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攜帶miR-27a的外泌體介導(dǎo)的電離輻射旁效應(yīng)對皮膚傷口愈合的影響及其機制的研究

發(fā)布時間:2020-12-03 07:00
  目的:急性放射性皮膚損傷的癥狀包括紅斑、脫發(fā)、干燥脫屑和色素沉著,皮膚損傷嚴(yán)重程度與輻射劑量、劑量率、皮膚厚度以及射線品質(zhì)有關(guān)。換句話說,在同樣的物理照射劑量下,不同射線品質(zhì)的輻射對同一個體將造成不同程度的皮膚損傷。一般認(rèn)為自然發(fā)生的α粒子由于穿透力弱不能穿透人的皮膚表皮層,只有當(dāng)其照射劑量達幾百格瑞才可使皮膚出現(xiàn)紅斑等明顯的損傷,但是目前鮮少有文獻可以證明低劑量α粒子照射不會對皮膚造成任何損傷。正因為α粒子射程短,根據(jù)放射生物學(xué)傳統(tǒng)的靶理論,低劑量外照射僅會傷及皮膚表面角質(zhì)層,而不會影響對皮膚損傷修復(fù)具有重要作用的真皮層成纖維細(xì)胞。然而由于可能存在電離輻射旁效應(yīng),低劑量α粒子照射也有可能通過旁效應(yīng)信號影響真皮層,從而對皮膚修復(fù)功能造成損傷。已有研究結(jié)果提示,電離輻射旁效應(yīng)可能在輻射的健康危害和腫瘤放療的效率及副作用中具有重要作用。因此明確電離輻射旁效應(yīng)在皮膚傷口愈合過程中的作用及其發(fā)生機制對降低輻射對正常細(xì)胞組織的危害具有重要現(xiàn)實意義。方法:本研究第一部分采用直接照射法和共培養(yǎng)法處理BALB/c小鼠背部皮膚,通過肉眼和皮膚石蠟切片HE染色觀察其表觀形態(tài)、通過游標(biāo)卡尺測量傷口大小反映其... 

【文章來源】:蘇州大學(xué)江蘇省

【文章頁數(shù)】:111 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【部分圖文】:

攜帶miR-27a的外泌體介導(dǎo)的電離輻射旁效應(yīng)對皮膚傷口愈合的影響及其機制的研究


電離輻射旁效應(yīng)大事記大量的研究提示[26,50,55]

模型圖,活體,共培養(yǎng),模型


圖 1.1 活體共培養(yǎng)模型。、Western Blot 檢測受照小鼠皮膚γH2AX表達水平射后 30 min 小鼠皮膚置于凍存管內(nèi)液氮速凍;適量強效裂解液(RIPA 強效裂解液、1% PMSF),冰上超聲至皮;00 g、4 ℃,離心 10 min,取上清,用 BCA 試劑盒測蛋白濃度,多(Synergy 2,美國 BIO-TEK 公司)測量吸收光,波長 562 nm;相應(yīng)體積的 5×SDS-PAGE 上樣緩沖液,混合均勻,95 ℃變性 5 m12% SDS-PAGE 80 V 恒壓電泳分離蛋白,濕法穩(wěn)流(200 mA)轉(zhuǎn)膜60 min;TBST 清洗膜 4 次,每次 5 min,3% BSA 室溫封閉 1 h;(anti-γH2AX)孵育膜 4 ℃過夜,TBST 清洗膜 4 次,每次 10 m(HRP-anti-rabbit,碧云天,中國)室溫孵育膜 1 h,TBST 清洗膜

α粒子照射,低劑量,傷口愈合,傷口


實驗結(jié)果一、α粒子直接照射對小鼠皮膚傷口愈合的影響γH2AX 被廣泛用作 DNA 損傷的生物標(biāo)記物。如圖 1.2 所示,小鼠皮膚在受到 0.56 Gy 的α粒子照射后 30 min,其γH2AX 表達水平與未照射組相比出現(xiàn)顯著增加,證實照射是成功的。然而受照小鼠皮膚直到第十天也并未出現(xiàn)肉眼可見的改變;這與文獻報道[1]的一致。那么這樣的α粒子劑量是否對皮膚沒有任何影響呢?本研究發(fā)現(xiàn)小鼠受照區(qū)域的傷口愈合速度相比對照組明顯減慢,如圖 1.3,傷口制造后第三天和第七天,照射組傷口面積顯著大于未照射組;到了第十天,照射組傷口愈合減慢趨勢依然存在,但無統(tǒng)計學(xué)差異。另外研究還發(fā)現(xiàn),傷口制造后第十天,皮膚已基本愈合,但是照射組愈合皮膚表皮層明顯比未照射組厚,這也是照射組皮膚愈合更差的一個佐證。也就是說,雖然照射后小鼠皮膚沒有出現(xiàn)肉眼可見的損傷,但實際上其生物學(xué)功能已經(jīng)發(fā)生了一定程度的改變。

【參考文獻】:
期刊論文
[1]外泌體—電離輻射誘導(dǎo)旁效應(yīng)的另一種機制[J]. 陳纖,蔣友芹,尹曉明,田文倩,王敬東,楊紅英.  輻射研究與輻射工藝學(xué)報. 2014(03)
[2]Inhibitory Effects of miR-146b-5p on Cell Migration and Invasion of Pancreatic Cancer by Targeting MMP16[J]. 林凡,王欣,揭志剛,洪曉泉,李旭,王敏,俞亞紅.  Journal of Huazhong University of Science and Technology(Medical Sciences). 2011(04)



本文編號:2896166

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