發(fā)布時(shí)間：2020-08-15 18:57

【摘要】：赭曲霉毒素A(Ochratoxin A,OTA)是一種重要的食品安全污染物。近年來(lái),在人群血液樣本中,OTA均有檢出。現(xiàn)已證實(shí)OTA可對(duì)動(dòng)物體及人體產(chǎn)生包括神經(jīng)毒性、肝毒性、腎毒性在內(nèi)的多種毒理學(xué)效應(yīng)。腎臟被認(rèn)為是OTA的靶器官,富含線粒體,且與機(jī)體能量代謝調(diào)節(jié)關(guān)系密切。目前,關(guān)于營(yíng)養(yǎng)素參與緩解OTA毒性的報(bào)道及其作用機(jī)制還不明確。因此,本研究重點(diǎn)以腎細(xì)胞及動(dòng)物模型中腎臟組織作為研究對(duì)象,探索營(yíng)養(yǎng)素對(duì)OTA誘導(dǎo)細(xì)胞能量代謝紊亂及腎臟損傷的保護(hù)機(jī)制。(1)本研究圍繞OTA致毒機(jī)制,運(yùn)用蛋白質(zhì)組學(xué)研究手段,發(fā)現(xiàn)OTA可以顯著抑制腎臟和肝臟中能量代謝相關(guān)蛋白的表達(dá),激活涉及凋亡、泛素化相關(guān)通路蛋白的表達(dá)。研究首次發(fā)現(xiàn)Grp75蛋白表達(dá)受OTA的調(diào)控,并證實(shí)了 OTA對(duì)Grp75的調(diào)控作用,發(fā)現(xiàn)Grp75蛋白可對(duì)Kim-1蛋白及Lonp-1蛋白的表達(dá)產(chǎn)生影響,提出Grp75蛋白參與OTA介導(dǎo)的腎臟損傷新途徑。(2)鋅是人體中必需的微量元素,是細(xì)胞中多種酶和轉(zhuǎn)錄因子的輔助因子,廣泛參與細(xì)胞抗氧化及維持DNA穩(wěn)定性的調(diào)節(jié)。研究發(fā)現(xiàn)鋅離子可以緩解OTA造成的細(xì)胞凋亡,并參與對(duì)Grp75等蛋白的調(diào)控。鋅離子的添加與ZNF447蛋白表達(dá)間具有調(diào)控關(guān)系,指出ZNF447蛋白的缺失可以促進(jìn)OTA誘導(dǎo)條件下PARP和γ-H2AX介導(dǎo)的基因毒性。此外,鋅離子還可以促進(jìn)細(xì)運(yùn)動(dòng)能力的提升并改善OTA誘導(dǎo)下受損的能量代謝。在OTA誘導(dǎo)細(xì)胞損傷條件下,鋅離子可促進(jìn)細(xì)胞外泌體的釋放,提出這可能是鋅離子調(diào)控細(xì)胞損傷的新機(jī)制。研究中還通過(guò)動(dòng)物試驗(yàn)進(jìn)一步證實(shí)鋅離子補(bǔ)充可以對(duì)OTA飼喂小鼠造成的腎損傷產(chǎn)生一定緩解作用。并發(fā)現(xiàn)鋅離子可與曲克蘆丁產(chǎn)生協(xié)同效應(yīng),緩解OTA誘導(dǎo)的腎細(xì)胞損傷。(3)曲克蘆丁是一種天然類黃酮,被認(rèn)為可以降低細(xì)胞炎癥反應(yīng)。本研究首次探索曲克蘆丁對(duì)OTA誘導(dǎo)腎毒性的緩解作用。研究發(fā)現(xiàn),曲克蘆丁可以通過(guò)緩解OTA造成體內(nèi)糖脂代謝紊亂,提高棕色脂肪活力,改善腎功能,減緩腎臟脂質(zhì)堆積等方式,緩解OTA造成的腎損傷。實(shí)驗(yàn)中還引入腎臟纖維化模型,證實(shí)曲克蘆丁可以通過(guò)改善體內(nèi)能量代謝、炎癥反應(yīng)、膠原堆積和脂質(zhì)合成的方式緩解腎細(xì)胞纖維化進(jìn)程。并通過(guò)建立小鼠棕色脂肪移植模型,探究棕色脂肪激活與腎臟損傷調(diào)節(jié)間的關(guān)系,證實(shí)棕色脂肪移植可以緩解小鼠腎臟中纖維化的進(jìn)程。綜上,本研究在探究OTA致毒機(jī)制的基礎(chǔ)上,進(jìn)一步證實(shí)了鋅和曲克蘆丁可以緩解OTA引起的細(xì)胞能量代謝紊亂及對(duì)腎臟功能的保護(hù);并探討了系統(tǒng)性能量代謝紊亂與腎臟疾病發(fā)生間的關(guān)系。為后續(xù)營(yíng)養(yǎng)素對(duì)緩解毒性損傷及細(xì)胞保護(hù)作用的研究提供了新思路。
【學(xué)位授予單位】：中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：R151
【圖文】：

