納米氧化辭顆粒通過(guò)擾動(dòng)NRF2信號(hào)通路破壞自噬反應(yīng)引起人角質(zhì)形成細(xì)胞毒性
發(fā)布時(shí)間：2020-12-16 09:00
目的:納米氧化鋅（Zinc oxide nanoparticles,ZnO NPs）廣泛用于化妝品和防曬劑中。越來(lái)越多的證據(jù)表明ZnO NPs會(huì)對(duì)人體皮膚產(chǎn)生不可忽視的有害作用,但是對(duì)ZnO NPs毒性作用的潛在分子機(jī)制仍然知之甚少。先前的研究表明,氧化應(yīng)激和自噬反應(yīng)與ZnO NPs誘導(dǎo)的毒性有關(guān)。核因子-E2相關(guān)因子2（Nuclear factor erythroid-2 related factor 2,NRF2）是細(xì)胞內(nèi)抗氧防御系統(tǒng)的關(guān)鍵核轉(zhuǎn)錄因子。NRF2通路已被認(rèn)為是介導(dǎo)化學(xué)物致皮膚損傷的重要保護(hù)途徑。當(dāng)前的研究旨在探討NRF2介導(dǎo)的抗氧化通路可能參與ZnO NPs致人角質(zhì)形成細(xì)胞毒性的作用。研究方法:1.應(yīng)用透射電鏡技術(shù)觀察ZnO NPs的形狀及粒徑,并利用動(dòng)態(tài)光散射儀檢測(cè)ZnO NPs的流體動(dòng)力學(xué)直徑以及Zeta電位;2.利用CCK-8試劑盒和乳酸脫氫酶LDH試劑盒檢測(cè)ZnO NPs（0-500μM）染毒24小時(shí)HaCaT細(xì)胞的存活率及LDH漏出率,并使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)ZnO NPs對(duì)HaCaT細(xì)胞的活性氧自由基（Reactive oxygen species,ROS）及...
【文章來(lái)源】：中國(guó)醫(yī)科大學(xué)遼寧省
【文章頁(yè)數(shù)】：59 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【部分圖文】：
ZnONPs的平均流體動(dòng)力學(xué)直徑示意圖
中國(guó)醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文93實(shí)驗(yàn)結(jié)果3.1納米氧化鋅的表征利用動(dòng)態(tài)光散射DLS和Zeta電位對(duì)ZnONPs的物理化學(xué)性質(zhì)進(jìn)行了表征。表3.1和圖3.1顯示的是ZnONPs的平均流體動(dòng)力學(xué)直徑為219.71nm，圖3.2顯示ZnONPs的Zeta電位為-15.7mV。表3.1.ZnONPs的動(dòng)態(tài)散射光DLSSampleEff.Diam.(nm)BaselineIndexCountRate(kcps)DataRetained(%)ZnONPs219.718.1544.897.45圖3.1ZnONPs的平均流體動(dòng)力學(xué)直徑示意圖圖3.1為動(dòng)態(tài)散射光DLS檢測(cè)ZnONPs顆粒的平均流體動(dòng)力學(xué)直徑為219.71nm。圖3.2ZnONPs的Zeta電位示意圖圖為動(dòng)態(tài)散射光DLS檢測(cè)ZnONPs顆粒的Zeta電位為-15.7mV。如圖3.3所示，采用透射電子顯微鏡對(duì)本研究中使用的ZnONPs進(jìn)行表征，大
中國(guó)醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文10多數(shù)ZnONPs呈不規(guī)則大小的棒狀形態(tài)，結(jié)果表明，ZnONPs的粒徑在50nm左右。圖3.3ZnONPs的透射電鏡示意圖上圖為透射電鏡TEM檢測(cè)納米顆粒的形狀及粒徑。3.2ZnONPs對(duì)HaCaT細(xì)胞生存率的影響通過(guò)檢測(cè)細(xì)胞存活率和LDH漏出率共同評(píng)估ZnONPs在HaCaT細(xì)胞中的細(xì)胞毒性。將HaCaT細(xì)胞用不同濃度的ZnONPs（0-500μM）處理24小時(shí)。如圖3.4（A）所示，與對(duì)照組相比，隨著ZnONPs濃度升高細(xì)胞的生存力明顯降低，200μMZnONPs處理組細(xì)胞存活率明顯降低至78.7％。