目的:1.探討麥芽酚鋁暴露對大鼠皮質(zhì)神經(jīng)元細胞miR-29a、miR-29b1、BACE1和Aβ1-42表達的影響;2.通過建立高表達miR-29a或miR-29b1的細胞模型,進一步探討miR-29a和miR-29b1在鋁致Aβ沉積過程中對BACE1表達的調(diào)控機制。3.通過對神經(jīng)元細胞體外干預實驗,探討NF-κB在鋁致miR-29a和miR-29b1異常表達中的作用。方法:1.取新生24 h內(nèi)的SD大鼠乳鼠的皮質(zhì)進行原代神經(jīng)元培養(yǎng),培養(yǎng)至第三天時加入10μmol/L的阿糖胞苷,應用免疫組化法檢測神經(jīng)元特異性表達蛋白Neuron-specific classⅢβ–Tublin的表達來進行神經(jīng)元純度檢測。應用不同濃度麥芽酚鋁染毒大鼠皮質(zhì)神經(jīng)元細胞,劑量分別為空白對照組（0μmol/L）、低劑量組（20μmol/L）、中劑量組（40μmol/L）、高劑量組（80μmol/L）4組,繼續(xù)培養(yǎng)24 h收集細胞和細胞上液,RT-PCR檢測miR-29a、miR-29b1、BACE1 mRNA表達水平,ELISA法檢測BACE1蛋白、Aβ1-42含量。2.采用慢病毒感染實驗方法將外源性的miR-2... 

【文章來源】：山西醫(yī)科大學山西省

【文章頁數(shù)】：78 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
英文摘要
常用縮寫詞中英文對照表
前言
第一部分 miR-29a/b1在鋁致大鼠皮質(zhì)神經(jīng)元Aβ沉積中對BACE1表達的調(diào)控作用
    1 材料與方法
        1.1 實驗材料
        1.2 實驗方法
        1.3 統(tǒng)計方法
    2 結(jié)果
        2.1 大鼠皮質(zhì)神經(jīng)元細胞的鑒定及純度檢測
        2.2 大鼠皮質(zhì)神經(jīng)元細胞活力及存活率結(jié)果
        2.3 不同濃度麥芽酚鋁染毒 24h后對大鼠皮質(zhì)神經(jīng)元細胞miR-29a和miR-29b1表達的影響
        2.4 不同濃度麥芽酚鋁染毒 24h后對大鼠皮質(zhì)神經(jīng)元細胞BACE1基因和BACE1蛋白表達的影響
        2.5 不同濃度麥芽酚鋁染毒 24h后對大鼠皮質(zhì)神經(jīng)元細胞Aβ1-42的影響
        2.6 不同MOI條件下慢病毒感染皮質(zhì)神經(jīng)元細胞熒光強度表達情況
        2.7 大鼠皮質(zhì)神經(jīng)元細胞轉(zhuǎn)染miR-29a后各指標變化
        2.8 大鼠皮質(zhì)神經(jīng)元細胞轉(zhuǎn)染mi R-29b1后各指標變化
    3 討論
第二部分 miR-29a、miR-29b1在HEK293細胞中對BACE1表達的調(diào)控機制
    1 材料與方法
        1.1 實驗材料
        1.2 實驗方法
        1.3 統(tǒng)計方法
    2 結(jié)果
        2.1 HEK293細胞體外轉(zhuǎn)染miR-29a和miR-29b1后轉(zhuǎn)染效率檢測
        2.2 麥芽酚鋁染毒后各組細胞光學下形態(tài)
        2.3 各組細胞活力檢測結(jié)果
        2.4 HEK293細胞不同濃度麥芽酚鋁單獨染毒后miR-29a和miR-29b1表達變化
        2.5 HEK293細胞轉(zhuǎn)染miR-29a前后各指標變化
        2.6 HEK293細胞轉(zhuǎn)染miR-29b1前后各指標變化
    3 討論
第三部分 NF-κB在鋁致大鼠皮質(zhì)神經(jīng)元miR-29a和miR-29b1異常表達中的作用研究
    1 材料與方法
        1.1 實驗材料
        1.2 實驗方法
        1.3 統(tǒng)計方法
    2 結(jié)果
        2.1 大鼠皮質(zhì)神經(jīng)元干預實驗后對各組細胞存活率的影響
        2.2 各組mi R-29a和miR-29b1表達結(jié)果
        2.3 各組BACE1基因和BACE1蛋白表達結(jié)果
        2.4 各組Aβ1-42表達結(jié)果
    3 討論
結(jié)論
參考文獻
綜述
    參考文獻
致謝
在學期間承擔/參與的科研課題與研究成果
個人簡歷


【參考文獻】：
期刊論文
[1]鋁對大鼠腦內(nèi)Aβ蓄積及α-分泌酶各亞型表達變化的影響[J]. 王林平,王靜,石櫻桃,張玲,牛僑.  毒理學雜志. 2013(05)
[2]微小RNA-29a在卵巢中的調(diào)控作用[J]. 李瑩,楊曉葵.  中國優(yōu)生與遺傳雜志. 2013(08)
[3]人β-防御素4基因在HEK293細胞中的轉(zhuǎn)染表達[J]. 曹玉紅,成勝權(quán),張光運,錢新宏,李如英,丁翠玲.  醫(yī)學研究生學報. 2012(10)
[4]鋁對PC12細胞淀粉樣前體蛋白β位點裂解酶-1蛋白及基因表達的影響[J]. 李偉慶,葛翠翠,賈志建,梁瑞峰,牛僑.  環(huán)境與職業(yè)醫(yī)學. 2012(04)
[5]麥芽酚鋁暴露對大鼠神經(jīng)行為的影響[J]. 梁瑞峰,李偉慶,牛僑.  環(huán)境與健康雜志. 2011(04)
[6]DNA聚合酶iota在HEK-293細胞中高表達體系的建立[J]. 周虎傳,楊勁,曾益軍,位全芳,何鳳田,趙謙,李勁,劉洋,李杰.  現(xiàn)代生物醫(yī)學進展. 2008(07)
[7]鋁電解工神經(jīng)行為、自主神經(jīng)功能的改變[J]. 何淑嫦,張愛民,牛僑,王生,陳藝蘭.  衛(wèi)生研究. 2003(03)
[8]電解鋁工人神經(jīng)行為功能的改變及其機理探討[J]. 郭智勇,朱啟星,胡傳來,余秋月.  中國公共衛(wèi)生. 2002(03)
[9]腦內(nèi)NF-κB及其病理生理學意義[J]. 楊志華.  國外醫(yī)學(生理、病理科學與臨床分冊). 2000(06)
[10]鋁對人體健康的影響[J]. 董錦平,陳濤,鄒公偉,畢樹平.  環(huán)境監(jiān)測管理與技術(shù). 1998(05)

博士論文
[1]microRNA-210通過靶向NF-κB1負性調(diào)節(jié)LPS誘導的炎癥反應[D]. 祁建妮.山東大學 2012

碩士論文
[1]hIL-10基因瞬時轉(zhuǎn)染HEK293細胞介導的免疫學效應研究[D]. 馬靜.吉林大學 2007



本文編號：2946107