目的:1.探討麥芽酚鋁暴露對(duì)大鼠皮質(zhì)神經(jīng)元細(xì)胞miR-29a、miR-29b1、BACE1和Aβ1-42表達(dá)的影響;2.通過(guò)建立高表達(dá)miR-29a或miR-29b1的細(xì)胞模型,進(jìn)一步探討miR-29a和miR-29b1在鋁致Aβ沉積過(guò)程中對(duì)BACE1表達(dá)的調(diào)控機(jī)制。3.通過(guò)對(duì)神經(jīng)元細(xì)胞體外干預(yù)實(shí)驗(yàn),探討NF-κB在鋁致miR-29a和miR-29b1異常表達(dá)中的作用。方法:1.取新生24 h內(nèi)的SD大鼠乳鼠的皮質(zhì)進(jìn)行原代神經(jīng)元培養(yǎng),培養(yǎng)至第三天時(shí)加入10μmol/L的阿糖胞苷,應(yīng)用免疫組化法檢測(cè)神經(jīng)元特異性表達(dá)蛋白Neuron-specific classⅢβ–Tublin的表達(dá)來(lái)進(jìn)行神經(jīng)元純度檢測(cè)。應(yīng)用不同濃度麥芽酚鋁染毒大鼠皮質(zhì)神經(jīng)元細(xì)胞,劑量分別為空白對(duì)照組（0μmol/L）、低劑量組（20μmol/L）、中劑量組（40μmol/L）、高劑量組（80μmol/L）4組,繼續(xù)培養(yǎng)24 h收集細(xì)胞和細(xì)胞上液,RT-PCR檢測(cè)miR-29a、miR-29b1、BACE1 mRNA表達(dá)水平,ELISA法檢測(cè)BACE1蛋白、Aβ1-42含量。2.采用慢病毒感染實(shí)驗(yàn)方法將外源性的miR-2... 

【文章來(lái)源】：山西醫(yī)科大學(xué)山西省

【文章頁(yè)數(shù)】：78 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
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前言
第一部分 miR-29a/b1在鋁致大鼠皮質(zhì)神經(jīng)元Aβ沉積中對(duì)BACE1表達(dá)的調(diào)控作用
    1 材料與方法
        1.1 實(shí)驗(yàn)材料
        1.2 實(shí)驗(yàn)方法
        1.3 統(tǒng)計(jì)方法
    2 結(jié)果
        2.1 大鼠皮質(zhì)神經(jīng)元細(xì)胞的鑒定及純度檢測(cè)
        2.2 大鼠皮質(zhì)神經(jīng)元細(xì)胞活力及存活率結(jié)果
        2.3 不同濃度麥芽酚鋁染毒 24h后對(duì)大鼠皮質(zhì)神經(jīng)元細(xì)胞miR-29a和miR-29b1表達(dá)的影響
        2.4 不同濃度麥芽酚鋁染毒 24h后對(duì)大鼠皮質(zhì)神經(jīng)元細(xì)胞BACE1基因和BACE1蛋白表達(dá)的影響
        2.5 不同濃度麥芽酚鋁染毒 24h后對(duì)大鼠皮質(zhì)神經(jīng)元細(xì)胞Aβ1-42的影響
        2.6 不同MOI條件下慢病毒感染皮質(zhì)神經(jīng)元細(xì)胞熒光強(qiáng)度表達(dá)情況
        2.7 大鼠皮質(zhì)神經(jīng)元細(xì)胞轉(zhuǎn)染miR-29a后各指標(biāo)變化
        2.8 大鼠皮質(zhì)神經(jīng)元細(xì)胞轉(zhuǎn)染mi R-29b1后各指標(biāo)變化
    3 討論
第二部分 miR-29a、miR-29b1在HEK293細(xì)胞中對(duì)BACE1表達(dá)的調(diào)控機(jī)制
    1 材料與方法
        1.1 實(shí)驗(yàn)材料
        1.2 實(shí)驗(yàn)方法
        1.3 統(tǒng)計(jì)方法
    2 結(jié)果
        2.1 HEK293細(xì)胞體外轉(zhuǎn)染miR-29a和miR-29b1后轉(zhuǎn)染效率檢測(cè)
        2.2 麥芽酚鋁染毒后各組細(xì)胞光學(xué)下形態(tài)
        2.3 各組細(xì)胞活力檢測(cè)結(jié)果
        2.4 HEK293細(xì)胞不同濃度麥芽酚鋁單獨(dú)染毒后miR-29a和miR-29b1表達(dá)變化
        2.5 HEK293細(xì)胞轉(zhuǎn)染miR-29a前后各指標(biāo)變化
        2.6 HEK293細(xì)胞轉(zhuǎn)染miR-29b1前后各指標(biāo)變化
    3 討論
第三部分 NF-κB在鋁致大鼠皮質(zhì)神經(jīng)元miR-29a和miR-29b1異常表達(dá)中的作用研究
    1 材料與方法
        1.1 實(shí)驗(yàn)材料
        1.2 實(shí)驗(yàn)方法
        1.3 統(tǒng)計(jì)方法
    2 結(jié)果
        2.1 大鼠皮質(zhì)神經(jīng)元干預(yù)實(shí)驗(yàn)后對(duì)各組細(xì)胞存活率的影響
        2.2 各組mi R-29a和miR-29b1表達(dá)結(jié)果
        2.3 各組BACE1基因和BACE1蛋白表達(dá)結(jié)果
        2.4 各組Aβ1-42表達(dá)結(jié)果
    3 討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
致謝
在學(xué)期間承擔(dān)/參與的科研課題與研究成果
個(gè)人簡(jiǎn)歷


