目的探討六價鉻暴露對發(fā)育期大鼠海馬CA1區(qū)神經(jīng)細(xì)胞凋亡和學(xué)習(xí)記憶功能的影響及其作用機制。方法選擇SPF級健康的孕期SD大鼠12只,待仔鼠出生后將孕鼠隨機分為對照(雙蒸水)組、重鉻酸鉀溶液0.8mg/kg、4mg/kg、20mg/kg染毒組。仔鼠出生后第1d起通過母乳染毒,進(jìn)食階段(21d后)采用經(jīng)口灌胃的方式染毒,按0.5ml/100g進(jìn)行等體積灌胃,1次/d,每三日稱重1次,并根據(jù)體重調(diào)整給藥量,連續(xù)染毒6個月。染毒期間,觀察各個子代大鼠的進(jìn)食、飲水、毛色,糞便、行為活動及體重的變化等。選取各組雄性子代大鼠進(jìn)行實驗,剔除個別死亡大鼠后,共40只,其中對照組為11只,染毒劑量低、中、高組分別為10、10、9只。取材前12h稱重,禁食不禁水。采用原子吸收分光光度計檢測血液中Cr~(6+)的含量;Morris水迷宮實驗評價大鼠的學(xué)習(xí)記憶能力;HE染色觀察海馬CA1區(qū)的神經(jīng)形態(tài)學(xué)變化;TUNEL細(xì)胞凋亡染色觀察海馬CA1區(qū)神經(jīng)元凋亡的程度;免疫組織化學(xué)檢測Caspase-3的表達(dá)情況;ELISA法(酶聯(lián)免疫吸附實驗)檢測腦組織中炎癥因子TNF-α、IL-1β的含量。采用Excel 2016建立數(shù)據(jù)庫,運用SPSS 22.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析,計量資料用x±s表示,Morris水迷宮定位航行實驗中的搜索有效策略百分比的比較采用重復(fù)測量的方差分析;其他多組均數(shù)間的比較用單因素方差分析(One-way ANOVA)及兩兩比較的方法,方差齊時用LSD法,方差不齊時用Dunnett's T3檢驗。P0.05為差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。結(jié)果實驗期間對照組大鼠毛色純白,反應(yīng)迅速,飲食和體質(zhì)量增長均正常;而鉻染毒組大鼠隨著染毒天數(shù)的增加毛色逐漸暗黃,食欲減退,反應(yīng)遲鈍,體質(zhì)量相較于對照組增長緩慢。重鉻酸鉀各染毒組大鼠的學(xué)習(xí)記憶能力均低于對照組(P0.05);重鉻酸鉀各染毒組大鼠血液中Cr~(6+)的含量均高于對照組(P0.05);HE染色顯示各染毒組海馬CA1區(qū)神經(jīng)元隨染毒劑量的增加呈現(xiàn)出不同程度的細(xì)胞間隙增寬,細(xì)胞排列稀疏紊亂,部分細(xì)胞體積減小等病理改變;TUNEL細(xì)胞凋亡實驗顯示對照組少見陽性細(xì)胞,細(xì)胞凋亡率較低(3.33±0.98)%,重鉻酸鉀染毒組細(xì)胞凋亡率隨著染毒劑量的增加而逐漸升高,分別為(9.34±2.42)%、(18.03±1.40)%和(23.91±3.21)%;免疫組化染色顯示隨著重鉻酸鉀濃度的增加活化的Caspase-3陽性細(xì)胞數(shù)量明顯增多;重鉻酸鉀各染毒組大鼠腦組織中TNF-α、IL-1β的含量均高于對照組(P0.05)。結(jié)論長期的六價鉻暴露能夠損害發(fā)育期大鼠的認(rèn)知功能,使學(xué)習(xí)記憶能力下降。其作用機制與六價鉻引起炎癥因子TNF-α、IL-1β增多,造成海馬CA1區(qū)神經(jīng)元凋亡有關(guān)。
【學(xué)位單位】：錦州醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位年份】：2018
【中圖分類】：R114
【部分圖文】：