如圖3.4（B）所示，在時(shí)效研究中，分別用200和500μMZnONPs處理細(xì)胞2、4、6、12和24小時(shí)。當(dāng)200和500μMZnONPs處理6小時(shí)，細(xì)胞活力沒(méi)有明顯降低。與對(duì)照組相比，暴露于200μMZnONPs的細(xì)胞在24小時(shí)后的存活率顯著降低至80.7%，暴露于500μMZnONPs的細(xì)胞在12小時(shí)后的存活率顯著降低至51.4%。此外，如圖3.4（C、D）所示，在濃度為200μM的ZnONPs處理的細(xì)胞中，LDH漏出量增加至對(duì)照組的4.23倍，對(duì)于經(jīng)200μM和500μMZnONPs處理的HaCaT細(xì)胞，在觀察的24小時(shí)內(nèi)LDH漏出持續(xù)增加。
本文編號(hào)：2919901
【文章來(lái)源】：中國(guó)醫(yī)科大學(xué)遼寧省
【文章頁(yè)數(shù)】：59 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【部分圖文】：
ZnONPs的平均流體動(dòng)力學(xué)直徑示意圖
中國(guó)醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文93實(shí)驗(yàn)結(jié)果3.1納米氧化鋅的表征利用動(dòng)態(tài)光散射DLS和Zeta電位對(duì)ZnONPs的物理化學(xué)性質(zhì)進(jìn)行了表征。表3.1和圖3.1顯示的是ZnONPs的平均流體動(dòng)力學(xué)直徑為219.71nm，圖3.2顯示ZnONPs的Zeta電位為-15.7mV。表3.1.ZnONPs的動(dòng)態(tài)散射光DLSSampleEff.Diam.(nm)BaselineIndexCountRate(kcps)DataRetained(%)ZnONPs219.718.1544.897.45圖3.1ZnONPs的平均流體動(dòng)力學(xué)直徑示意圖圖3.1為動(dòng)態(tài)散射光DLS檢測(cè)ZnONPs顆粒的平均流體動(dòng)力學(xué)直徑為219.71nm。圖3.2ZnONPs的Zeta電位示意圖圖為動(dòng)態(tài)散射光DLS檢測(cè)ZnONPs顆粒的Zeta電位為-15.7mV。如圖3.3所示，采用透射電子顯微鏡對(duì)本研究中使用的ZnONPs進(jìn)行表征，大
中國(guó)醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文10多數(shù)ZnONPs呈不規(guī)則大小的棒狀形態(tài)，結(jié)果表明，ZnONPs的粒徑在50nm左右。圖3.3ZnONPs的透射電鏡示意圖上圖為透射電鏡TEM檢測(cè)納米顆粒的形狀及粒徑。3.2ZnONPs對(duì)HaCaT細(xì)胞生存率的影響通過(guò)檢測(cè)細(xì)胞存活率和LDH漏出率共同評(píng)估ZnONPs在HaCaT細(xì)胞中的細(xì)胞毒性。將HaCaT細(xì)胞用不同濃度的ZnONPs（0-500μM）處理24小時(shí)。如圖3.4（A）所示，與對(duì)照組相比，隨著ZnONPs濃度升高細(xì)胞的生存力明顯降低，200μMZnONPs處理組細(xì)胞存活率明顯降低至78.7％。如圖3.4（B）所示，在時(shí)效研究中，分別用200和500μMZnONPs處理細(xì)胞2、4、6、12和24小時(shí)。當(dāng)200和500μMZnONPs處理6小時(shí)，細(xì)胞活力沒(méi)有明顯降低。與對(duì)照組相比，暴露于200μMZnONPs的細(xì)胞在24小時(shí)后的存活率顯著降低至80.7%，暴露于500μMZnONPs的細(xì)胞在12小時(shí)后的存活率顯著降低至51.4%。此外，如圖3.4（C、D）所示，在濃度為200μM的ZnONPs處理的細(xì)胞中，LDH漏出量增加至對(duì)照組的4.23倍，對(duì)于經(jīng)200μM和500μMZnONPs處理的HaCaT細(xì)胞，在觀察的24小時(shí)內(nèi)LDH漏出持續(xù)增加。
本文編號(hào)：2919901
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