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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[2]微小RNA-29a在卵巢中的調(diào)控作用[J]. 李瑩,楊曉葵.  中國(guó)優(yōu)生與遺傳雜志. 2013(08)
[3]人β-防御素4基因在HEK293細(xì)胞中的轉(zhuǎn)染表達(dá)[J]. 曹玉紅,成勝權(quán),張光運(yùn),錢新宏,李如英,丁翠玲.  醫(yī)學(xué)研究生學(xué)報(bào). 2012(10)
[4]鋁對(duì)PC12細(xì)胞淀粉樣前體蛋白β位點(diǎn)裂解酶-1蛋白及基因表達(dá)的影響[J]. 李偉慶,葛翠翠,賈志建,梁瑞峰,牛僑.  環(huán)境與職業(yè)醫(yī)學(xué). 2012(04)
[5]麥芽酚鋁暴露對(duì)大鼠神經(jīng)行為的影響[J]. 梁瑞峰,李偉慶,牛僑.  環(huán)境與健康雜志. 2011(04)
[6]DNA聚合酶iota在HEK-293細(xì)胞中高表達(dá)體系的建立[J]. 周虎傳,楊勁,曾益軍,位全芳,何鳳田,趙謙,李勁,劉洋,李杰.  現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展. 2008(07)
[7]鋁電解工神經(jīng)行為、自主神經(jīng)功能的改變[J]. 何淑嫦,張愛(ài)民,牛僑,王生,陳藝蘭.  衛(wèi)生研究. 2003(03)
[8]電解鋁工人神經(jīng)行為功能的改變及其機(jī)理探討[J]. 郭智勇,朱啟星,胡傳來(lái),余秋月.  中國(guó)公共衛(wèi)生. 2002(03)
[9]腦內(nèi)NF-κB及其病理生理學(xué)意義[J]. 楊志華.  國(guó)外醫(yī)學(xué)(生理、病理科學(xué)與臨床分冊(cè)). 2000(06)
[10]鋁對(duì)人體健康的影響[J]. 董錦平,陳濤,鄒公偉,畢樹(shù)平.  環(huán)境監(jiān)測(cè)管理與技術(shù). 1998(05)

博士論文
[1]microRNA-210通過(guò)靶向NF-κB1負(fù)性調(diào)節(jié)LPS誘導(dǎo)的炎癥反應(yīng)[D]. 祁建妮.山東大學(xué) 2012

碩士論文
[1]hIL-10基因瞬時(shí)轉(zhuǎn)染HEK293細(xì)胞介導(dǎo)的免疫學(xué)效應(yīng)研究[D]. 馬靜.吉林大學(xué) 2007



本文編號(hào)：2946107