【摘要】：目的:鄰苯二甲酸二甲酯(Dimethyl phthalate,DMP)是增塑劑鄰苯二甲酸酯類的一種,廣泛存在于水、土壤和大氣中,與人們的生活密切相關(guān)。目前,國(guó)內(nèi)外對(duì)DMP肝臟損傷的研究較少。本研究以小鼠為實(shí)驗(yàn)對(duì)象,用不同劑量的DMP灌胃C57小鼠20天和40天,觀察其對(duì)肝臟組織各種功能指標(biāo)的影響,為探討DMP對(duì)小鼠肝臟的毒性作用機(jī)制提供依據(jù)。方法:選擇80只雌雄各半的健康C57小鼠,根據(jù)文獻(xiàn)隨機(jī)將小鼠分成4個(gè)劑量組:2.0g/kg DMP組、1.0g/kg DMP組、0.5g/kg DMP組和對(duì)照組(純玉米油)。采用連續(xù)灌胃的方式進(jìn)行染毒,灌胃體積為10ml/kg,分別于灌胃20d和40d后眶靜脈竇取血后頸椎脫臼處死,取其肝臟組織,測(cè)定肝臟組織勻漿中T-SOD、GSH-Px、CAT和MDA氧化損傷指標(biāo),NO濃度和NOS酶活力指標(biāo),ALT、AST、LDH、Na+-K+-ATP和Ca2+-Mg2+-ATP肝組織代謝酶活力指標(biāo),以及肝細(xì)胞凋亡情況。結(jié)果:1.小鼠體重和肝臟系數(shù)灌胃20d和40d后,各組小鼠均未見(jiàn)死亡,進(jìn)食和活動(dòng)正常,無(wú)異常反應(yīng)。各劑量組間體重和臟器系數(shù)無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。2.小鼠肝臟脂質(zhì)過(guò)氧化損傷的測(cè)定結(jié)果灌胃20天后,雄鼠各DMP染毒組的T-SOD活力均低于對(duì)照組(P0.05);CAT活力1.0g/kg DMP組低于0.5g/kg DMP組和對(duì)照組(P0.05),2.0g/kg DMP組低于1.0g/kg DMP組、0.5g/kg DMP組和對(duì)照組(P0.05);GSH-Px活力2.0g/kg DMP組低于1.0g/kg DMP組、0.5g/kg DMP組和對(duì)照組(P0.05);MDA含量各DMP染毒組均高于對(duì)照組(P0.05),1.0g/kg DMP組和2.0g/kg DMP組MDA含量低于0.5g/kg DMP組(P0.05)。灌胃20天后,雌鼠各組之間的T-SOD活力無(wú)明顯變化(P0.05);各DMP染毒組CAT活力均高于對(duì)照組(P0.05);各組之間的GSH-Px活力無(wú)明顯變化(P0.05);2.0g/kg DMP組的MDA含量明顯高于其1.0g/kg DMP組、0.5g/kg DMP組和對(duì)照組(P0.05)。灌胃40天后,雄鼠各組之間的T-SOD活力無(wú)明顯變化(P0.05);0.5g/kg DMP組和1.0g/kg劑量組CAT活力高于對(duì)照組(P0.05),2.0g/kg DMP組的CAT活力低于1.0g/kg DMP組、0.5g/kg DMP組和對(duì)照組(P0.05);1.0g/kg DMP劑量組的GSH-Px活力低于0.5g/kg DMP組和對(duì)照組(P0.05),2.0g/kg DMP劑量組的GSH-Px活力高于1.0g/kg DMP組(P0.05);各組之間的的MDA含量無(wú)明顯差異(P0.05)。灌胃40天后,雌性小鼠各DMP組的T-SOD活力均低于對(duì)照組(P0.05);2.0g/kg DMP組的T-SOD活力高于0.5g/kg DMP組和1.0g/kg DMP組;2.0g/kg DMP組的CAT活力和GSH-Px活力均高于1.0g/kg DMP組、0.5g/kg DMP組和對(duì)照組(P0.05);各DMP染毒組的MDA含量明顯高于對(duì)照組(P0.05),1.0g/kg DMP組的MDA含量明顯高于0.5g/kg DMP組和2.0g/kg DMP組(P0.05)。3.小鼠肝臟NO和NOS的測(cè)定結(jié)果灌胃20d后,雄性小鼠各DMP染毒組的NO含量明顯高于對(duì)照組(P0.05),2.0g/kg DMP組的NO含量顯著高于1.0g/kg DMP組(P0.05);雄鼠各DMP染毒組的NOS活力明顯高于對(duì)照組(P0.05),2.0g/kg DMP組和1.0g/kg DMP組NOS的活力顯著高于0.5g/kg DMP組(P0.05),2.0g/kg DMP組NOS的活力顯著高于1.0g/kg DMP組(P0.05)。