(xué) 2016
[3]二硫化碳對共培養(yǎng)大鼠睪丸支持—生精細(xì)胞凋亡和凋亡相關(guān)蛋白表達(dá)的影響[D]. 季佳佳.華中科技大學(xué) 2008



本文編號：2987577