發(fā)布時(shí)間：2017-04-07 22:08

  本文關(guān)鍵詞：硫酸軟骨素的制備及其降血脂作用的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：以雞軟骨為原料,優(yōu)化軟骨中硫酸軟骨素的提取、純化等工藝流程,并研究硫酸軟骨素的抗氧化效果和降血脂的功能。 以硫酸軟骨素得率為考察指標(biāo),對(duì)稀堿-濃鹽法、超聲波輔助堿-酶法、超聲波輔助堿-雙酶法三種提取方法進(jìn)行篩選,最終確定超聲波輔助堿-雙酶法為雞軟骨中硫酸軟骨素的最佳提取方法。再應(yīng)用Box-Behnken中心組合實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)建立二次多項(xiàng)數(shù)學(xué)模型,進(jìn)行響應(yīng)曲面分析,對(duì)胃蛋白酶添加量、酶解溫度和酶解時(shí)間三個(gè)因素進(jìn)行優(yōu)化組合,確定超聲波輔助堿-雙酶法提取硫酸軟骨素的最佳工藝條件為：堿液濃度4%,料液比1：6g/mL,Na+濃度2.5mol/L,提取溫度35℃,木瓜蛋白酶添加量為1.3：1000g/mL,胃蛋白酶添加量1.39：1000g/mL,酶解溫度47.5℃,酶解時(shí)間102.5min,硫酸軟骨素得率為28.67%,純度為23.6%。 采用陰離子交換樹脂法對(duì)提取的硫酸軟骨素粗品進(jìn)行第一次純化,然后繼續(xù)采用凝膠層析法對(duì)硫酸軟骨素進(jìn)行第二次純化。首先通過靜態(tài)吸附及解吸實(shí)驗(yàn)對(duì)離子交換樹脂進(jìn)行篩選,最終確定選用D218型陰離子交換樹脂純化硫酸軟骨素。再通過動(dòng)態(tài)吸附及解吸的單因素實(shí)驗(yàn),優(yōu)化陰離子交換樹脂法純化硫酸軟骨素的工藝流程,其最佳工藝條件為：吸附液用量與樹脂體積比為1：1；吸附流速為1.0mL/min;吸附時(shí)間為60min洗脫劑NaCl溶液的濃度為3.0mol/L；洗脫劑用量與樹脂體積比為5：1,最佳解吸時(shí)間為75min,硫酸軟骨素純度為72.03%。然后選擇葡聚糖凝膠G75進(jìn)行再次純化,通過單因素實(shí)驗(yàn)確定最佳工藝條件為：洗脫液乙酸-乙酸鈉溶液的pH值為4.8,洗脫流速為0.7mL/min,在此工藝條件下得到的硫酸軟骨素的純度為99.30%,較第一次純化提高了27.27%。 采用硫酸-咔唑法對(duì)雞軟骨中的提取物進(jìn)行顯色反應(yīng),對(duì)凝膠層析法純化后得到的物質(zhì)分別采用紫外光譜法、高效液相色譜法以及紅外光譜法對(duì)其進(jìn)行檢測分析,證明從雞軟骨中提取的物質(zhì)為硫酸軟骨素。 對(duì)雞軟骨中提取的硫酸軟骨素進(jìn)行抗氧化活性研究,結(jié)果表明：硫酸軟骨素對(duì)五種自由基都表現(xiàn)出較好的抑制效果。CS的總抗氧化能力以及對(duì)羥基自由基、超氧陰離子自由基和脂質(zhì)體過氧化體系的抑制率最大可達(dá)到30.56U/mL、97.74%、80.69%、48.05%；對(duì)烷基自由基最大抑制率為78.57%。 對(duì)雞軟骨中提取的硫酸軟骨素進(jìn)行降血脂功能的研究,結(jié)果表明：對(duì)高血脂癥小鼠進(jìn)行灌胃硫酸軟骨素后,可降低小鼠血液中的總膽固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白指標(biāo),同時(shí)升高高密度脂蛋白指標(biāo),并且隨著硫酸軟骨素添加量的增加,作用效果有增強(qiáng)的趨勢。
【關(guān)鍵詞】：雞軟骨 硫酸軟骨素 提取 純化 抗氧化 降血脂
【學(xué)位授予單位】：哈爾濱商業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號(hào)】：TS251.94;R151
【目錄】：