二、血液 Cr6+含量測定結(jié)果（一）繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線儀器按照濃度 60.00、120.00、180.00、240.00、300.00μg/L 標(biāo)準(zhǔn)系列溶液自動繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，測定結(jié)果鉻濃度與吸光率呈線性相關(guān)，相關(guān)系數(shù) r 為0.994290，斜率為 0.0042，截距為 0.1559，線性回歸方程為：y=0.1559+0.0042x。標(biāo)準(zhǔn)曲線如圖 2 所示。

組別 動物數(shù) 原平臺所在象限游泳時間/總時間（120s） F 值 P 值對照組 11 37.94±7.1031.55 0.000低濃度組 10 27.54±6.21*中濃度組 10 20.05±5.33*#高濃度組 9 14.22±3.63*#&注：與對照組比較，*P<0.05；與低濃度組比較，#P<0.05；與中濃度組比較，&P<0.05。四、海馬組織病理學(xué)改變（一）HE 染色光學(xué)顯微鏡下觀察可見對照組的海馬神經(jīng)細(xì)胞呈多凸起形，排列規(guī)則，細(xì)胞核大且圓，著色淺，核仁明顯。 重鉻酸鉀各染毒組海馬 CA1 區(qū)神經(jīng)元隨染毒劑量的增加呈現(xiàn)受損樣改變，表現(xiàn)為不同程度的細(xì)胞間隙增寬，細(xì)胞排列稀疏紊亂，部分細(xì)胞體積減小等（圖 3）。

（二）TUNEL 細(xì)胞凋亡實驗染色TUNEL 細(xì)胞凋亡實驗標(biāo)記的陽性細(xì)胞胞核呈深棕色。光學(xué)顯微鏡下觀察可見，對照組的神經(jīng)細(xì)胞排列整齊，界限清楚，僅見偶染細(xì)胞，細(xì)胞凋亡率是（3.33±0.98）%；與對照組比較，重鉻酸鉀各個染毒組均出現(xiàn)陽性細(xì)胞，細(xì)胞凋亡率隨著染毒劑量的增加而逐漸升高，分別為（9.34±2.42）%、（18.03±1.40）%和（23.91±3.21）%（見圖 4）。

【參考文獻(xiàn)】

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1 馬文彥;張慧芳;張林;陳詩奇;田曉琳;閻小艷;張文平;仇玉蘭;;砷、氟暴露對子代大鼠空間學(xué)習(xí)記憶和海馬CA1區(qū)長時程增強的影響[J];毒理學(xué)雜志;2018年02期

2 盧艷秋;劉小軍;�？肆�;陶勝忠;;不同時間炎性因子白細(xì)胞介素-1β、腫瘤壞死因子-α表達(dá)與腦出血患者神經(jīng)細(xì)胞凋亡的關(guān)系[J];中華實驗外科雜志;2016年12期

3 黃立宏;李剛;馮小芳;王羅軍;杜洵昊;;15d-PGJ2對糖尿病大鼠腦缺血再灌注損傷小膠質(zhì)細(xì)胞活化及神經(jīng)細(xì)胞凋亡的影響[J];卒中與神經(jīng)疾病;2016年03期

4 張立豐;白春玉;張迪;趙麗妮;;亞慢性鋁暴露對Wistar大鼠學(xué)習(xí)記憶及海馬CA1區(qū)c-Fos表達(dá)的影響[J];中國藥理學(xué)與毒理學(xué)雜志;2016年05期

5 付婧;劉燕群;熊旭;劉潔;何志文;魯雄兵;陳曉青;陳朝霞;;重鉻酸鉀對昆明小鼠肝腎毒性的影響[J];現(xiàn)代醫(yī)藥衛(wèi)生;2015年21期

6 孫立萍;王克躍;李紅;;亞慢性釩染毒大鼠海馬細(xì)胞凋亡及學(xué)習(xí)記憶的改變[J];毒理學(xué)雜志;2015年05期

7 趙嵐;董銀華;王洪新;梁佩芬;;糖調(diào)節(jié)受損大鼠學(xué)習(xí)記憶能力下降與海馬神經(jīng)細(xì)胞凋亡有關(guān)[J];基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床;2015年09期

8 金連海;;大豆異黃酮對大鼠Morris水迷宮學(xué)習(xí)記憶和海馬Caspase-3表達(dá)的影響[J];當(dāng)代醫(yī)藥論叢;2015年08期

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本文編號：2831675