雌性小鼠1.0g/kg DMP組的NO的含量明顯低于2.0g/kg DMP組、0.5g/kg DMP組和對(duì)照組(P0.05);0.5g/kg DMP組和1.0g/kg DMP組NOS的活力明顯低于對(duì)照組(P0.05),1.0g/kg DMP組NOS的活力明顯低于0.5g/kg DMP組(P0.05),2.0g/kg DMP組NOS的活力顯著高于0.5g/kg DMP組、1.0g/kg DMP組和對(duì)照組(P0.05)。灌胃40d后,雄性小鼠1.0g/kg DMP組和2.0g/kg DMP組NO的含量明顯高于0.5g/kg DMP組和對(duì)照組(P0.05);2.0g/kg DMP組的NOS活力顯著高于1.0g/kg DMP組、0.5g/kg DMP組和對(duì)照組(P0.05)。雌性小鼠各DMP組的NO含量明顯低于對(duì)照組(P0.05),1.0g/kg DMP組和2.0g/kg DMP組的NO的含量低于0.5g/kg DMP組(P0.05);各DMP組的NOS活力明顯低于對(duì)照組(P0.05),1.0g/kg DMP組和2.0g/kg DMP組的NOS活力低于0.5g/kg DMP組(P0.05)。4.小鼠肝臟組織酶活力的變化灌胃20d后,雄性小鼠1.0g/kg DMP組和2.0g/kg DMP組的ALT活力明顯低于0.5g/kg DMP組和對(duì)照組(P0.05);1.0g/kg DMP組和2.0g/kg DMP組的AST活力明顯低于對(duì)照組(P0.05),2.0g/kg DMP組的AST活力低于0.5g/kg DMP組(P0.05);各組之間LDH活力無(wú)明顯差異(P0.05),各DMP染毒組的Ca2+-Mg2+-ATP酶活性均低于對(duì)照組(P0.05),2.0g/kg DMP組Ca2+-Mg2+-ATP酶活力明顯低于0.5g/kg DMP組和1.0g/kg DMP組(P0.05);1.0g/kg DMP組的Na+-K+-ATP酶活力明顯低于0.5g/kg DMP組和對(duì)照組(P0.05),2.0g/kg DMP組的Na+-K+-ATP酶活力明顯低于1.0g/kg DMP組、0.5g/kg DMP組和對(duì)照組(P0.05)。灌胃20d后,雌性小鼠各組之間ALT活力無(wú)明顯差異(P0.05);0.5g/kg DMP組和1.0g/kg DMP組的AST活力明顯高于對(duì)照組(P0.05),2.0g/kg DMP組的AST活力低于0.5g/kg DMP組(P0.05);各組之間LDH活力無(wú)明顯差異(P0.05);0.5g/kg DMP組的Ca2+-Mg2+-ATP酶活力明顯高于對(duì)照組(P0.05),2.0g/kg DMP組的Ca2+-Mg2+-ATP酶活力明顯高于1.0g/kg DMP組、0.5g/kg DMP組和對(duì)照組(P0.05);2.0g/kg DMP組的Na+-K+-ATP酶活力明顯高于1.0g/kg DMP組、0.5g/kg DMP組和對(duì)照組(P0.05)。灌胃40d后,雄性小鼠2.0g/kg DMP組的ALT活力明顯低于1.0g/kg DMP組、0.5g/kg DMP組和對(duì)照組(P0.05);0.5g/kg DMP組和2.0g/kg DMP組的AST活力明顯低于對(duì)照組(P0.05),1.0g/kg DMP組的AST活力高于2.0g/kg DMP組和對(duì)照組(P0.05);0.5g/kg DMP組的LDH活力顯著高于2.0g/kg DMP組、1.0g/kg DMP組和對(duì)照組(P0.05),2.0g/kg DMP組LDH活力高于1.0g/kg DMP組和對(duì)照組(P0.05);各組肝臟Ca2+-Mg2+-ATP酶活力無(wú)明顯差異(P0.05);0.5g/kg DMP組的Na+-K+-ATP酶活力高于對(duì)照組和2.0g/kg DMP組(P0.05)。灌胃40d后,雌性小鼠各組之間ALT活力無(wú)明顯差異(P0.05);1.0g/kg DMP組和2.0g/kg DMP組的AST活力明顯低于0.5g/kg DMP組和對(duì)照組(P0.05);各組之間的LDH活力無(wú)明顯差異(P0.05);各DMP染毒組的Ca2+-Mg2+-ATP酶和Na+-K+-ATP酶活力均低于對(duì)照組(P0.05)。