諾如病毒是一種致病性較強(qiáng)的食源性及水源性病毒,該病毒常通過污染水源引起人群的急性胃腸炎的暴發(fā)。對于諾如病毒的鑒定主要是通過實(shí)時熒光定量RT-PCR的方法,因?yàn)橹Z如病毒無法通過細(xì)胞和組織培養(yǎng)法在實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行培養(yǎng),當(dāng)水中諾如病毒量較低的時就無法檢測到。為了克服水體中諾如病毒的富集難題,本論文擬建立以納米金屬氧化物（納米氧化鈦、納米氧化鋯）修飾纖維素濾紙富集水中病毒的方法,通過優(yōu)化有關(guān)具體構(gòu)筑及檢測的參數(shù),最終建立一套能夠快速、高效、簡便、便宜富集檢測的方法,解決水中諾如病毒檢測技術(shù)的問題。1、建立了實(shí)時熒光定量RT-PCR檢測諾如病毒的方法,對方法的靈敏度、特異性、穩(wěn)定性進(jìn)行了驗(yàn)證,利用臨床標(biāo)本對方法的實(shí)際檢測效果進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)。將GII型諾如病毒標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)粒繪制細(xì)針絕對定量標(biāo)準(zhǔn)曲線,回歸方程為Y=-3.3661x+46.441,相關(guān)系數(shù)R²值為0.9993,方法的最低檢測濃度為9.1×10²copies/μL,三個濃度批內(nèi)和批間重復(fù)試驗(yàn)CT值的變異系數(shù)均小于2%,該方法具有較高靈敏度,準(zhǔn)確性和重復(fù)性好,可以應(yīng)用于水中諾如病毒富集的檢測。2、通過比較納米二... 

【文章來源】：浙江農(nóng)林大學(xué)浙江省

【文章頁數(shù)】：47 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

諾如病毒電鏡圖

圖 2.1 不同濃度的 GII 型諾如病毒的 CT 值Fig. 2.1 different concentrations of norovirus GII of CT values（注：從左到右標(biāo)準(zhǔn)品濃度分別為 9.1×1010～9.1×104copies/ μL） Excel 表格可繪制 CT 值與稀釋倍數(shù)的對數(shù)之間關(guān)系的絕對，以拷貝數(shù)的對數(shù)為橫坐標(biāo)，CT 值為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線：Y=—3.3661x+46.441，相關(guān)系數(shù) R2值為 0.9993，表明線性相結(jié)果可靠，見圖 2.2。標(biāo)準(zhǔn)稀釋到 9.1×102copies/ μL 時，有明顯的準(zhǔn)稀釋到 9.1×101copies/ μL，無擴(kuò)增。因此，方法的最低檢測濃opies/ μL，具有較高的靈敏度。

圖 2.1 不同濃度的 GII 型諾如病毒的 CT 值Fig. 2.1 different concentrations of norovirus GII of CT values（注：從左到右標(biāo)準(zhǔn)品濃度分別為 9.1×1010～9.1×104copies/ μL）過 Excel 表格可繪制 CT 值與稀釋倍數(shù)的對數(shù)之間關(guān)系的絕線，以拷貝數(shù)的對數(shù)為橫坐標(biāo)，CT 值為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲為：Y=—3.3661x+46.441，相關(guān)系數(shù) R2值為 0.9993，表明線性量結(jié)果可靠，見圖 2.2。標(biāo)準(zhǔn)稀釋到 9.1×102copies/ μL 時，有明顯標(biāo)準(zhǔn)稀釋到 9.1×101copies/ μL，無擴(kuò)增。因此，方法的最低檢測濃copies/ μL，具有較高的靈敏度。

【參考文獻(xiàn)】：
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碩士論文
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本文編號：2903585