【摘要】：目的:研究染錳大鼠脫錳5個月后運動功能、記憶能力、PARK2/Parkin表達水平和多巴胺能神經(jīng)元數(shù)量變化情況。方法:60只SPF級健康成年雄性SD大鼠(6周齡,160-180g)隨機分為對照組(生理鹽水)、1mg/kg Mn~(2+)組和5mg/kg Mn~(2+)組,每組20只。清晨對大鼠腹腔注射錳溶液,隔天1次,一個月后,每組隨機抽取10只大鼠進行轉(zhuǎn)棒實驗和Y迷宮實驗,分別檢測其運動和記憶功能。隨后取其中7只大鼠用戊巴比妥鈉麻醉后取全血,石墨爐原子吸收儀檢測全血中錳濃度,實時熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)檢測全血中PARK2mRNA表達水平;然后取腦,分離中腦和紋狀體,石墨爐原子吸收儀測各腦區(qū)錳濃度,實時熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)測各腦區(qū)PARK2 mRNA表達水平,蛋白印跡法檢測各腦區(qū)Parkin表達水平;剩余3只大鼠戊巴比妥鈉麻醉后用多聚甲醛灌注,免疫組化檢測多巴胺能神經(jīng)元數(shù)量。各組余下10只大鼠停止染錳,繼續(xù)常規(guī)飼養(yǎng)5個月后操作同前。期間每月對大鼠乙醚麻醉后取內(nèi)眥靜脈血用實時熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)動態(tài)追蹤血液中PARK2 mRNA表達水平變化情況。結(jié)果:與染錳1月時相比,脫錳5個月后5mg/kg Mn~(2+)組大鼠紋狀體及血錳濃度下降(t_(紋狀體)=4.54,t_(全血)=13.27,P0.05),但中腦和紋狀體錳濃度仍高于對照組(F_(中腦)=112.60,F_(紋狀體)=9.75,P0.05);大鼠轉(zhuǎn)棒距離增加(t=2.12,P0.05);腦內(nèi)多巴胺能神經(jīng)元數(shù)量增加,細胞樹突明顯增多,細胞形態(tài)較前飽滿,但胞漿染色性欠佳。與染錳1月時相比,脫錳1月后,染錳組大鼠血PARK2 mRNA表達水增加(P0.05)。與染錳1月時相比,脫錳5個月后5mg/kg Mn~(2+)組大鼠紋狀體PARK2 mRNA表達水平增加(t=-4.22,P0.05)且大鼠中腦、紋狀體Parkin表達量也增加(F_(中腦)=0.52、F_(紋狀體)=1.66,P0.05)。結(jié)論:1.染錳大鼠脫離錳暴露5個月后,5mg/kg Mn~(2+)組大鼠受損運動功能恢復(fù);2.PARK2 mRNA/Parkin水平降低可能是錳致中樞神經(jīng)系統(tǒng)中毒的作用機制之一。
【學(xué)位授予單位】：遵義醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號】：R114
【圖文】：

遵義醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文 曹玉民中腦錳濃度增加 73.85％，紋狀體錳濃度增加 282.98%，1 mg/kg Mn2+組大鼠血錳濃度增加 27.78%，中腦錳濃度增加 46.15%，紋狀體錳濃度增加 91.49%。

圖 2 大鼠轉(zhuǎn)棒實驗及 Y 迷宮實驗Fig.2 rod experiment and Y maze experiment of rats注：數(shù)據(jù)用(x±S，n=10）表示。*與同月對照組比較 P<0.05；a與染錳 1 個月 5mg/kg Mn2+組比較 P<0.05。表 2 染錳 1 個月及脫錳 5 個月大鼠轉(zhuǎn)棒實驗轉(zhuǎn)棒距離、轉(zhuǎn)棒速度及轉(zhuǎn)棒時間比較（ x±s）Tab.2 The compare of rats' rotation distance, average speed and time of rod experimentbetween manganese exposure 1 month and manganese removed 5 month（ x±s）Rotation distance(cm) Rotation speed(cm/s) Rotation time(s)manganeseexposure 1monthmanganeseremoved 5 monthmanganeseexposure 1monthmanganeseremoved 5monthmanganeseexposure 1monthmanganeseremoved 5month1547.09±192.53 1299.14±102.51 25.20±1.74 24.00±0.90 217.2±14.64 198.80±8.78

遵義醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文 曹玉民染錳 1 個月，與對照組比較，錳暴露組大鼠黑質(zhì)（部分基底神經(jīng)節(jié)）內(nèi)的 DAN丟失明顯（F=199.97，P<0.05）。在 1mg/kg Mn2+組中，黑質(zhì)中 DAN 減少了 41.27％，而在 5mg/kg Mn2+組中，DAN 丟失高達 76.56％。此外，錳暴露后細胞樹突長度變短，細胞形態(tài)飽滿性欠佳，部分呈固縮狀，胞體凸起減少，胞漿染色性欠佳，胞核明顯縮小。脫錳 5 個月，錳暴露組中的黑質(zhì)（部分基底神經(jīng)節(jié)）內(nèi)的 DAN 數(shù)量較染錳 1 月時增加，但 5mg/kg Mn2+組大鼠 DAN 數(shù)量仍低于對照組（F=9.43，P<0.05）。與對照組相比，1mg/kg Mn2+組大鼠黑質(zhì)中的 DAN 僅降低 20.83％，5mg/kg Mn2+組大鼠黑質(zhì)中的 DAN 僅丟失 22.41％。細胞樹突較染錳 1 月時明顯增多，細胞形態(tài)整體較染錳 1 月時飽滿，仍有部分呈固縮狀，胞體凸起減少，但 5mg/kg Mn2+組 DAN 漿染色性欠佳，胞核縮小。

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本文編號：2786957