5.肝細(xì)胞凋亡情況灌胃20d和40d后,雄性小鼠各DMP染毒組的肝臟組織細(xì)胞凋亡率明顯高于對(duì)照組(P0.05),2.0g/kg DMP組肝臟組織細(xì)胞凋亡率顯著低于0.5g/kg DMP組和1.0g/kg DMP組(P0.05),1.0g/kg DMP組肝臟組織細(xì)胞凋亡率顯著高于0.5g/kg DMP組(P0.05)。雌性小鼠各DMP染毒組的肝臟組織細(xì)胞凋亡率明顯高于對(duì)照組(P0.05),2.0g/kg DMP組肝臟組織細(xì)胞凋亡率顯著高于0.5g/kg DMP組和1.0g/kg DMP組(P0.05)。結(jié)論:1.雄鼠在染毒20d時(shí)肝臟組織T-SOD、GSH-Px、CAT酶活力降低,MDA含量增高,染毒40d時(shí)GSH-Px、CAT酶活力下降;雌性小鼠在染毒20d時(shí)CAT活力和MDA含量升高,在染毒40d時(shí),T-SOD活力下降,GSH-Px、CAT酶活力和MDA含量升高。2.DMP染毒可增加雄性小鼠肝臟組織的NO濃度和NOS活力,雌性小鼠肝臟組織中的NO濃度和NOS活力下降。3.DMP可降低雄性小鼠肝組織ALT、AST、Ca2+-Mg2+-ATP酶活力;Na+-K+-ATP酶活力在染毒20d時(shí)降低,40d時(shí)增加;在染毒40d時(shí),可使LDH酶活力增高。雌性小鼠在染毒20d時(shí)ALT、AST、Ca2+-Mg2+-ATP酶和Na+-K+-ATP酶活力增加,在染毒40d時(shí),AST、Ca2+-Mg2+-ATP酶和Na+-K+-ATP酶活力降低。4.DMP染毒會(huì)增加小鼠肝臟細(xì)胞的凋亡率。
【學(xué)位授予單位】：吉林大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號(hào)】：R114
【圖文】：

圖 3-1 灌胃 20d 后對(duì)肝細(xì)胞凋亡的影響a：雄性對(duì)照組；b：雄性 0.5g/kgDMP 組；c：雄性 1.0g/kgDMP 組；d：雄性 2.0g/kgDMP 組；e：雌性對(duì)照組；f：雌性 0.5g/kgDMP 組；g：雌性 1.0g/kgDMP 組；h：雌性 2.0g/kgDMP 組；表 3-13 各組小鼠肝臟細(xì)胞凋亡率變化（n=5, x±s，% ）劑量（g/kg） 雄性 雌性0 6.68±0.42 10.27±0.980.5 8.54±0.73a11.89±0.95a1.0 9.55±0.35ab12.86±1.17a2.0 7.68±0.60abc18.26±1.24abcF 25.126 50.357P <0.001 <0.001注:a：與對(duì)照比較，P<0. 05； b：與低劑量組比較，P<0. 05；c：與中劑量組比較，P<0. 053.5.2 灌胃 40 天后肝臟細(xì)胞凋亡率的測(cè)定結(jié)果灌胃 40d 后，對(duì)各組小鼠肝臟組織細(xì)胞凋亡的影響如圖 3-2 和表 3-14 所示。

圖 3-2 灌胃 40d 后對(duì)肝細(xì)胞凋亡的影響a：雄性對(duì)照組；b：雄性 0.5g/kgDMP 組；c：雄性 1.0g/kgDMP 組；d：雄性 2.0g/kgDMP 組；e：雌性對(duì)照組；f：雌性 0.5g/kgDMP 組；g：雌性 1.0g/kgDMP 組；h：雌性 2.0g/kgDMP 組；表 3-14 各組小鼠肝臟細(xì)胞凋亡率變化（n=5, x±s，% ）劑量（g/kg） 雄性 雌性0 14.20±1.26 21.75±0.430.5 20.35±2.03a26.81±0.57a1.0 25.92±0.21ab25.30±1.96a2.0 15.98±0.16abc30.94±2.04abcF 94.511 33.898P <0.001 <0.001注:a：與對(duì)照比較，P<0. 05； b：與低劑量組比較，P<0. 05；c：與中劑量組比較，P<0. 05

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