重金屬是主要的環(huán)境污染物,鎳（Ni）、鉻（Cr）和鎘（Cd）是環(huán)境中典型的重金屬成分,可通過消化作用、呼吸作用或皮膚接觸進入人體,誘發(fā)細胞損傷和疾病發(fā)生,尤其是造成肺支氣管的損傷和肺部疾病的發(fā)生。多酚是主要存在于水果、蔬菜、谷物和飲料中的次生代謝物,具有多種生理功能。多年來,人們致力于研究多酚對人體健康的有益影響及預防疾病的功能,絕大部分歸因于其抗氧化、抗炎等生物活性。目前,人們對鎳、鉻和鎘致肺部損傷的機理和分子機制尚未完全明確,尚未找到合適的方法預防重金屬損傷。因此,研究常見的重金屬污染物鎳、鉻和鎘對肺部相關細胞的毒性效應,以及尋找天然多酚類活性物質(zhì)預防和緩解鎳、鉻和鎘造成的損傷具有重要意義。本研究以人支氣管上皮（BEAS-2B）細胞為模型,利用MTT法檢測細胞存活率,反應細胞活力情況;采用DCFH-DA熒光探針實驗檢測活性氧（ROS）水平,反應細胞的氧化應激情況;利用Hoechst33258實驗檢測細胞核內(nèi)DNA熒光強度,反應細胞凋亡情況;使用羅丹明123染色實驗檢測細胞中線粒體膜電位變化,反應凋亡的發(fā)生;使用Real-Time PCR檢測細胞內(nèi)炎癥相關因子（TNF-α、IL-6、... 

【文章來源】：遼寧大學遼寧省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：80 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

本課題整體研究路線

第2章NiCl2誘導肺支氣管上皮細胞損傷以及白藜蘆醇的保護作用18圖2-1NiCl2抑制BEAS-2B細胞存活。與對照細胞相比，*P<0.05,**P<0.01.Fig2-1NiCl2inhibitedBEAS-2Bcellsurvival.*P<0.05,**P<0.01comparedwithcontrolgroup.2.3.1.2NiCl2對BEAS-2B細胞ROS產(chǎn)生的影響細胞遭受重金屬刺激時，體內(nèi)高活性分子如ROS產(chǎn)生過多，超過正常水平的ROS會破壞生物體內(nèi)氧化劑與抗氧化能力之間的平衡，導致對重要分子的廣泛破壞，從而導致氧化應激。如圖2-2所示，用0.2，0.4，0.8mMNiCl2處理BEAS-2B細胞24h，發(fā)現(xiàn)對照組探針無熒光，與對照組相比，隨著NiCl2濃度的升高，細胞內(nèi)的熒光強度明顯增強，分別升高了2.03倍，4.30倍和6.61倍，并且具有劑量依賴性關系，表明NiCl2作用于BEAS-2B細胞后引起細胞內(nèi)ROS水平增加。圖2-2NiCl2增加BEAS-2B細胞中ROS水平。與對照組相比，*P<0.05,**P<0.01。Fig2-2NiCl2increasedROSlevelsinBEAS-2Bcells.*P<0.05,**P<0.01comparedwithcontrolgroup.

第2章NiCl2誘導肺支氣管上皮細胞損傷以及白藜蘆醇的保護作用18圖2-1NiCl2抑制BEAS-2B細胞存活。與對照細胞相比，*P<0.05,**P<0.01.Fig2-1NiCl2inhibitedBEAS-2Bcellsurvival.*P<0.05,**P<0.01comparedwithcontrolgroup.2.3.1.2NiCl2對BEAS-2B細胞ROS產(chǎn)生的影響細胞遭受重金屬刺激時，體內(nèi)高活性分子如ROS產(chǎn)生過多，超過正常水平的ROS會破壞生物體內(nèi)氧化劑與抗氧化能力之間的平衡，導致對重要分子的廣泛破壞，從而導致氧化應激。如圖2-2所示，用0.2，0.4，0.8mMNiCl2處理BEAS-2B細胞24h，發(fā)現(xiàn)對照組探針無熒光，與對照組相比，隨著NiCl2濃度的升高，細胞內(nèi)的熒光強度明顯增強，分別升高了2.03倍，4.30倍和6.61倍，并且具有劑量依賴性關系，表明NiCl2作用于BEAS-2B細胞后引起細胞內(nèi)ROS水平增加。圖2-2NiCl2增加BEAS-2B細胞中ROS水平。與對照組相比，*P<0.05,**P<0.01。Fig2-2NiCl2increasedROSlevelsinBEAS-2Bcells.*P<0.05,**P<0.01comparedwithcontrolgroup.

【參考文獻】：
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本文編號：2918199