Ｘ３７逡逑ＲＥＮＡＬ邋ＦＩＢＲＯＳＩＳ逡逑圖１－２胰島素抵抗與慢性腎損傷的發(fā)生逡逑Ｆｉｇ．邋１－２邋Ｉｎｓｕｌｉｎ邋ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ邋ａｎｄ邋ＣＫＤ邋ｐｒｏｇｒｅｓｓｉｏｎ．邋ＡＰ－１．邋ａｃｔｉｖａｔｏｒ邋ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ邋ｐｒｏｔｅｉｎ－１：邋ＢＡＤ．邋Ｂｃｌ－２－ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ邋ａｇｏｎｉｓｔ逡逑ｏｆ邋ｃｅｌｌ邋ｄｅａｔｌｉ：邋ＢＣＬ－２．邋Ｂ－ｃｅｌｌ邋ｌｙｍｐｈｏｉｎａ－２；邋ｃ－ＦＯＳ．邋ＡＰ－ｌ－ｃＦＯＳ邋ｓｕｂｕｎｉｔ；邋ｃ－ＪＵＮ．邋ＡＰ－ｌ－ｃＪＵＮ邋ｓｕｂｕｎｉｔ；邋ＥＲＫｓ．邋ｅｘｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ逡逑ｓｉｇｎａｌ－ｒｅｇｕｌａｔｅｄ邋ｋｉｎａｓｅｓ；邋Ｇｉｂ２，邋ｇｒｏｗｔｈ邋ｆａｃｔｏｒ邋ｒｅｃｅｐｔｏｒ－ｂｏｕｎｄ邋ｐｒｏｔｅｉｎ邋２；邋ＩＧＦ－１．邋ｉｉｉｓｕｌｉｉｉ－ｌｉｋｅ邋ｇｉｏｗｌｌｉ邋ｆａｃｔｏｒ－１；邋ＩＲＳ－１，逡逑ｉｎｓｕｌｉｎ邋ｒｅｃｅｐｔｏｒ邋ｓｕｂｓｔｒａｔｅ－１；邋ＭＥＫ．邋ｍｉｔｏｇｅｎ－ａｃｔｉｖａｔｅｄ邋ｐｒｏｔｅｉｎ邋ｔｙｒｏｓｉｎｅ／ｔｈｒｅｏｎｉｎｅ邋ｋｉｎａｓｅ；邋Ｐ．邋ｐｈｏｓｐｈａｔｅ：邋ｐ８５．邋ＰＩ３逡逑ｋｉｉｉａｓｅ－ｐ８５邋ｓｕｂｕｎｉｔ；邋ｐｌｌＯ？邋ＰＩ３邋ｋｉｉｉａｓｅ－ｐｌｌＯ邋ｓｕｂｕｎｉｔ；邋ＲＡＦ．邋ｒａｐｉｄｌｙ邋ａｃｃｅｌｅｒａｔｅｄ邋ｆｉｂｒｏｓａｒｃｏｍａ；邋ＲＡＳ，邋ｒａｔ邋ｓａｒｃｏｍａ；邋Ｓｈｅ．逡逑ＳＨ２－ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ邋ｃｏｌｌａｇｅｎ－ｒｅｌａｔｅｄ邋ｐｒｏｔｅｉｎ：邋Ｓｏｓ？邋ｓｏｎ邋ｏｆ邋ｓｅｖｅｎｌｅｓｓ邋ｇｕａｎｉｎｅ邋ｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ邋ｅｘｃｈａｎｇｅ邋ｆａ

外泌體是一種細(xì)胞分泌囊泡，具有脂質(zhì)雙分子層結(jié)構(gòu)，且直徑約為５０－１５０邋ｎｍ左右［１１２ｉＵ３］。逡逑從到人類，幾乎所有細(xì)胞均被認(rèn)為具有分泌外泌體的能力，包括細(xì)菌、植物及動(dòng)物細(xì)胞［１１２１１４＿１１６］。逡逑其合成和分泌途徑如圖１－５所示。外泌體內(nèi)容物包括蛋白質(zhì)、脂質(zhì)、代謝小分子和ｍＲＮＡ、逡逑ｍｉｃｒｏＲＮＡ、ＬｎｃＲＮＡ＊［１１７１１８］，且被認(rèn)為不含有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、線粒體和核蛋白等細(xì)胞器結(jié)構(gòu)，并只能逡逑由活細(xì)胞分泌［１１９］。外泌體中含有豐富的四分子交聯(lián)體家族成員，如ＣＤ９，邋ＣＤ６３，邋ＣＤ８１和ＣＤ８２逡逑等，以及參與囊泡形成和運(yùn)輸?shù)模粒欤椋鞍住Ｋ鼈儽挥米鳛殍b別外泌體的標(biāo)志物【１２ｅ］。同時(shí)，外泌逡逑體中還包含有一些黏附因子、促凋亡蛋白、熱休克蛋白等［１２（），１２１］。逡逑近年來(lái)已有b氳樂(lè)賦鐾餉諤逶諳赴鶘誦薷粗釁鸕階饔謾Ｌ逋馀嘌菤募涑渲矢上赴餉諤邋義媳恢な悼梢曰航獯笫笫由窬鶘耍郟保玻玻蕁Ｔ諫魴」萇掀は赴�，分柄崘炾带间充质干细胞绤泊的外辶x廈諤濉⒆允梢種萍粒常諄汆堰屎妥允捎盞技晾著撩顧卮硐赴�。发现灾]愁苡盞嫉納魴」萇掀ゅ義舷赴鶘四Ｐ橢校常諄汆堰始泳緦松魷赴拘緣牟�，而乐妙櫜G推甏涑渲矢上赴叢村義系耐餉諤逶蠐行б種屏松魴」萇掀は赴邢吡Ｌ宓牡蟯齪脫字⒁蜃擁牟以詿笫筇迥諭敝ゅ義鮮盜松鮮齬鄣悖郟保玻常蕁１礱髟諳赴鶘思靶薷賜揪噸

本文編號(hào)：2794508