目的本課題通過建立氟染毒大鼠模型,以氟化鈉（NaF）為染毒劑,以N-乙酰半胱氨酸（NAC）為干預(yù)因素,以Nrf2/ARE[核轉(zhuǎn)錄因子NF-E2相關(guān)因子2（Nrf2）/抗氧化反應(yīng)元件（ARE）]信號(hào)通路為靶點(diǎn),探討氟染毒對(duì)大鼠睪丸所致的氧化應(yīng)激和DNA損傷,評(píng)估Nrf2/ARE信號(hào)通路在氟化物的生殖毒性中所起作用及NAC的生殖保護(hù)作用,為氟染毒致雄性生殖損傷的中毒機(jī)制及防治措施提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。方法1.動(dòng)物分組和處理60只4周齡SPF（Specific pathogen free）級(jí)SD雄性大鼠,體重100¹50g。將大鼠隨機(jī)分為生理鹽水組、NaF組、NAC組、NAC+NaF組,對(duì)應(yīng)的受試物及劑量為:0.90%氯化鈉溶液（10ml/kg）、25mg/kg/dNaF、150mg/kg/dNAC和25mg/kg/d NaF+150mg/kg/dNAC,處理時(shí)間為7周。2.生殖相關(guān)指標(biāo)的檢測(cè)計(jì)算睪丸和附睪臟器系數(shù),采用計(jì)算機(jī)輔助精子質(zhì)量分析系統(tǒng)檢測(cè)大鼠精子密度、活動(dòng)率和畸形率,ELISA法檢測(cè)血清睪酮含量,采用HE（Hematoxylin and eosin）染色法觀察生精小... 

【文章來源】：鄭州大學(xué)河南省 211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】：88 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
英文縮略詞表
1 前言
2 材料與方法
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.1.1 主要試劑的配制
        2.1.2 主要儀器與設(shè)備
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組、模型建立及標(biāo)本的收集
        2.2.2 大鼠體重、睪丸和附睪臟器系數(shù)的分析
        2.2.3 精液質(zhì)量參數(shù)的測(cè)定
        2.2.4 大鼠睪丸氟含量的測(cè)定
        2.2.5 酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定（ELISA）法檢測(cè)血清睪酮含量
        2.2.6 大鼠血清氧化應(yīng)激生化指標(biāo)的檢測(cè)
        2.2.7 睪丸組織病理形態(tài)的觀察
        2.2.8 酶聯(lián)免疫吸附（ELISA）法測(cè)定 8-OHdG含量
        2.2.9 免疫組織化學(xué)法測(cè)定睪丸中 8-OHdG的表達(dá)情況
        2.2.10 線性相關(guān)分析氧化應(yīng)激和DNA損傷之間的相關(guān)性
        2.2.11 熒光定量PCR法檢測(cè)大鼠睪丸Nrf2及其下游基因表達(dá)情況
        2.2.12 蛋白質(zhì)印跡法方法檢測(cè)檢測(cè)睪丸Nrf2及其下游蛋白表達(dá)
        2.2.13 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
3 結(jié)果
    3.1 不同組別大鼠體重和主要臟器系數(shù)的比較
    3.2 不同組別大鼠精液質(zhì)量參數(shù)的比較
    3.3 不同組別大鼠睪丸氟含量的比較
    3.4 不同組別大鼠血清睪酮含量的比較
    3.5 不同組別大鼠血清氧化應(yīng)激相關(guān)生化指標(biāo)的比較
    3.6 大鼠睪丸組織病理學(xué)形態(tài)評(píng)價(jià)
    3.7 ELISA法測(cè)定 8-OHdG含量的結(jié)果
    3.8 不同組別大鼠睪丸 8-OHdG免疫組織化學(xué)表達(dá)定位和水平
    3.9 氧化應(yīng)激和DNA損傷的線性相關(guān)分析結(jié)果
    3.10 大鼠睪丸Nrf2及其下游基因的mRNA表達(dá)情況
        3.10.1 聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）的電泳結(jié)果
        3.10.2 熒光定量PCR結(jié)果
    3.11 大鼠睪丸Nrf2及其下游NQO1和HO-1 的蛋白表達(dá)情況
        3.11.1 不同組別大鼠睪丸Nrf2蛋白表達(dá)結(jié)果
        3.11.2 不同組別大鼠睪丸NQO1蛋白和HO-1 蛋白表達(dá)結(jié)果
4 討論
    4.1 氟化物暴露對(duì)雄性生殖系統(tǒng)的危害
    4.2 氟染毒通過氧化應(yīng)激機(jī)制引起DNA損傷和生殖損傷
    4.3 Nrf2/ARE信號(hào)通路在氟染毒致雄性生殖損傷中的作用
    4.4 NAC降低了氟化物誘導(dǎo)的氧化性DNA損傷而保護(hù)雄性生殖系統(tǒng)
    4.5 NAC對(duì)氟染毒大鼠睪丸Nrf2/ARE信號(hào)通路的影響
    4.6 本研究的優(yōu)點(diǎn)和局限性
5 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述 Nrf2-ARE通路介導(dǎo)的抗氧化細(xì)胞保護(hù)作用研究進(jìn)展
    1 Nrf2/ARE信號(hào)通路的分子基礎(chǔ)
    2 Nrf2/ARE信號(hào)通路的作用機(jī)制
    3 氧化應(yīng)激所引起的機(jī)體損傷
    4 Nrf2/ARE信號(hào)通路的抗氧化保護(hù)作用
        4.1 Nrf2-ARE信號(hào)通路的抗炎癥作用
        4.2 Nrf2-ARE信號(hào)通路的抗缺血再灌注損傷作用
        4.3 Nrf2-ARE信號(hào)通路的抗凋亡作用
        4.4 Nrf2-ARE信號(hào)通路與腫瘤的關(guān)系
        4.5 Nrf2-ARE信號(hào)通路的神經(jīng)保護(hù)作用
        4.6 Nrf2-ARE信號(hào)通路的抗動(dòng)脈粥樣硬化的心血管保護(hù)作用
        4.7 Nrf2-ARE信號(hào)通路的抗糖尿病作用
    5 Nrf2-ARE信號(hào)通路的激活劑和抑制劑
    6 小結(jié)
    參考文獻(xiàn)
個(gè)人簡(jiǎn)歷及學(xué)術(shù)論文發(fā)表情況
致謝



本文編號(hào)：2919180