• 摘要5-6
• Abstract6-11
• 1 緒論11-21
• 1.1 概述11
• 1.2 硫酸軟骨素概況11-16
• 1.2.1 硫酸軟骨素概念11
• 1.2.2 硫酸軟骨素的結(jié)構(gòu)、分類及分布11-12
• 1.2.3 硫酸軟骨素的理化性質(zhì)12-13
• 1.2.4 硫酸軟骨素的生理功能13-15
• 1.2.5 硫酸軟骨素的應(yīng)用15-16
• 1.3 國內(nèi)外在該方向的研究發(fā)展及分析16-20
• 1.3.1 硫酸軟骨素的提取方法16-18
• 1.3.2 硫酸軟骨素的分離純化18-20
• 1.4 課題研究的目的和意義20
• 1.5 課題來源20
• 1.6 本課題研究的主要內(nèi)容20-21
• 2 響應(yīng)曲面法優(yōu)化雞軟骨中硫酸軟骨素的提取工藝21-35
• 2.1 引言21
• 2.2 實(shí)驗(yàn)部分21-22
• 2.2.1 實(shí)驗(yàn)儀器21
• 2.2.2 實(shí)驗(yàn)材料21-22
• 2.3 實(shí)驗(yàn)方法22-25
• 2.3.1 硫酸軟骨素含量的測定22-23
• 2.3.2 硫酸軟骨素提取方法的選擇23
• 2.3.3 硫酸軟骨素提取工藝的單因素實(shí)驗(yàn)23-25
• 2.3.4 響應(yīng)曲面法優(yōu)化硫酸軟骨素的提取工藝條件25
• 2.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析25-34
• 2.4.1 硫酸軟骨素含量測定結(jié)果與分析25-26
• 2.4.2 硫酸軟骨素提取方法篩選的結(jié)果與分析26-27
• 2.4.3 硫酸軟骨素提取工藝單因素實(shí)驗(yàn)的結(jié)果與分析27-30
• 2.4.4 響應(yīng)曲面法優(yōu)化硫酸軟骨素提取工藝條件實(shí)驗(yàn)的結(jié)果與分析30-34
• 2.4.5 驗(yàn)證試驗(yàn)結(jié)果分析34
• 2.5 本章小結(jié)34-35
• 3 硫酸軟骨素分離純化工藝的研究35-53
• 3.1 引言35
• 3.2 實(shí)驗(yàn)儀器與材料35-36
• 3.2.1 實(shí)驗(yàn)儀器35
• 3.2.2 實(shí)驗(yàn)材料35-36
• 3.3 實(shí)驗(yàn)方法36-40
• 3.3.1 離子交換樹脂法純化硫酸軟骨素工藝條件的選擇36-39
• 3.3.2 凝膠層析法純化硫酸軟骨素工藝條件的選擇39-40
• 3.3.3 硫酸軟骨素定性分析實(shí)驗(yàn)40
• 3.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析40-51
• 3.4.1 離子交換樹脂法純化硫酸軟骨素的實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析40-44
• 3.4.2 凝膠層析法純化硫酸軟骨素結(jié)果與分析44-49
• 3.4.3 硫酸軟骨素定性分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析49-51
• 3.5 本章小結(jié)51-53
• 4 硫酸軟骨素抗氧化效果評(píng)價(jià)53-60
• 4.1 引言53
• 4.2 實(shí)驗(yàn)儀器與材料53-54
• 4.2.1 實(shí)驗(yàn)儀器53
• 4.2.2 實(shí)驗(yàn)材料53-54
• 4.3 實(shí)驗(yàn)方法54-57
• 4.3.1 總抗氧化能力的測定54
• 4.3.2 抑制羥自由基能力的測定54-55
• 4.3.3 超氧陰離子自由基抑制能力的測定55
• 4.3.4 抑制烷自由基能力的測定55-56
• 4.3.5 抗脂質(zhì)體過氧化能力的測定56-57
• 4.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析57-59
• 4.4.1 測定總抗氧化能力的結(jié)果與分析57
• 4.4.2 抑制羥自由基能力的測定的結(jié)果與分析57-58
• 4.4.3 抑制超氧陰離子自由基能力的測定的結(jié)果與分析58
• 4.4.4 抑制烷自由基能力測定的結(jié)果與分析58-59
• 4.4.5 抗脂質(zhì)體過氧化能力測定的結(jié)果與分析59
• 4.5 本章小結(jié)59-60
• 5 硫酸軟骨素降血脂作用的研究60-68
• 5.1 引言60
• 5.2 實(shí)驗(yàn)儀器與材料60-61
• 5.2.1 實(shí)驗(yàn)儀器60
• 5.2.2 實(shí)驗(yàn)材料60-61
• 5.3 實(shí)驗(yàn)方法61-63
• 5.3.1 硫酸軟骨素降血脂作用的研究61-62
• 5.3.2 硫酸軟骨素外實(shí)驗(yàn)對(duì)脂肪酶活性抑制作用的研究62-63
• 5.3.3 數(shù)據(jù)處理與統(tǒng)計(jì)分析63
• 5.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析63-66
• 5.4.1 硫酸軟骨素降血脂作用的結(jié)果與分析63-65
• 5.4.2 硫酸軟骨素體外實(shí)驗(yàn)對(duì)胰脂肪酶活性抑制作用影響的研究65-66
• 5.5 本章小結(jié)66-68
• 結(jié)論68-69
• 參考文獻(xiàn)69-72
• 附錄72-73
• 攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文73-74
• 致謝74

【參考文獻(xiàn)】

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  本文關(guān)鍵詞：硫酸軟骨素的制備及其降血脂作用的研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：291417