目的脂肪組織功能紊亂是NCDs發(fā)生發(fā)展的重要誘因。N-3PUFAs可調(diào)節(jié)和改善脂肪組織功能,但新近研究提示DHA和EPA的構(gòu)成比可影響n-3PUFAs的調(diào)節(jié)效應(yīng)。因此本研究以3T3-L1脂肪細(xì)胞為研究對(duì)象,觀察不同DHA/EPA構(gòu)成比在正常及炎癥狀態(tài)下對(duì)脂肪細(xì)胞糖脂代謝,脂肪細(xì)胞因子表達(dá)及分泌的影響,并探究二者構(gòu)成比對(duì)脂肪細(xì)胞關(guān)鍵功能位點(diǎn)PPARγ及其相關(guān)信號(hào)通路的調(diào)節(jié)及影響,研究結(jié)果可為合理攝入膳食n-3PUFAs,防治NCDs提供新的理論依據(jù)。方法誘導(dǎo)3T3-L1前體脂肪細(xì)胞分化為成熟脂肪細(xì)胞,PA構(gòu)建炎癥模型。使用濃度為 100μmol/L,構(gòu)成比為 3:1、1.5:1、1:1、1:1.5、1:3 的 DHA、EPA 混合物分別作用于正常和炎癥狀態(tài)的脂肪細(xì)胞24h，MTT法測定細(xì)胞活力度,葡萄糖氧化酶法測定糖消耗,油紅O染色法鑒別成熟脂肪細(xì)胞并測定TG相對(duì)含量。Real time RT-PCR法測定脂聯(lián)素、TNF-α、MCP-1及PPARγ mRNA相對(duì)表達(dá)水平,Western blot法測定胞內(nèi)脂聯(lián)素、MCP-1、PPARγ、CDK5蛋白表達(dá)及其磷酸化水平,ELISA法測定上清... 

【文章來源】：南方醫(yī)科大學(xué)廣東省

【文章頁數(shù)】：71 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖２－１?Ｒｅａｌ－ｔｉｍｅ?ＰＣＲ熔解曲線??Ｆｉｇ．２－１?Ｍｅｌｔｉｎｇ?ｃｕｒｖｅ?ｏｆ?ｒｅａｌ?

第三章結(jié)果??３．?１?３Ｔ３－Ｌ１前體脂肪細(xì)胞誘導(dǎo)、分化及鑒定??培養(yǎng)３Ｔ３－Ｌ１前體脂肪細(xì)胞（圖３－ｌ－ａ）至接觸抑制，分次加入誘導(dǎo)劑后，細(xì)??胞明顯回縮，體積増大，胞內(nèi)出現(xiàn)脂滴聚集，并逐漸增多，更換全培后２？４ｄ，??分化為成熟脂肪細(xì)胞（圖３－１－ｂ）；油紅０染色鑒定，９０％以上脂肪細(xì)胞內(nèi)含有亮??紅色顆粒，并有部分脂滴聚集成團(tuán)，證明３Ｔ３－Ｌ１前體脂肪細(xì)胞誘導(dǎo)分化成功（圖??３－１－ｃ）。??圖３－１?３Ｔ３－Ｌ１脂肪細(xì)胞誘導(dǎo)分化及鑒定（２００Ｘ?）??Ｆｉｇ．３－１?Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔａｔｉｏｎ?ａｎｄ?ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ?ｏｆ?３Ｔ３－Ｌ１?ａｄｉｐｏｃｙｔｅｓ?（２００Ｘ）??注：ａ：?３Ｔ３－Ｌ１前體脂肪細(xì)胞；ｂ：成熟脂肪細(xì)胞；ｃ：成熟脂肪細(xì)胞油紅Ｏ染色鑒定??２６??

時(shí)設(shè)立ＢＳＡ對(duì)照組，觀察ＤＨＡ／ＥＰＡ構(gòu)成比對(duì)正常狀態(tài)３Ｔ３－Ｌ１前體脂肪細(xì)胞活??力度的影響。通過ＭＴＴ染色法對(duì)３Ｔ３－Ｌ１前體脂肪細(xì)胞的細(xì)胞活力進(jìn)行測定，??結(jié)果如圖３－２所示，脂肪酸濃度為１００ｐｍｏｌ／Ｌ時(shí)，ＥＰＡ／ＤＨＡ構(gòu)成比對(duì)正常狀態(tài)??３Ｔ３－Ｌ１脂肪細(xì)胞的活力無明顯影響。??１５〇ｉ??－１〇°?Ｍ?＾?ｉ?ｒｎｉｆｉ?■?Ａ??ｆ?＿１?：忽■?囊??Ｃｏｎ?３：１?１．５：１?１：１?１：１，５?１：３??圖３－２?ＤＨＡ／ＥＰＡ構(gòu)成比對(duì)細(xì)胞活力度的影響??Ｆｉｇ?３－２?Ｅｆｆｅｃｔｓ?ｏｆ?ＤＨＡ／ＥＰＡ?ｐｒｏｐｏｒｔｉｏｎｓ?ｏｎ?ｃｅｌｌ?ｖｉａｂｉｌｉｔｙ??注：Ｉ±ＳＤ，?ｎ＝６??２７??

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]魚油補(bǔ)充對(duì)中老年人血清多不飽和脂肪酸構(gòu)成脂聯(lián)素水平及抗氧化能力影響的隨機(jī)對(duì)照研究[J]. 宋佳,丁慶,楊波,呂玉珊,歐陽靜儀,毛麗梅.  營養(yǎng)學(xué)報(bào). 2016(02)
[2]魚油補(bǔ)充對(duì)中老年人血脂及炎性因子影響的隨機(jī)對(duì)照研究[J]. 丁慶,宋佳,楊波,呂玉珊,馬麗萍,毛麗梅.  營養(yǎng)學(xué)報(bào). 2015(03)
[3]Emerging role of adipokines as mediators in atherosclerosis[J]. Hanrui Zhang,Jian Cui,Cuihua Zhang,Department of Internal Medicine,Medical Pharmacology and Physiology and Nutritional Sciences,Dalton Cardiovascular Research Center,University of Missouri,Columbia,MO 65211,United States.  World Journal of Cardiology. 2010(11)

博士論文
[1]膳食n-3脂肪酸與2型糖尿病及其它慢性病的關(guān)系及機(jī)理研究[D]. 鄭鉅圣.浙江大學(xué) 2014



本文編號(hào)：2931362